ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 16.04.2021
Просмотров: 14181
Скачиваний: 135
L---+--------+--------+------------+-------+---------+------------
Активность испытуемого препарата по отношению к стандартному образцу:
_ _ 2 _ 2
Y = 15,8; (Yс - Yс) = 11,38; Yи = 14,6; (Yи - Yи) = 5,64;
-----------
_ / 11,38 ------
SYс = +/- /----------- = +/- / 0,379 = +/- 0,61 мл/кг;
\/ 6 x (6 - 1) \/
----------
_ / 5,64 ------
SYи = +/- /----------- = +/- / 0,188 = +/- 0,43 мл/кг;
\/ 6 x (6 - 1) \/
SYс х 100 0,61 х 100
--------- = +/- ------------ = +/- 3,8%;
_
Yс 15,8
_
SYи х 100 0,43 х 100
--------- = +/- ------------ = - 2,9%.
Yи 14,6
15,8 х 100
------------ = 108%.
14,6
Различие средних: 15,8 - 14,6 = 1,2 мл/кг.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
---------------------
/ 11,38 + 5,64 12
s = +/- /-------------- х ----- = +/- 0,75 мл/кг.
d \/ 12 - 2 36
Величина t при 12 - 2 = 10 равна 2,23 [см. таблицу значений
t(P, f); ГФ XI, вып. 1, с. 249].
Отсюда s х t = 0,75 х 2,23 = 1,67 мл/кг.
d
Как видно из полученных данных, разность средних (1,2 мл/кг)
меньше величины s х t(1,67 мл/кг), а активность испытуемого
d
препарата отличается от активности стандартного лишь на 8%.
Следовательно, испытуемый препарат по своей активности
удовлетворяет требованиям.
Определение активности испытуемого препарата в ГЕД
Для выражения активности испытуемого препарата в голубиных единицах действия (ГЕД)
расчет проводят для каждого голубя по формуле:
К х m
А = -----
а
где К - разведение испытуемого препарата; m - масса голубя в килограммах; а - доза разведенного
препарата в миллилитрах.
Из данных, полученных в опытах, выводят среднее число ГЕД и вычисляют в процентах
отклонение отдельных опытов от среднего числа.
Пример расчета. Определение числа ГЕД для строфантина К.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.
------T---------T-----------T--------T-------T-----T-------------¬
¦
N
¦
Масса
¦
Разведение
¦
Число
¦
Доза,
¦
Число
¦
Отклонение
¦
¦
опыта
¦
голубя,
¦
гликозида
¦
введений
¦
мл
¦
ГЕД
¦
от средней,
¦
¦
¦
кг
¦
¦
(доз)
¦
¦
¦
%
¦
+-----+---------+-----------+--------+-------+-----+-------------+
¦
1
¦
0,335
¦
1:60000
¦
15
¦
4,5
¦
4467
¦
8,9
¦
¦
2
¦
0,301
¦
1:60000
¦
15
¦
4,5
¦
4013
¦
2,1
¦
¦
3
¦
0,335
¦
1:60000
¦
18
¦
5,4
¦
3722
¦
9,2
¦
¦
4
¦
0,325
¦
1:60000
¦
17
¦
5,1
¦
3823
¦
6,8
¦
¦
5
¦
0,332
¦
1:60000
¦
16
¦
4,8
¦
4150
¦
1,1
¦
¦
6
¦
0,400
¦
1:60000
¦
18
¦
5,4
¦
4445
¦
8,3
¦
L-----+---------+-----------+--------+-------+-----+--------------
Среднее число ГЕД = 4103.
Сведения о требуемом содержании ЛЕД, КЕД и ГЕД в отдельных препаратах и растительном
сырье, а также методики их определения приведены в соответствующих фармакопейных статьях.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ИНСУЛИНА
Активность испытуемого препарата инсулина определяют путем сопоставления его
гипогликемического (сахаропонижающего) действия с гипогликемическим действием стандартного
образца инсулина.
Стандартный образец и единица действия инсулина
Стандартный образец инсулина представляет собой препарат высокоочищенного инсулина,
активность которого определена путем многократного сопоставления с активностью международного
стандарта и составляет не менее 25 ЕД в 1 мг. За единицу действия (ЕД) принимают специфическую
активность количества массы стандартного образца, эквивалентного по биологическому действию 1
международной единице инсулина.
Примечание. Приготовление растворов стандартного образца и испытуемого препарата
инсулина. Точную навеску стандартного образца инсулина растворяют в растворе
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.
хлористоводородной кислоты (0,003 моль/л) с рН 2,7-3,0, содержащем консервант в такой же
концентрации, как испытуемый препарат.
Срок годности основного раствора стандартного образца инсулина 4 мес при температуре 4
град. С.
Перед опытом основной раствор стандартного образца инсулина разводят раствором
хлористоводородной кислоты (0,003 моль/л) до концентрации 1 ЕД в 1 мл. Испытуемый препарат
инсулина разводят этим же раствором хлористоводородной кислоты до концентрации 1 ЕД в 1 мл,
исходя из его предполагаемой активности.
Метод определения биологической активности
Определение биологической активности инсулина проводят на здоровых кроликах массой 2,5-
3,5 кг. Животных массой 1,8-2,3 кг предварительно не менее 14 сут содержат в условиях вивария, где
они получают овес, сено или свежую траву, корнеплоды, комбинированный корм и воду. По
истечении этого срока определяют чувствительность кроликов к инсулину. Для этого кроликам
дважды с интервалом 7-8 сут после 18 ч голодания вводят подкожно раствор стандартного образца
инсулина из расчета 0,5 ЕД на 1 кг массы тела животного и определяют величину снижения
концентрации сахара в крови в процентах. Кровь для исследования берут из краевой вены уха
животных до введения инсулина и через 1,5 и 2,5 ч после его введения (для расчета берут среднюю
концентрацию сахара в крови из двух определений после введения инсулина). Кровь берут в
условиях, не допускающих чрезмерного волнения кроликов. Из опытов исключают животных с
исходной концентрацией сахара в крови ниже и выше пределов, установленных для используемого
метода определения содержания сахара в крови (ниже 75 мг % и выше 120 мг % для
феррицианидного метода, ниже 52 мг % и выше 94 мг % для глюкозооксидазного метода), а также тех
животных, которые реагируют на введение инсулина судорогами или у которых снижение
концентрации сахара в крови составляет менее 15% по отношению к исходной концентрации.
Определение биологической активности инсулина проводят не ранее чем через 7-8 сут после
испытания на чувствительность.
Отобранных для опытов кроликов лишают корма (но не воды) на 18 ч, предшествующих
введению инсулина. Животных распределяют на две группы способом случайного выбора (в каждой
группе должно быть не менее 9 кроликов). Непосредственно перед введением инсулина кроликов
взвешивают, и определяют исходную концентрацию сахара в крови. Кроликам одной группы вводят
подкожно по 0,5 ЕД стандартного образца инсулина (S) на 1 кг массы тела, кроликам другой группы -
такую же дозу испытуемого препарата инсулина (Т). Через 1,5 и 2,5 ч после введения инсулина у
животных снова определяют концентрацию сахара в крови.
Для каждого кролика рассчитывают снижение концентрации сахара (X) в крови в процентах по
формуле:
а - b
Х = ------- х 100,
а
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.