Файл: Улучшение биодоступности на примере производных дексаметазона. Получение и фармацевтический анализ.docx
Добавлен: 24.10.2023
Просмотров: 80
Скачиваний: 4
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Рисунок 10.
Рисунок 11.
Рисунок 12.
Из таблицы видно, что в разных фармакопеях описаны сходные реакции для качественного определения дексаметазона. Реакция, которая описана в Белорусской Фармакопее, но отсутствует в Российской - реакция обнаружения ионов фтора. Также в Белорусской Фармакопее присутствуют реакции для обнаружения ионов натрия и фосфат-ионов (ввиду того, что субстанция дексаметазона натрия фосфат).
2.2. Физико-химические методы определения качества дексаметазона.
Несмотря на наличие качественных реакций на дексаметазон, основными методами определения являются физико-химические, такие как ИК-спектрометрия и ТСХ.
2.2.1.ИК-спектрометрия.
Вследствие простоты получения спектров и технического совершенства приборов наибольшее распространение получил метод ИК спектроскопии.Существуют различные способы введения образца в ИК спектрометр: раствор веществ, тонкие пленки, пасты, твердые вещества.[1]
Наличие определенных характеристических полос в инфракрасном спектре является указанием на наличие в молекуле соединениях функциональных групп, которым это поглощение соответствует. Совокупность всех полос поглощения, образующая инфракрасный спектр поглощения данного вещества, однозначно определяет его индивидуальность при условии сохранения стандартных условий определения. Особое значение это имеет для стероидов, поскольку установление подлинности препарата другими методами значительно осложнено [2]
Это дает возможность по ИК-спектрам проводить качественный и количественный анализы вещества во всех агрегатных состояниях.[12]
ИК-спектрометрия проводится идентично и по Российской, и по Белорусской Фармакопее. Снимают ИК-спектры в диске с калия бромидом в области от 4000 до 400 см. Спектр по положению полос поглощения должен спектру стандартного образца дексаметазона (в ГФ) и дексаметазона натрия фосфата (в БФ).
На рисунке 13 представлен ИК-спектр дексаметазона натрия фосфата из Белорусской Фармакопеи.
Рисунок 13.
2.2.2.Тонкослойная хроматография.
В таблице №2 представлены некоторые особенности проведения ТСХ по разным Фармакопеям.
| Признак | Российская Фармакопея | Белорусская Фармакопея |
| Испытуемый раствор | 10 мг субстанции растворяют в 10 мл смеси растворителей. | 10 мг испытуемого образца растворяют в метаноле и доводят до объема 10 мл этим же растворителем. |
| Растворитель | Метанол - метиленхлорид - 1:9. | метанол |
| Пластинка | ТСХ пластинка со слоем селикагеля F/// | ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254 |
| Подвижная фаза | Бутанол, насыщенный водой - толуол - эфир 5:10:85 | Кислота уксусная ледяная - вода - бутанол 20:20:60 |
| Раствор сравнения | А) 20 мг стандартного образца дексаметазона в 20 мл смеси растворителей | А) 20 мг стандартного образца дексаметазона натрия фосфата в 20 мл метанола |
| Б) 10 мг стандартного раствора бетаметазона в 10 мл раствора сравнения А | Б) 10 мг стандартного образца дексаметазона натрия фосфата в 10 мл метанола | |
| Наносимый объем пробы | 5 мкл | 5 мкл |
| Высушивание | на воздухе | на воздухе |
| Проявление | После высушивания анализируют в УФ-свете при 254 нм. | А) Просматривают в УФ-свете при 254 нм. |
| Б) пластинку опрыскивают спиртовым раствором кислоты серной нагревают при температуре 120°С в течение 10 мин или до проявления пятен и охлаждают. Просматривают при дневном свете и в ультрафиолетовомсвете при длине волны 365 нм. |
3.Методы количественного определения дексаметазона.
Для количественного определения субстанции дексаметазона используют физико-химические методы.
3.1.Метод ВЭЖХ.
Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии - наиболее перспективный аналитический вариант классической колоночной хроматографии в современном приборном исполнении. ВЭЖХ позволяет проводить одновременное разделение сложных проб на составляющие их компоненты, детектирование большинства компонентов, измерение концентрации одного или нескольких соединений (в зависимости от конкретных аналитических задач и наличия стандартных образцов). Метод ВЭЖХ широко применяется для целей количественного химического анализа в экологии, санитарно-гигиенических и ветеринарных исследованиях, при контроле качества и сертификации пищевой и сельскохозяйственной продукции, в медицине, фармацевтике, нефтехимии, криминалистике и пр. [10]
Одним из наиболее активно развивающихся методов анализа биологически активных веществ является высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Основное преимущество метода ВЭЖХ- возможность анализа широкого класса соединений без их предварительной модификации. [3]
Количественное определение дексаметозона проводят методом ВЭЖХ.
Условия проведения анализа.
Растворы защищают от света и используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4оС не более суток.
Подвижная фаза. Вода - ацетонитрил 70:30.
Испытуемый раствор. Около 30 мг (точная навеска) испытуемой субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 4,0 мл метанола и доводят объем полученного раствора ПФ до метки.
Стандартный раствор. Около 30 мг (точная навеска) стандартного образца дексаметазона помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 4,0 мл метанола и доводят объем раствора ПФ до метки.
Условия хроматографирования
| Колонка | 25 × 0,40 см, октилсилил силикагель 5 мкм |
| Температура колонки | 25 оС |
| Скорость потока | 2 мл/мин |
| Детектор | спектрофотометрический, 254 нм |
| Объём вводимой пробы | 20 мкл |
Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика дексаметазона должно быть не более 1,0 % (6 определений).
Содержание дексаметазона C22H29FO5 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (
) вычисляют по формуле:
где:
– площадь пика дексаметазона на хроматограмме испытуемого раствора;
– площадь пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения;
– навеска субстанции, мг;
– навеска стандартного образца дексаметазона, мг;
–потеря в массе при высушивании в субстанции, %;
– содержание дексаметазона C22H29FO5 в стандартном образце, %.3.2. Абсорбционная спектрофотометрия в ультрафиолетовой области.
Спектроскопические методы анализа основаны на избирательном поглощении электромагнитного излучения анализируемым веществом и служат для исследования строения, идентификации и количественного определения светопоглощающих соединений (в том числе и дексаметазона).[4]
Ультрафиолетовая спектрофотометрия используется на всех этапах фармацевтического анализа (испытания на подлинность, чистоту, количественное определение) и является одним из основных общих методов анализа лекарственных веществ и их лекарственных форм.[2]
Методика проведения анализа.
0,100 г испытуемого образца растворяют в воде и доводят до объема 100,0 мл этим же растворителем. 10,0 мл полученного растворадоводят водой до объема 500,0 мл. Измеряют оптическую плотность полученного раствора при 241,5 нм.
Содержание дексаметазона натрия фосфата рассчитывают с учетом удельного показателя поглощения, равного 303.[7]
Заключение.
Дексаметазон - синтетический глюкокортикоид, который широко используется в клинической практике в настоящее время. Он применяется в качестве противовоспалительного, противоаллергического, иммунодепрессивного и противошокового средства.
В ходе работы были проанализированны физико-химические свойства дексаметазона. Он обладает как окислительными, так и восстановительными свойствами.
Был представлен метод синтеза вещества. Дексаметазон может быть получен из фитостеринов через ряд химических превращений.
Также были описаны методы качественного и количественного анализа дексаметазона.
Список литературы:
1. Анисимова Н.А. Идентификация органических соединений: учебное пособие (для студентов, обучающихся по специальности «химия»). - Горно- Алтайск: РИО ГАГУ, 2009. 95с
2. Арзамасцев А.П. Ултрафиолетовые и инфракрасные спектры лекарственных веществ: Атлас: Вып. I Стероиды.- М.: Медицина, 1975.- 151 с.
3. Высоцкий В.И. Использование ВЭЖХ-МАСС-спектрометрии в анализе биологически активных веществ из морских источников // Журнал Известия ТИНРО (Тихоокеанского научно-исследовательского рыбохозяйственного центра).- 2011.- том 129
4. Государственная фармакопея РФ. - 14-е изд. - Ч. 1. - М.: Медицина, 2018
5. Государственная фармакопея РФ. - 14-е изд. - Ч. 3. - М.: Медицина, 2018
6. Глущенко Н.Н. Фармацевтическая химия: Учебник для студ. сред. проф. учеб. заведений / Н.Н. Глущенко, Т.В. Плетенева, В.А. Попков; Под ред. Т.В. Плетеневой. — М.: Издательский центр «Академия», 2004. — 384 с.
7. Государственная фармакопея Республики Беларусь. В 3 т. Т. 3. Контроль качества фармацевтических субстанций / УП «Центр экспертиз и испытаний вздравоохранении»; под общ. ред. А. А. Шерякова. – Минск: Минский государственныйПТК полиграфии им. В. Хоружей, 2009. – с. 251-254.