Файл: Лекция Туляремия История открытия Микробиология История открытия.pptx

Лекция Туляремия

История открытия
Микробиология

История открытия

1910 г. – экспедиция , работавшая под руководством G.W МcCоу с участием C.W. Chapin, выявила среди земляных белок и других грызунов эпизоотию чумоподобных заболеваний, при которых возникали бубоны, очень напоминавшие чумные.
Свое название туляремия получила по имени находящейся в Калифорнии (США) местности Туляре («волчья трава»), населенной большим количеством разнообразных грызунов

История открытия

1921 г. Эдвард Фрэнсис (Edward Francis) выделил туляремийный микроб от человека. Впервые дал полное описание. В его честь был назван род бактерий, к которому относится возбудитель туляремии

История открытия

30-70-ые гг. прошлого века – широкомасштабные исследования по туляремии в СССР проведены российским ученым-микробиологом Н.Г. Олсуфьевым. Были определены природные очаги инфекции и предложена классификация возбудителя

Микробиология

Таксономическое положение

Порядок Thiotrichales

Семейство Francisellaceae,

Род Francisella

Вид Francisella tularensis

Четыре подвида: 1. Неарктический (F. tularensis subsp. tularensis), 2. Среднеазиатский (F. tularensis subsp. mediasiatica),

3. F. tularensis subsp. novicida (F. novicida)

4. Голарктический (F. tularensis subsp. holarctica):

биовар I (эритромицин-чувствительный (EryS), распространенный в Старом и Новом свете,
биовар II (эритромицин-резистентный (EryR), выделяемый только в некоторых регионах Европы и Азии,
японский биовар (bv. japonica)

Характеристика подвидов F. tularensis

Характерна вариабельность размеров, формы и тинкториальных свойств.

Взвесь вирулентного штамма F. tularensis, приготовленная по стандарту мутности ОСО (109 м.к./мл) соответствует 1010 м.к./мл, вакцинного штамма - 5×109 м.к./мл

Мазок-отпечаток селезенки

Клетки туляремийного микроба имеют сиреневатый цвет, расположены группами по 5-10.

Культуральные свойства

Хемоорганогетеротроф, факультативный анаэроб.

На простых питательных средах не растёт, необходимы среды, содержащие витамины, яичный желток, кровь, экстракты органов и тканей животных, для роста необходим цистеин.

---

На агаризованных средах образует мелкие, каплевидные беловатые колонии.

Обязательными компонентами питательных сред для культивирования туляремийного микроба являются цистеин, тиамин, глюкоза, а также дефибринированная кровь (до 10 %) или сыворотка (10 %)

Желточная среда Мак-Коя и Чепина
Среда Емельяновой
Среда Анциферова
среда Чемберлена, оптимизированная по содержанию аминокислот, витаминов и ионов железа
FТ-агар
бульон Мюллера-Хинтона
BHI
триптиказо-соевый бульон

Оптимальная температура культивирования 37-38 °С, рН среды 6,8-7,4.

а - вирулентный щтамм 170;

б - вакцинный штамм 15.

Колонии беловатые, выпуклые, круглые с ровными краями и гладкой блестящей поверхностью, нередко отличаются вариабельностью размеров,

а, б - штамм Schu; в - штамм 503. Микрофотосъемка в падающем (а) и проходящем (б, в) све­те. х13.

В падающем свете колонии в форме белых полусфер с ровными края­ми и гладкой зеркальной поверхно­стью (а).

В проходящем свете они зеленовато-коричневые и светло-коричневые в форме уплощенных полу­сфер или с небольшим конусовидным центром. Края их ровные, поверхность гладкая, может быть покрыта нерастворимыми компонентами питательной среды (б, в).

Биохимическая активность:

Ферментирует до кислоты без газа некоторые углеводы:
глюкозу и мальтозу
Часть штаммов разлагает маннозу и левулёзу
Образует сероводород Разлагает глюкозу, мальтозу, часть штаммов, глицерин (с кислотообразованием).

Штаммы разных подвиды туляремийного микроба отличаются по биохимическим особенностям:

Голарктический – не ферментирует глицерин и цитруллин

Неарктический – ферментирует глицерин, не ферментирует цитруллин

Среднеазиатский – ферментирует глицерин и цитруллин

Строение генома

Размер хромосомы около 1830 т.п.н.
Содержание G+C пар 33-36 %
У большинства штаммов Francisella spp. не обнаружены собственные фаги и плазмиды.

---

Исключения:

F. novicida-like F6168 – pFNL10 (1994)

F. philomiragia ATCC 25016 – pF242 (2009)

F. philomiragia ATCC 25017 – pF243 (2009)

Клеточная оболочка F. tularensis

Остров патогенности FPI (Francisella pathogenicity island)

Размер 30 т.п.н.
фланкирован транспозазами
17 открытых рамок считывания
По две копии у F. tularensis и F. tularensis subsp. holarctica LVS, одна копия у F. novicida

Классификация носителей туляремийного микроба

Высоковосприимчивые и высокочувствительные к возбудителю туляремии (I группа) 56 видов, из 3 отрядов (насекомоядные – Eulipotyphla, зайцеобразные – Lagomorpha, грызуны – Rodentia) и 10 семейств (кротовые – Talpidae, землеройковые – Soricidae, зайцевые – Leporidae, мышовковые – Sminthidae, пятипалые тушканчики – Allactagidae, слепышовые – Spalacidae, цокориные – Myospalacidae, соневые – Gliridae, хомяковые – Сricetidae, мышиные – Muridae). Течение инфекции – острая септицемия, гибель на 6-10 день, интенсивное обсеменение органов.
Высоковосприимчивые, но малочувствительные видов (II группа) 26 видов из 2 отрядов (насекомоядные и грызуны) и 9 семейств (ежовые, кротовые, землеройковые, беличьи – Sciuridae, соневые, нутриевые – Myocastoridea, бобровые – Castoridae, мышиные, хомяковые). Течение инфекции доброкачественное и обсеменение органов незначительное, к 10 дню элиминация возбудителя, развитие постинфекционного иммунитета. 
Маловосприимчивые и практически нечувствительные к возбудителю туляремии видов млекопитающих (III группа) 19 видов из 3 отрядов (хищные – Сarnivora, непарнокопытные – Perissodactyla, парнокопытные – Artiodactyla) и 7 семейств (псовые – Canidae, куньи – Mustelidae, кошачьи – Felidae, лошадиные – Equidae, свиные – Suidae, верблюдовые – Camelida, полорогие – Bovidae). Латентное течение.

Лабораторные животные

I группа чувствительности

Белые мыши
Морские свинки

II группа чувствительности

Кролики
Белые крысы

Устойчивость во внешней среде:

Чувствительны к действию высоких температур: При температуре 100° С бактерии туляремии гибнут мгновенно, при температуре 60° С - сохраняются 20 мин.
Устойчивы к низким температурам: При низких температурах и во влажной почве возбудители сохраняются до 4-5 мес. При 1° С в воде они сохраняются до 9 мес, зерне и соломе при 0° С - до 150 дней, хлебе - до 14 дней, мясе - до 30 дней и т. д.

---

В членистоногих сохраняется длительно (блохи – 5 мес, комары – 43 дня, иксодовые клещи – 2 мес)
Дезрастворы (2 % карболовая кислота, 3 % лизол, 1-2 % хлорамин, 3 % перекись водорода) убивают микроб за 1о-15 мин.

Чувствительность к антимикробным препаратам:

Не чувствителен к пенициллину, полимиксину, сульфаниламидам, цефалоспоринам
Чувствителен к аминогликозидам, тетрациклину, рифампицину, хлорамфениколу, нитрофуранам, хинолонам
Для всех штаммов туляремийного микроба выявлена β-лактамазная активность, за исключением культур F. tularensis подвида mediasiatica.

---