Файл: Кишечная палочка. Возбудители брюшного тифа, сальмонеллёзных токсикоинфекций. Микробиологическая диагностика.docx
ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 03.12.2023
Просмотров: 351
Скачиваний: 4
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Кишечная палочка. Возбудители брюшного тифа, сальмонеллёзных токсикоинфекций. Микробиологическая диагностика. 1. Общая характеристика семейства Enterobacteriaceae.Энтеробактерии (лат. Enterobacteriaceae) — семейство грамотрицательных палочкообразных споронеобразующих бактерий, факультативные анаэробы.Бактерии этого семейства являются наиболее частыми возбудителями кишечных инфекций. Их объединяет ряд общих признаков.
4. Факторы патогенности энтеропатогенных кишечных палочек.5. Бактериологический метод диагностики колиэнтеритов.Диагностика кишечных эшерихиозов (колиэнтеритов)Цель: выделение чистой культуры эшерихии и отличие ее от условнопатогенных представителей нормальной микрофлоры кишечника.Метод: бактериологический.Материал для исследования: фекальные массы.Схема работы:1-й этап - посев на среду Эндо (Левина);2-й этап:а) обнаружение окрашенных колоний, микроскопия их по Граму;б) предварительная дифференциация патогенных эшерихии от условнопатогенных (постановка РА на стекле со смесью сывороток к патогенным серогруппам);в) положительно реагирующая в РА колония отсевается на средуОлькеницкого; 3-й этап;а) учет изменения среды Олькеницкого (посинение и разрыв всей среды);б) определение чистоты выделенной культуры;в) определение серовара патогенной эшерихии (путем постановки РА с отдельными ОК-сыворотками на стекле и в пробирках с живой (определение К-антигена) и убитой кипячением (определение О-антигена)культурой;г) проба на индол, подвижность и чувствительность к антибиотикам. Серологический метод - постановка РА с сывороткой больного (на 2-ой неделе заболевания).6. Микробиология брюшного тифа, паратифов: биохимические свойства, антигенное строение, резистентность, факторы, патогенности.Сальмонеллы являются возбудителями брюшного тифа, паратифов А, В, С и других сальмонеллезов.Морфологические и тинкториальные свойства Сальмонеллы представляют собой короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами размером 0,7-1,5x2-5 мкмСальмонеллы подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиковНа поверхности сальмонелл располагаются пили (ворсинки, фимбрии), служащие для адгезии бактерий к клеткам макроорганизмаСальмонеллы не образуют спор. Некоторые виды сальмонелл (в частности, S. typhi и S. paratyphi C) имеют микрокапсулу
Сальмонеллы размножаются поперечным делениемКультуральные и биохимические свойстваСальмонеллы являются факультативными анаэробами. Он хорошо растут в аэробных условиях на простых питательных средах при температуре от 4С до 45С и рН 4,1-9,0. Оптимальная температура для роста сальмонелл равна 37ОС. На МПА сальмонеллы образуют серо-белые слегка выпуклые колонии R- и S-формы с голубоватым оттенком диаметром 2-4 ммВокруг колоний S. schottmülleri на МПА образуется слизистый приподнятый вал, проявляющийся на 2-5 сутки хранения культуры при комнатной температуре. Этот признак используется в дифференциальной диагностике сальмонелл. Дифференциально-диагностическими плотными питательными средами для сальмонелл являются среды Эндо, Плоскирева, Левина, висмут-сульфитный агар (ВСА). В частности, на среде Эндо сальмонеллы формируют серо-белые (бесцветные) или розоватые лактозоотрицательные колонииНа среде Плоскирева сальмонеллы также образуют серо-белые (бесцветные) мутноватые лактозонегативные колонииНа среде Левина вырастают слегка голубоватые или серо-белые колонии. На висмут-сульфитном агаре сальмонеллы образуют черные колонии с ртутным блеском (рисунок 20), окруженные черным ободком прокрашенной среды (возбудитель брюшного тифа) или колонии темно-зеленого цвета (паратифозные бактерии). Этот признак является характерным для сальмонелл.В жидких средах сальмонеллы вызывают диффузное помутнение. Сальмонеллы ферментируют глюкозу до кислоты и газа (S. typhi при разложении углеводов не образует газа), продуцируют сероводород, не разлагают лактозу и сахарозу, не разжижают желатин, не образуют индол. Ферментацию углеводов и образование сероводорода можно выявить на среде Клиглера (двухсахарном агаре, содержащем глюкозу и лактозу) или среде Олькеницкого (трехсахарном агаре, содержащем глюкозу, лактозу и сахарозу). В частности, готовая среда Клиглера имеет оранжево-красный цвет. Разложение глюкозы и образование сероводорода сопровождается почернением столбика агара с сохранением красного цвета “язычка” средыГотовая среда Олькеницкого также имеет красный цвет. Ферментация глюкозы проявляется изменением цвета столбика среды на желтый с сохранением красного цвета “язычка” среды. Наличие черного преципитата на границе столбика и скошенной части указывает на то, что сальмонеллы продуцируют сероводород
Резистентность Сальмонеллы в воде открытых водоемов, в почве и в комнатной пыли сохраняются до 3 месяцев. Они хорошо переносят низкие температуры, способны размножаться при температуре 4оС. При нагревании до 56°С сальмонеллы погибают через 45-60 минут, при температуре 70оС они погибают через 5-10 минут, при кипячении - мгновенно. Растворы дезинфицирующих веществ (5% фенол, 3% хлорамин, 3% лизол, этиловый спирт) убивают сальмонеллы в течение 2-3 минут. К большинству антибиотиков 16 сальмонеллы чувствительные. Однако в настоящее время отмечается неуклонный рост штаммов, обладающих резистентностью к антибиотикам. В последние годы в странах Азии полирезистентные штаммы возбудителя брюшного тифа составляют до 80% выделенных культур. Антигенная структура Сальмонеллы обладают соматическим О-антигеном и жгутиковым Н-антигеном. Некоторые сальмонеллы обладают Vi-антигеномСоматический О-антиген локализуется в клеточной стенке сальмонелл. Он представляет собой терминальную S-цепочку повторяющихся сахаров, связанных с R-ядром липополисахарида. Терминальные повторяющиеся единицы полисахарида располагаются на поверхности клетки в виде микроворсинок. О-антиген термостабильный, выдерживает кипячение в течение 2,5 часов, инактивируется формалином. Каждый О-антиген сальмонелл обозначается цифрой. В соответствии с содержанием тех или иных О-антигенов все сальмонеллы распределяются на серологические группы, которые обозначаются прописными буквами латинского алфавита (A, B, C, D и т. д.). В каждую серогруппу входят сальмонеллы с одним или несколькими идентичными О-антигенами. Например, серогруппа В включает сальмонеллы с О-антигенами 1, 4, 5 и 12, но специфичным для этой серогруппы является О-антиген 4. Почти все заболевания у человека вызваны сальмонеллами групп А, В, С, D и E. Жгутиковый Н-антиген представляет собой белок (флагеллин). Он может существовать в двух фазах: первой (специфической) и второй (неспецифической). Н-антигены первой фазы характерны для определенного вида сальмонелл, а антигены второй фазы встречаются у представителей разных видов. Это связано с тем, что синтез Н-антигена кодируется двумя независимыми генами. Функционирование одного гена исключает работу другого. Поэтому в каждой клетке может быть синтезирован только одна фаза Н-антигена. Первая фаза обозначается строчными латинскими буквами, вторая фаза - цифрами.
-
Это короткие, не образующие спор, палочки с закругленными концами, подвижные (перитрихи) или неподвижные, некоторые имеют капсулы. -
Аэробы или факультативные анаэробы. -
Характерна отрицательная окраска по Граму. -
Хорошо растут на обычных питательных средах с мясном экстрактом. -
На большинстве плотных сред энтеробактерии образуют круглые выпуклые блестящие S- (гладкие) колонии, а также часто обусловленные потерей капсулы плоские, неровные и зернистые R- (шероховатые) формы. -
Для них характерна ферментация глюкозы (и других углеводов) с образованием кислоты и газа. -
По отношению к лактозе их делят на лактоза- ферментирующие и лактоза - неферментирующие. -
Каталаза - положительны, восстанавливают нитраты в нитриты.
.
Escherichia coli – Грамотрицательные, подвижные (перитрихи), образующие микрокапсулу, не образующие спор, короткие палочки
Культуральные свойства
-
Является факультативным анаэробом, хорошо растет на простых питательных средах при 37°С и рН 7,2-7,6. -
Образует гладкие, слегка приподнятые, блестящие, полупрозрачные колонии на плотных питательных средах. -
в жидких питательных средах образует диффузную мутность и осадок
-
Обладает высокой биохимической активностью. -
Расщепляет глюкозу, лактозу, маннит, мальтозу, сахарозу с образованием кислоты и газа. -
Образует индол -
Не образует сероводород -
Некоторые биовары (лактозоотрицательные E.coli) не расщепляют лактозу
4. Факторы патогенности энтеропатогенных кишечных палочек.5. Бактериологический метод диагностики колиэнтеритов.Диагностика кишечных эшерихиозов (колиэнтеритов)Цель: выделение чистой культуры эшерихии и отличие ее от условнопатогенных представителей нормальной микрофлоры кишечника.Метод: бактериологический.Материал для исследования: фекальные массы.Схема работы:1-й этап - посев на среду Эндо (Левина);2-й этап:а) обнаружение окрашенных колоний, микроскопия их по Граму;б) предварительная дифференциация патогенных эшерихии от условнопатогенных (постановка РА на стекле со смесью сывороток к патогенным серогруппам);в) положительно реагирующая в РА колония отсевается на средуОлькеницкого; 3-й этап;а) учет изменения среды Олькеницкого (посинение и разрыв всей среды);б) определение чистоты выделенной культуры;в) определение серовара патогенной эшерихии (путем постановки РА с отдельными ОК-сыворотками на стекле и в пробирках с живой (определение К-антигена) и убитой кипячением (определение О-антигена)культурой;г) проба на индол, подвижность и чувствительность к антибиотикам. Серологический метод - постановка РА с сывороткой больного (на 2-ой неделе заболевания).6. Микробиология брюшного тифа, паратифов: биохимические свойства, антигенное строение, резистентность, факторы, патогенности.Сальмонеллы являются возбудителями брюшного тифа, паратифов А, В, С и других сальмонеллезов.Морфологические и тинкториальные свойства Сальмонеллы представляют собой короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами размером 0,7-1,5x2-5 мкмСальмонеллы подвижны за счет перитрихиально расположенных жгутиковНа поверхности сальмонелл располагаются пили (ворсинки, фимбрии), служащие для адгезии бактерий к клеткам макроорганизмаСальмонеллы не образуют спор. Некоторые виды сальмонелл (в частности, S. typhi и S. paratyphi C) имеют микрокапсулу
Сальмонеллы размножаются поперечным делениемКультуральные и биохимические свойстваСальмонеллы являются факультативными анаэробами. Он хорошо растут в аэробных условиях на простых питательных средах при температуре от 4С до 45С и рН 4,1-9,0. Оптимальная температура для роста сальмонелл равна 37ОС. На МПА сальмонеллы образуют серо-белые слегка выпуклые колонии R- и S-формы с голубоватым оттенком диаметром 2-4 ммВокруг колоний S. schottmülleri на МПА образуется слизистый приподнятый вал, проявляющийся на 2-5 сутки хранения культуры при комнатной температуре. Этот признак используется в дифференциальной диагностике сальмонелл. Дифференциально-диагностическими плотными питательными средами для сальмонелл являются среды Эндо, Плоскирева, Левина, висмут-сульфитный агар (ВСА). В частности, на среде Эндо сальмонеллы формируют серо-белые (бесцветные) или розоватые лактозоотрицательные колонииНа среде Плоскирева сальмонеллы также образуют серо-белые (бесцветные) мутноватые лактозонегативные колонииНа среде Левина вырастают слегка голубоватые или серо-белые колонии. На висмут-сульфитном агаре сальмонеллы образуют черные колонии с ртутным блеском (рисунок 20), окруженные черным ободком прокрашенной среды (возбудитель брюшного тифа) или колонии темно-зеленого цвета (паратифозные бактерии). Этот признак является характерным для сальмонелл.В жидких средах сальмонеллы вызывают диффузное помутнение. Сальмонеллы ферментируют глюкозу до кислоты и газа (S. typhi при разложении углеводов не образует газа), продуцируют сероводород, не разлагают лактозу и сахарозу, не разжижают желатин, не образуют индол. Ферментацию углеводов и образование сероводорода можно выявить на среде Клиглера (двухсахарном агаре, содержащем глюкозу и лактозу) или среде Олькеницкого (трехсахарном агаре, содержащем глюкозу, лактозу и сахарозу). В частности, готовая среда Клиглера имеет оранжево-красный цвет. Разложение глюкозы и образование сероводорода сопровождается почернением столбика агара с сохранением красного цвета “язычка” средыГотовая среда Олькеницкого также имеет красный цвет. Ферментация глюкозы проявляется изменением цвета столбика среды на желтый с сохранением красного цвета “язычка” среды. Наличие черного преципитата на границе столбика и скошенной части указывает на то, что сальмонеллы продуцируют сероводород
Резистентность Сальмонеллы в воде открытых водоемов, в почве и в комнатной пыли сохраняются до 3 месяцев. Они хорошо переносят низкие температуры, способны размножаться при температуре 4оС. При нагревании до 56°С сальмонеллы погибают через 45-60 минут, при температуре 70оС они погибают через 5-10 минут, при кипячении - мгновенно. Растворы дезинфицирующих веществ (5% фенол, 3% хлорамин, 3% лизол, этиловый спирт) убивают сальмонеллы в течение 2-3 минут. К большинству антибиотиков 16 сальмонеллы чувствительные. Однако в настоящее время отмечается неуклонный рост штаммов, обладающих резистентностью к антибиотикам. В последние годы в странах Азии полирезистентные штаммы возбудителя брюшного тифа составляют до 80% выделенных культур. Антигенная структура Сальмонеллы обладают соматическим О-антигеном и жгутиковым Н-антигеном. Некоторые сальмонеллы обладают Vi-антигеномСоматический О-антиген локализуется в клеточной стенке сальмонелл. Он представляет собой терминальную S-цепочку повторяющихся сахаров, связанных с R-ядром липополисахарида. Терминальные повторяющиеся единицы полисахарида располагаются на поверхности клетки в виде микроворсинок. О-антиген термостабильный, выдерживает кипячение в течение 2,5 часов, инактивируется формалином. Каждый О-антиген сальмонелл обозначается цифрой. В соответствии с содержанием тех или иных О-антигенов все сальмонеллы распределяются на серологические группы, которые обозначаются прописными буквами латинского алфавита (A, B, C, D и т. д.). В каждую серогруппу входят сальмонеллы с одним или несколькими идентичными О-антигенами. Например, серогруппа В включает сальмонеллы с О-антигенами 1, 4, 5 и 12, но специфичным для этой серогруппы является О-антиген 4. Почти все заболевания у человека вызваны сальмонеллами групп А, В, С, D и E. Жгутиковый Н-антиген представляет собой белок (флагеллин). Он может существовать в двух фазах: первой (специфической) и второй (неспецифической). Н-антигены первой фазы характерны для определенного вида сальмонелл, а антигены второй фазы встречаются у представителей разных видов. Это связано с тем, что синтез Н-антигена кодируется двумя независимыми генами. Функционирование одного гена исключает работу другого. Поэтому в каждой клетке может быть синтезирован только одна фаза Н-антигена. Первая фаза обозначается строчными латинскими буквами, вторая фаза - цифрами.