Файл: реакции студентам.docx

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения ориентировочной реакции агглютинации, полностью дано определение ориентировочной реакции агглютинации, отобраны необходимые принадлежности для постановки реакции.

2

С одного конца предметного стекла наносят каплю физиологического раствора для контроля. На другом конце стекла наносят каплю агглютинирующей сыворотки в разведении 1:20.

3

Перед каждым забором материала прокаливают бактериологическую петлю.

4

В каждую каплю прокаленной петлей вносят небольшое количество чистой культуры до получения гомогенной взвеси бактерий.

5

При положительной реакции через несколько минут в капле с сывороткой появится заметное скучивание бактерий, которое ускорится, если слегка покачивать стекло. Контрольная капля останется равномерно мутной. Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения реакции гемагглютинации, полностью дано определение реакции гемагглютинации, названы используемые компоненты реакции.

2

РГА ставят на специальных пластмассовых планшетах с лунками.

3

В 6 луночек вносят разведения вируса от 1:2 до 1:64. 7-я луночка – контроль эритроцитов.

4.

Во все луночки вносят по 0,5 мл 1% взвеси куриных эритроцитов. Планшет оставляют при комнатной температуре на 30 минут.

5.

В контрольной луночке отмечают осадок эритроцитов в виде «пуговки», в случае положительной реакции на дне луночек образуется осадок в виде «зонтика». Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения РТГА для обнаружения антител, полностью дано определение РТГА для обнаружения антител, названы используемые компоненты реакции.

2

Сыворотку больного разводят в лунках планшета от 1:10 до 1:320.

3

Во все луночки добавляют по 0,25 мл вирусного диагностикума соответствующего заболевания. Затем добавляют по 0,5 мл 1% взвеси куриных эритроцитов. Реакцию сопровождают тримя контролями:1. КС – сыворотка+эритроциты. 2. КВ – вирус+эритроциты. 3. КЭ – физиологический раствор+эритроциты. .Инкубируют 45 минут.

4

При положительной реакции в опытных луночках образуется осадок в виде «пуговки» до соответствующего титра. В контроле вируса – осадок в виде «зонтика», в контроле эритроцитов – в виде «пуговки», в контроле сыворотки – в виде «пуговки».

5

Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения РНГА, полностью дано определение РНГА для обнаружения антител, названы используемые компоненты реакции.

2

В ряд лунок полистеролового планшета вносят по 0,5 мл физиологического раствора, затем в 1-ю лунку вносят 0,5 мл исследуемой сыворотки в разведении 1:25 и готовят двукратные разведения путем переноса из одной лунки в другую. Получают разведения от 1:50 до 1:800.

3

В полученные разведения сыворотки добавляют по 0,1 мл эритроцитарного диагностикума.

Реакцию сопровождают 2-мя контролями: КА – контроль антигена (зонтик) – физиологический раствор и антиген

1. КС – контроль сыворотки (пуговка) – физиологический раствор и сыворотка. Планшет ставят в термостат при t-37^оС на 2 часа.

4

При положительном результате на дне лунок образуется осадок в виде «пуговки», при отрицательном - осадок в виде «зонтика».

5

Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения РТГА для определения типа вируса гриппа, полностью дано определение РТГА для определения типа вируса гриппа, названы используемые компоненты реакции.

2

В 5 луночек пластмассового планшета вносят по 0,25 мл вируссодержащего материала, добавляют типовые сыворотки против вируса гриппа – по 0,25 мл А0, А1, А2, В, С.

3

Затем – по 0,5 мл 1% куриных эритроцитов, планшет оставляют при комнатной температуре на 1 час.

4

Вирус гриппа относится к тому типу сыворотки, с которой образовался осадок в виде «пуговки».

5

Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения реакции кольцепреципитации, полностью дано определение реакции кольцепреципитации, отобраны необходимые принадлежности для постановки реакции.

2

В преципитационную пробирку наливают преципитирующую сыворотку и осторожно по стенке наслаивают преципитиноген.

3

При положительной реакции на границе обеих жидкостей появляется мутное кольцо (преципитат). В связи, с чем эту реакцию часто называют кольцепреципитацией.

4

Обязательным условием для постановки реакции является полная прозрачность антигена и антитела. В противном случае результаты реакции будут неясны. Реакция характеризуется высокой чувствительностью и специфичностью.

5

Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения РСК, полностью дано определение РСК, названы используемые компоненты реакции.

2

РСК проводится в два этапа: I-этап. Взаимодействие антигена и антитела, связывание происходит в 1-й пробирке (опыт). Во 2-й (КА) и 3-й (КС) пробирках связывания не происходит, т.к. они являются контрольными, в них нет одного из ингредиентов (или антигена, или антитела).

3

II-этап. Добавление гемолитической системы (гемолитическая сыворотка+эритроциты барана) для определения в каком состоянии находится комплемент (в связанном или свободном).

4

В случае положительного результата в опытной пробирке не произойдет гемолиз ввиду отсутствия свободного комплемента.

В контрольных пробирках произойдет гемолиз т.к. в присутствии свободного комплемента гемолитическая сыворотка гемолизирует эритроциты барана.

5

В случае отрицательного результата во всех 3-х пробирках произойдет гемолиз. Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения реакции, полностью дано определение, названы используемые компоненты реакции.

2

На середину чашки с питательным агаром кладут фильтровальную бумагу, заранее смоченную антитоксической противодифтерийной сывороткой.

3

С 2-х сторон от бумаги делают посев культур, выделенных от больных. Чашки помещают в термостат при t – 37^оС на 24 часа.

4

Через сутки учитывают результат: Линии преципитации (или «усики») образуются в местах взаимодействия экзотоксина с антитоксином. Происходит реакция нейтрализации токсина антитоксином.

5

Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения цветной пробы для определения типа вируса полиомиелита, полностью дано определение, названы используемые компоненты реакции.

2

В 3 пробирки с культурой клеток вносят по 0,25 мл вируссодержащего материала.

3

Затем вносят по 0,25 мл типовых сывороток вируса полиомиелита (I,II,III) в соответствующие пробирки.

4

Сверху заливают вазелиновым маслом по 0,6 мл. Инкубируют в термостате 48-72 часа.

5

Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения РИФ, полностью дано определение РИФ, названы используемые компоненты реакции.

2

Готовится препарат, содержащий исследуемые микроорганизмы (АГ).

3

Фиксируют его жидким фиксатором (ацетоном).

4

Обрабатывают специфической люминесцирующей сывороткой. Отмывают избыток сыворотки.

5

Высушивают препарат и рассматривают в люминесцентном микроскопе. При положительной реакции наблюдается свечение антигена. Прокомментировать полученный результат. Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения ПЦР, полностью дано определение ПЦР, названы используемые компоненты реакции.

2

Исследуемую ДНК собирают в пробирку. Прогревают. При этом комплементарные нити ДНК разъединяются. Этот этап называется денатурацией ДНК.

3

К образовавшимся одноцепочечным ДНК присоединяют праймеры. Этот этап называется «отжигом» (присоединением).

4

Фермент полимераза достраивает комплементарные цепи ДНК. Этот этап называется «элонгация» (удлинение).

Как правило, проводится 30 циклов, что позволяет получить 2³⁰копий участка ДНК возбудителя.

5

Объяснить механизм реакции.

№

Критерии оценки

1

Полностью названа цель применения ИФА, дано определение ИФА, названы используемые компоненты реакции.

2

Специфический антиген адсорбируют в лунках полистеролового планшета. Инкубируют с испытуемыми сыворотками человека 30 минут.

3

Отмывают несвязавшиеся иммуноглобулины промывочным раствором.

4

Связавшиеся иммуноглобулины выявляют с помощью антиглобулиновой сыворотки, к которой прикреплен фермент пероксидаза. Инкубируют 30 минут.

5

Добавляется субстрат (пероксид водорода) и индикатор (диамин бензидин), которые позволяют оценить ферментативную активность по интенсивности окраски. Прокомментировать полученный результат: принцип оценивания интенсивности окраски. Объяснить механизм реакции.