ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 26.10.2023
Просмотров: 84
Скачиваний: 2
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Сульфат анилина. Из многочисленных модификаций рецептов реактива наиболее удобен принятый ГФ1Х (стр. 773): 5 частей сульфата анилина растворяют в 40 мл дистиллированной воды и 50 мл 50° спирта и разбавляют водой до 100 мл. Одревесневшие оболочки от реактива принимают ярко-желтую окраску. Прибавление к реактиву серной кислоты усиливает окраску, которая очень устойчива. Аналогично действует солянокислый анилин.
Сафранин. Один из самых распространенных красителей па одревесневшие оболочки. Применяется в виде 0,5—1% раствора в 50° этиловом спирте. Реактив хранится в склянке с притертой пробкой. Препарат помещают в краску на полчаса, затем промывают водой, переносят в 96° спирт для отмывания излишней краски и быстро промывают кислым спиртом (на 100 мл 96° спирта добавляют 2 капли соляной кислоты), который извлекает краску из всех тканей, кроме одревесневших. Препарат переносят в глицерин. Окраска одревесневших оболочек от сафранина розовая до малиново-красной. Интенсивность окраски зависит от степени одревеснения.
Паранитроанилиы. 1 % водный раствор паранитроанилина быстро окрашивает одревесневшие ткани в оранжевый цвет. После окраски объекты помещают в глицерин.
Реакции на опробковевтие и кутинизированные оболочки. Xлор-цинк-йод. Реактив окрашивает пробку и кутикулу в желтый цвет до коричневого. Эта реакция, однако, не специфична, так как частично этим реактивом окрашиваются одревесневшие и ослизневшие оболочки.
Раствор Судана III(состав реактива см. раздел «Реакции на жиры). Окрашивает опробковевшие и кутинизированные оболочки в оранжево-желтый цвет.
Реакции на крахмал. Крахмал в объектах следует наблюдать в воде или сильно разбавленном глицерине, без нагревания. Он находится в виде зерен различной формы и величины, характерных для каждого вида сырья; иногда крахмал находится в виде клейстера (например, в клубнях салепа), что зависит от способа заготовки сырья.
Единственной и вместе с тем классической реакцией на крахмал является йодная реакция. Для этой реакции можно применять раствор йода в спирте (если объект содержит значительное количество влаги), или в водном растворе йодида калия. Во всех случаях следует избегать больших концентраций йода.
Раствор йода (раствор Люголя). Приготовление раствора см. раздел «Реактивы на целлюлозу». Крахмальные зерна окрашиваются йодом в синий цвет, крахмальный клейстер — в красновато-фиолетовый. Йодная реакция очень яркая, чувствительная, однако нестойкая, вследствие чего в постоянных препаратах се сохранить не удастся.
Реакции на инулин. Инулин можно видеть в препаратах (в глицерине или в концентрированном растворе хлоралгидрата) в виде бесформенных, бесцветных, стекловидных глыбок, комков (смотреть без нагревания!). В свежих объектах, выдержанных в течение недели и более в 70° спирте или в глицерине, инулин имеет вид хорошо сформированных округлых сферокристаллов, обычно прилегающих к клеточным стенкам. Дополнительная обработка спиртом усиливает формирование сферокристаллов; они имеют лучистое радиальное строение и концентрическую слоистость. Наличие инулина в лекарственном сырье можно обнаружить некоторыми микрохимическими реакциями.
Спиртовой (15—20%) раствор α-нафтола или тимола (реактив Молиша). Препарат помещают в один из указанных реактивов, затем под края покровного стекла вводят 1—2 капли концентрированной серной кислоты; появляется розово-фиолетовое окрашивание (α-нафтол) или карминово-красное (тимол). Присутствие в срезе воды вызывает выпадение осадка, поэтому срезы лучше предварительно обсушить (можно полоской фильтровальной бумаги или осторожно подогреть на горелке). Указанные реактивы па полисахариды дают соответствующую реакцию и с крахмалом, поэтому при испытании на инулин всегда следует исключить присутствие крахмала по реакции с йодом.
Реакции на жиры. Для открытия жиров в лекарственном сырье пользуются различными красителями. Однако эти красители совершенно так же окрашивают эфирные масла, смолы, кутинизированные оболочки, содержимое млечников. Поэтому при исследовании лекарственного сырья па содержание жиров необходимо установить их локализацию и провести другие пробы.
Судан IIIокрашивает капли жирного масла в оранжево-красный цвет. Реактив состоит из 0,01 г анилиновой краски Судан Ш, 5 г спирта и 5 г глицерина. Срезы помещают на несколько часов в реактив, затем промывают в 50е спирте и переносят в глицерин. Для ускорения реакции препарат в Судане III можно нагреть, после чего вместо испарившегося реактива добавить под покровное стекло глицерин.
Алканин. Применяется спиртовой раствор корневищ алканы
, который окрашивает жиры в розовый или вишнево-красный цвет. Состав реактива: 0,5 г порошка корневищ алканы растворяют при нагревании в 20 мл 20% уксусной кислоты, добавляют 50 мл 50° спирта и фильтруют. При работе реактив разбавляют равным объемом воды. Срезы помещают в реактив на определенное время (10—12 часов), после чего промывают 50° спиртом и заключают в глицерин.
Шарлаховый красный употребляется в виде насыщенного раствора в 70е спирте. Окрашивает жиры в красный цвет.
Омыление по Розенталеру. Срезы помещают в 15% раствор едкой щелочи и слегка подогревают. Через некоторое время выделяются кристаллы жирнокислых солей в виде отдельных игл или пучков, что хорошо видно под микроскопом. Эта реакция дает возможность отличить жиры от эфирных масел, смол.
Реакции на эфирные масла, смолы, содержимое млечников. Все реактивы, используемые для открытия жиров, дают реакции с указанными веществами.
Цветные реакции на смолы те же, что и на жиры, и на каучук. Для обнаружения смол можно воспользоваться специфической реакцией. Концентрированный водный раствор уксуснокислой меди окрашивает смолы в изумрудно-зеленый цвет. Кусочки материала помещают в раствор от 5 дней до месяца, затем промывают в проточной воде и просматривают в глицерине.
Реакции на слизь. Слизь сильно преломляет свет, в воде разбухает и растворяется; в смеси спирта с глицерином представляется в виде стекловидной массы; в растворе хлоралгидрата постепенно становится слоистой; в спирте желтеет и становится слоистой.
Реакции с окрашиванием. Для окрашивания слизи применяют ряд реактивов. Срезы помещают на 5—10 минут в концентрированный раствор сернокислой меди, затем прополаскивают в воде и наносят 1—2 капли 50% раствора едкого кали. Слизь окрашивается в голубой цвет (растения сем. мальвовых, орхидных) или в зеленый (морской лук).
Метиленовый синий. Спиртовой раствор реактива (1: 5000) окрашивает слизь в голубой цвет. Можно использовать аналогичный раствор метиленового зеленого.
Водный раствор едкой щелочи (3—5 %) окрашивает слизь в лимонно-желтый цвет. Такую же реакцию дает раствор аммиака.
Реакция с тушью. Смесь туши и воды (продажную, жидкую черную тушь разводят водой 1: 10; реактив приготовляют по мере надобности). Исследуемое сырье измельчают в порошок и помещают па покровное стекло в каплю туши, тщательно размешивают иголкой, накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом. В поле зрения на темно-сером фоне выделяются белыми островками клетки со слизью, так как тушь в слизь не проникает. Эти клетки постепенно разбухают и растекаются благодаря растворению слизи в воде.
Реакция двойного окрашивания. Срез исследуемого объекта помещают на 20 минут в раствор хлорида окисного железа, затем переносят на короткое время в раствор метиленового синего, промывают водой и заключают в глицерин. При этом клетки со слизью окрашиваются в желтый цвет; механические волокна - в голубой; сосуды древесины - в зеленый.
Реакции на алкалоиды. Микрохимические реакции на алкалоиды проводятся с использованием реактивов
, осаждающих эти соединения. На предметное стекло берут порошок или мелкий соскоб, добавляют 2—3 капли 5% раствора уксусной кислоты, закрывают покровным стеклом. Через 2—3 минуты накладывают рядом другое покровное стекло, под которое засасывается жидкость, и убирают первое покровное стекло вместе с порошком. На некотором расстоянии от покровного стекла наносят каплю реактива на алкалоиды (Вагнера, Майера, Драгендорфа или др.) и осторожно палочкой соединяют каплю с уксуснокислым извлечением, находящимся под стеклом. По мере поступления реактива под стекло на границе жидкостей постепенно образуется мутная зона (смотреть па черном фоне без микроскопа).
Из микрохимических реакций на алкалоиды сравнительно хорошо воспроизводимой является реакция с йод-калия йодидом на алкалоиды атропин (гиосциамин), скополамин (в следующем сырье: лист белладонны, белены, дурмана обыкновенного, корень белладонны). Срезы из свежих частей растений просматривают в указанном реактиве; в клетках, содержащих алкалоиды, виден коричневый осадок, через некоторое время выпадают звездчатые кристаллы с металлическим оттенком.
Присутствие алкалоидов в свежем млечном соке мака снотворного можно обнаружить в виде многочисленных бесцветных призматических или звездчатых кристаллов, при действии концентрированной серной или разбавленной соляной кислоты.
Микрохимические реакции на алкалоиды в лекарственном сырье рекомендуется проводить со свежими растениями или с только что заготовленным сырьем. При микрохимическом исследовании на алкалоиды совершенно обязательно проведение контрольных реакций, так как алкалоидные реактивы реагируют по только с алкалоидами, но также и с некоторыми другими веществами (белки, частично гликозиды и углеводы). Обычно проводят контрольные - реакции после удаления алкалоидов из сырья. Для этой цели пользуются смесью винной кислоты и спирта (1:20), извлекая алкалоиды из сырья. Продолжительность обработки зависит от материала; иногда довольно продолжительная (неделю и больше).
Извлечение алкалоидов ведется в закрытых склянках, бюксах при частом взбалтывании. Обработанные таким образом срезы могут служить в качестве контрольных.
Реакции па гликозиды. Наличие гликозидов в сырье определяют методами гидролиза, с помощью цветных реакций, реакций осаждения, биологическими реакциями. Выявление гликозидов непосредственно в клетках растения сопряжено с большими трудностями и для многих групп гликозидов микрохимические реакции не разработаны. Они имеются лишь для некоторых гликозидов.