ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 07.11.2023
Просмотров: 17
Скачиваний: 2
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
БИОХИМИЯ КРОВИ . Свертывающая система крови
ВолгГМУ 2020
ВолгГМУ 2020
План Стадии системы гемостаза Гемостатический баланс Факторы системы свертывания крови Внешний путь свертывания крови Внутренний путь свертывания крови Каскадный механизм активации ферментов Тромбоциты, роль в свертывании крови Этапы образования фибринового тромба, роль витамина К Система фибринолиза, система противосвертывания
Фибринолитический процесс Особенности гемостаза у новорожденных Гемофилия
Фибринолитический процесс Особенности гемостаза у новорожденных Гемофилия
защитная система организма, обеспечивающая сохранение крови в жидком состоянии в пределах кровеносных сосудов и образование тромбов в области повреждения стенки сосудов. Гемостатический процесс может быть подразделён на пять стадий
1) локальная вазоконстрикция;
• 2) формирование тромбоцитарного тромба,
• 3) стабилизация его фибрином 4) ретракция тромба
• 5) его растворение после восстановления повреждённой стенки сосуда.
Система гемостаза
Гемостатический баланс
за счет компенсаторного взаимодействия система гемостаза поддерживает кровь в жидком состоянии в течение всей жизни, в тоже время при повреждении кровь быстро сворачивается, купируя кровотечение. При смещении гемостатического баланса за рамки физиологических норм возникают условия для развития патологических кровотечений или тромбозов
Гемостаз:
Повреждение
Тромбоциты
Активация
Агрегация
Сосуды
Сокращение
Свертывание
Активация
Фибриновый тромб
Тромбин
Фибрин
Ограничение
кровотока
Тканевые
факторы
Первичный тромб
Нервная
система
1) локальная вазоконстрикция;
• 2) формирование тромбоцитарного тромба,
• 3) стабилизация его фибрином 4) ретракция тромба
• 5) его растворение после восстановления повреждённой стенки сосуда.
Система гемостаза
Гемостатический баланс
за счет компенсаторного взаимодействия система гемостаза поддерживает кровь в жидком состоянии в течение всей жизни, в тоже время при повреждении кровь быстро сворачивается, купируя кровотечение. При смещении гемостатического баланса за рамки физиологических норм возникают условия для развития патологических кровотечений или тромбозов
Гемостаз:
Повреждение
Тромбоциты
Активация
Агрегация
Сосуды
Сокращение
Свертывание
Активация
Фибриновый тромб
Тромбин
Фибрин
Ограничение
кровотока
Тканевые
факторы
Первичный тромб
Нервная
система
Основные компоненты системы свёртывания крови были идентифицированы к середине х годов. Называли по фамилиям больных или по предполагаемому характеру выполняемой функции. В 1957 г Международный комитет по номенклатуре факторов свёртывания крови ввёл цифровые обозначения плазменные факторы свёртывания были пронумерованы римскими цифрами,
а тромбоцитарные – арабскими, активированные формы факторов обозначаются добавлением к цифре буквы а
а тромбоцитарные – арабскими, активированные формы факторов обозначаются добавлением к цифре буквы а
Факторы системы свёртывания крови
Сериновыми протеазами являются активированные факторы II, VII, IX, X, XI, XII, ПК
• Протеазные домены – С-концевые части молекул проферментов (а/к последовательности этих участков факторов свёртывания крови гомологичны таковым трипсина и химотрипсина). Селективность действия протеаз системы гемостаза обеспечивается специфическими структурами концевых частей молекул. Каскад завершается образованием мономеров фибрина и последующим формированием тромба Трансглютаминаза - фактор XIII.
• Кофакторы - факторы V, VIII, ВМК.
Протеолитическая активация факторов гемостаза
Сериновыми протеазами являются активированные факторы II, VII, IX, X, XI, XII, ПК
• Протеазные домены – С-концевые части молекул проферментов (а/к последовательности этих участков факторов свёртывания крови гомологичны таковым трипсина и химотрипсина). Селективность действия протеаз системы гемостаза обеспечивается специфическими структурами концевых частей молекул. Каскад завершается образованием мономеров фибрина и последующим формированием тромба Трансглютаминаза - фактор XIII.
• Кофакторы - факторы V, VIII, ВМК.
Протеолитическая активация факторов гемостаза
Активация свёртывания крови
Два типа взаимодействий могут приводить к инициации свёртывания крови. Каскад реакций гемокоагуляции принято представлять в виде двух возможных путей активации
– внутреннего и внешнего
Внешний путь
(прокоагулянтный)
для остановки кровотечения из капилляров и сосудов включается тканевым фактором, который в норме в крови и клетках, контактирующих с кровью, отсутствует и появляется при повреждении ткани
Два типа взаимодействий могут приводить к инициации свёртывания крови. Каскад реакций гемокоагуляции принято представлять в виде двух возможных путей активации
– внутреннего и внешнего
Внешний путь
(прокоагулянтный)
для остановки кровотечения из капилляров и сосудов включается тканевым фактором, который в норме в крови и клетках, контактирующих с кровью, отсутствует и появляется при повреждении ткани
Внешний путь
(прокоагулянтный)
• Тканевой фактор
–
(апопротеинIII+фосфатидилсерин) конститутивный
• Компонент мембран ряда типов клеток (кора головного мозга, миокард, клеток эпидермиса и эпителия, выстилающего cлизистые оболочки органов)
• Трансмембранный гликопротеин
выполняет функции рецептора фактора У и модулятора его активности.
• Кофакторная активность тканевого фактора определяется как апобелком, таки ФЛ мембраны клеток.
Повреждение
эндотелиальных клеток
Освобождение
Тканевой
фактор
Ca
2+
Тканевой
тромбопластин фактор III)
Factor VII
(прокоагулянтный)
• Тканевой фактор
–
(апопротеинIII+фосфатидилсерин) конститутивный
• Компонент мембран ряда типов клеток (кора головного мозга, миокард, клеток эпидермиса и эпителия, выстилающего cлизистые оболочки органов)
• Трансмембранный гликопротеин
выполняет функции рецептора фактора У и модулятора его активности.
• Кофакторная активность тканевого фактора определяется как апобелком, таки ФЛ мембраны клеток.
Повреждение
эндотелиальных клеток
Освобождение
Тканевой
фактор
Ca
2+
Тканевой
тромбопластин фактор III)
Factor VII
Тканевой фактор (ТФ)
• Связывание одноцепочечной формы фактора Ус ТФ изменяет структуру фактора У и становится возможным его расщепление на двухцепочечную форму, которая в комплексе с ТФ активирует Хи Х факторы
свёртывания крови, что инициирует каскад реакций гемокоагуляции.
•
Образование комплекса фактор УII-
тканевой фактор резко увеличивает чувствительность фактора У к протеолитической активации ( расщепляется связь Арг152-Иле153).
• Активация фактора У - под действием следов активных формфакторов Хи Хи в результате
аутоактивации.
• Связывание одноцепочечной формы фактора Ус ТФ изменяет структуру фактора У и становится возможным его расщепление на двухцепочечную форму, которая в комплексе с ТФ активирует Хи Х факторы
свёртывания крови, что инициирует каскад реакций гемокоагуляции.
•
Образование комплекса фактор УII-
тканевой фактор резко увеличивает чувствительность фактора У к протеолитической активации ( расщепляется связь Арг152-Иле153).
• Активация фактора У - под действием следов активных формфакторов Хи Хи в результате
аутоактивации.
Внутренний путь контактный все компоненты присутствуют в крови
• начинается с контактной активации фактора Хи прекалликреина.
• Связывание фактора Х с компонентами субэндотелиального слоя, активированными тромбоцитами, мицеллами фосфолипидами или бактериальными липополисахаридами изменяют его конформацию то, что) он становится высокочувствительным к протеолитической активации калликреином;
2) в комплексе с высокомолекулярным кининогеном повышает активацию прекалликреина, который затем может обеспечить дополнительную активацию фактора ХII.
Коллаген
субэндотелия
Активация проэнзимов
Ca
2+
PF-3
Тромбоцитарный
тромбопластин кислые фосфолипиды мембраны тромбоцитов -
ФС, ФИ и ФЭ)
• начинается с контактной активации фактора Хи прекалликреина.
• Связывание фактора Х с компонентами субэндотелиального слоя, активированными тромбоцитами, мицеллами фосфолипидами или бактериальными липополисахаридами изменяют его конформацию то, что) он становится высокочувствительным к протеолитической активации калликреином;
2) в комплексе с высокомолекулярным кининогеном повышает активацию прекалликреина, который затем может обеспечить дополнительную активацию фактора ХII.
Коллаген
субэндотелия
Активация проэнзимов
Ca
2+
PF-3
Тромбоцитарный
тромбопластин кислые фосфолипиды мембраны тромбоцитов -
ФС, ФИ и ФЭ)
Внутренний путь (контактный Активация фактора Х расщепление по остатку
Арг353 с образованием фермента, состоящего из двух п/п цепей, соединенных дисульфидным мостиком ( лёгкая цепь – обладает протеазной активностью, тяжёлая содержит домены для взаимодействия с другими компонентами.
Калликреин плазмы может далее расщеплять ещё две связи по остаткам Арг 334, Арг343, что приводит к образованию формы фактора Ха
(ферментативно активна, но неспособна взаимодействовать с поверхностью и активировать фактор Х
Арг353 с образованием фермента, состоящего из двух п/п цепей, соединенных дисульфидным мостиком ( лёгкая цепь – обладает протеазной активностью, тяжёлая содержит домены для взаимодействия с другими компонентами.
Калликреин плазмы может далее расщеплять ещё две связи по остаткам Арг 334, Арг343, что приводит к образованию формы фактора Ха
(ферментативно активна, но неспособна взаимодействовать с поверхностью и активировать фактор Х
Общий каскад реакций
Активация фактора Х под действием фактора Ха протекает на поверхности фосфолипидов при участии ионов Са2+и фактора а, выполняющего роль матрицы, обеспечивающий связывание и оптимальное взаимодействие факторов Ха и Х, что увеличивает скорость реакции в сотни раз. Фактор Х состоит из х цепочек, соединенных мостиком Активация фактора Х происходит после расщепления связи Арг194-Иле195 в концевой части тяжелой цепи с освобождением пептида активации.
Образование тромбина в результате последовательного расщепления х связей в молекуле протромбина (молекула – α тромбина из х цепочек, соединенных дисульфидным мостиком, активный центр и связывающий участок в Вцепи, при аутолизе β и γ-тромбины со значительно меньшей свёртывающей активностью. Тромбин диссоциирует из
протромбиназного комплекса и может участвовать в регуляции многих физиологических процессов. Функции прокоагулянтная (активирует
своё образование, антикоагулянтная,
вазоактивная и митогенная.
Тромбопластин
Factor
X
Протромбиназа
Протромбин
Тромбин
Фибриноген
Фибрин
Совместно с тромбоцитами и эритроцитами образуется тромб
Активация фактора Х под действием фактора Ха протекает на поверхности фосфолипидов при участии ионов Са2+и фактора а, выполняющего роль матрицы, обеспечивающий связывание и оптимальное взаимодействие факторов Ха и Х, что увеличивает скорость реакции в сотни раз. Фактор Х состоит из х цепочек, соединенных мостиком Активация фактора Х происходит после расщепления связи Арг194-Иле195 в концевой части тяжелой цепи с освобождением пептида активации.
Образование тромбина в результате последовательного расщепления х связей в молекуле протромбина (молекула – α тромбина из х цепочек, соединенных дисульфидным мостиком, активный центр и связывающий участок в Вцепи, при аутолизе β и γ-тромбины со значительно меньшей свёртывающей активностью. Тромбин диссоциирует из
протромбиназного комплекса и может участвовать в регуляции многих физиологических процессов. Функции прокоагулянтная (активирует
своё образование, антикоагулянтная,
вазоактивная и митогенная.
Тромбопластин
Factor
X
Протромбиназа
Протромбин
Тромбин
Фибриноген
Фибрин
Совместно с тромбоцитами и эритроцитами образуется тромб
Каскадный механизм активации ферментов
Последовательно образуются связанные с фосфолипидами клеточной мембраны комплексы, содержащие протеолитический фермент,
белок-активатор и ионы Са2+ :
•
VIIа-ТФ- Са2+
•
Теназа: IХа-VIIIа-- Са2+
•
Протромбиназа: Ха-Vа- Са2+
Модель сборки комплекса факторов свертывания крови
Последовательно образуются связанные с фосфолипидами клеточной мембраны комплексы, содержащие протеолитический фермент,
белок-активатор и ионы Са2+ :
•
VIIа-ТФ- Са2+
•
Теназа: IХа-VIIIа-- Са2+
•
Протромбиназа: Ха-Vа- Са2+
Модель сборки комплекса факторов свертывания крови
Соотношение между концентрацией факторов и скоростью процесса свертывания.
В норме скорость коагуляции практически не определяется концентрацией факторов, так как они присутствуют в избытке и процесс идет в состоянии насыщения. Только после значительного истощения фактора его концентрация будет влиять на скорость реакции и соответственно на скорость свертывания плазмы
В норме скорость коагуляции практически не определяется концентрацией факторов, так как они присутствуют в избытке и процесс идет в состоянии насыщения. Только после значительного истощения фактора его концентрация будет влиять на скорость реакции и соответственно на скорость свертывания плазмы
Тромбоциты Около 1/3 всей массы тромбоцитов находится в селезенке (селезеночный пул)
• Остальные 2/3 тромбоцитов циркулируют в крови.
• Средняя продолжительность жизни тромбоцитов составляет 9-10 суток У здорового человека количество тромбоцитов может несколько меняться в течение суток.
• Нормальное содержание тромбоцитов в крови колеблется в пределах 150-320 х л.
• Остальные 2/3 тромбоцитов циркулируют в крови.
• Средняя продолжительность жизни тромбоцитов составляет 9-10 суток У здорового человека количество тромбоцитов может несколько меняться в течение суток.
• Нормальное содержание тромбоцитов в крови колеблется в пределах 150-320 х л.
Жизненный цикл тромбоцита
Структура тромбоцита
Интактные тромбоциты имеют форму диска, В цитоплазме расположены митохондрии, пероксисомы (содержат каталазу, включения гликогена, лизосомы и гранулы, содержащие пулы хранения различных веществ
Интактные тромбоциты имеют форму диска, В цитоплазме расположены митохондрии, пероксисомы (содержат каталазу, включения гликогена, лизосомы и гранулы, содержащие пулы хранения различных веществ
Поверхностные гликопротеиновые (GP) рецепторы тромбоцита
Секретируемые факторы тромбоцитов
Тромбоспондин - гликопротеин, принимающий участие в адгезии и агрегации тромбоцитов
Функции тромбоспондина
• стабилизация комплекса фибриноген в процессе агрегации тромбоцитов связывается с рядом коагуляционных факторов (тромбином, факторами Ха, Ха, что приводит к повышению их локальной концентрации и защищает от действия ингибиторов.
Секретируемые факторы тромбоцитов
Тромбоспондин - гликопротеин, принимающий участие в адгезии и агрегации тромбоцитов
Функции тромбоспондина
• стабилизация комплекса фибриноген в процессе агрегации тромбоцитов связывается с рядом коагуляционных факторов (тромбином, факторами Ха, Ха, что приводит к повышению их локальной концентрации и защищает от действия ингибиторов.
Механизмы активации ферментов каскада Частичный протеолиз
• Взаимодействие с белками-активаторами
• Взаимодействие с модифицированными клеточными мембранами при участии ионов кальция
Активация тромбоцитов сопровождается появлением на поверхности плазматической мембраны отрицательно заряженных участков, образованных фосфатидилсерином
• Дополнительный механизм усиления процесса
свёртывания крови за
счёт положительной обратной связи. Тромбин может ускорять своё образование, активируя тромбоциты, факторы V и VIII, а также возможно VII и Х Основные положительные обратные реакции факторов Ха и Ха активация фактора VII.
Всё это приводит к образованию тромба за 10-15 секунд вместе повреждения сосуда
Белки-регуляторы активности протеаз системы свёртывания крови Ха и Ха и их субстратов – факторов Хи протромбина с фосфолипидами (содержат по 3 домена, гомогичных церулоплазмину, по 2 С-домена и центральный В- домен, который отщепляется при их активации В активированной форме фактор V гетеродимер, а фактор VIII- гетеротример, субъединицы которых взаимодействуют при участии ионов Са2+
• В плазме фактор VIII циркулирует в виде комплекса с фактором фон Виллебранда, функции которого адгезивный белок, обеспечивает связывание тромбоцитов с субэндотелиальными структурами и склеивание тромбоцитов при их агрегации повышает стабильность фактора VIII и защищает его от инактивации протеином С
• Взаимодействие с белками-активаторами
• Взаимодействие с модифицированными клеточными мембранами при участии ионов кальция
Активация тромбоцитов сопровождается появлением на поверхности плазматической мембраны отрицательно заряженных участков, образованных фосфатидилсерином
• Дополнительный механизм усиления процесса
свёртывания крови за
счёт положительной обратной связи. Тромбин может ускорять своё образование, активируя тромбоциты, факторы V и VIII, а также возможно VII и Х Основные положительные обратные реакции факторов Ха и Ха активация фактора VII.
Всё это приводит к образованию тромба за 10-15 секунд вместе повреждения сосуда
Белки-регуляторы активности протеаз системы свёртывания крови Ха и Ха и их субстратов – факторов Хи протромбина с фосфолипидами (содержат по 3 домена, гомогичных церулоплазмину, по 2 С-домена и центральный В- домен, который отщепляется при их активации В активированной форме фактор V гетеродимер, а фактор VIII- гетеротример, субъединицы которых взаимодействуют при участии ионов Са2+
• В плазме фактор VIII циркулирует в виде комплекса с фактором фон Виллебранда, функции которого адгезивный белок, обеспечивает связывание тромбоцитов с субэндотелиальными структурами и склеивание тромбоцитов при их агрегации повышает стабильность фактора VIII и защищает его от инактивации протеином С
Фактор Виллебранда (vWF) выполняет роль биологического клея, прикрепляя к коллагену субэндотелия адгезированные тромбоциты через гликопротеиновый комплекс GPIb-V-IX.
• Тромб увеличивается в размерах по мере адгезии и агрегации новых тромбоцитов, скрепление которых в агрегат обеспечивает фибриноген, имеющий дивалентную структуру и взаимодействующий с рецепторами GPIIb-llla
• Тромб увеличивается в размерах по мере адгезии и агрегации новых тромбоцитов, скрепление которых в агрегат обеспечивает фибриноген, имеющий дивалентную структуру и взаимодействующий с рецепторами GPIIb-llla
Комплекс фактор VIII - фактор Виллебранда (ф состоит из 2 отдельных белков, которые выполняют в гемостазе разные функции, имеют разную химическую и иммунологическую структуру.
• Фактор VIII необходим для активации фактора X в каскаде свертывания крови, его дефицит вызывает гемофилию А.
• Фактор Виллебранда (vWF) - полимерный белок, который составляет основную массу комплекса. Он необходим для адгезии тромбоцитов к поврежденной стенке сосудов, обеспечивая взаимодействие коллагена с гликопротеиновым комплексом тромбоцитов GPIb-V-IX.
• Кроме того, он участвует в агрегации тромбоцитов, взаимодействуя с интегринами GPIIb-IIIa.
• Недостаток vWF приводит к болезни
Виллебранда
• Фактор VIII необходим для активации фактора X в каскаде свертывания крови, его дефицит вызывает гемофилию А.
• Фактор Виллебранда (vWF) - полимерный белок, который составляет основную массу комплекса. Он необходим для адгезии тромбоцитов к поврежденной стенке сосудов, обеспечивая взаимодействие коллагена с гликопротеиновым комплексом тромбоцитов GPIb-V-IX.
• Кроме того, он участвует в агрегации тромбоцитов, взаимодействуя с интегринами GPIIb-IIIa.
• Недостаток vWF приводит к болезни
Виллебранда
Остатки γ-карбоксиглутаминовой кислоты образуют специфические центры связывания ионов
Са2+.
Эти функциональные группы в процессе тромбообразования обеспечивают присоединение факторов свёртывания крови к фосфолипидам
клеточных мембран тромбоцитов, поврежденных тканей и межклеточного матрикса зависимая модификация
Ряд факторов свёртывания крови (II,
VIII, Хи Х) содержат необычную АК –γ- карбоксиглутаминовую: она образуется в этих факторах посттрансляционно в результате реакции карбоксилирования, зависящей от витамина К
• Антагонисты витамина К пероральные антикоагулянты) ингибируют восстановление эпоксидной и хиноновой форм витамина К, образующихся входе реакции карбоксилирования остатков глутаминовой кислоты зависимая модификация
Са2+.
Эти функциональные группы в процессе тромбообразования обеспечивают присоединение факторов свёртывания крови к фосфолипидам
клеточных мембран тромбоцитов, поврежденных тканей и межклеточного матрикса зависимая модификация
Ряд факторов свёртывания крови (II,
VIII, Хи Х) содержат необычную АК –γ- карбоксиглутаминовую: она образуется в этих факторах посттрансляционно в результате реакции карбоксилирования, зависящей от витамина К
• Антагонисты витамина К пероральные антикоагулянты) ингибируют восстановление эпоксидной и хиноновой форм витамина К, образующихся входе реакции карбоксилирования остатков глутаминовой кислоты зависимая модификация
Этапы образования фибринового тромба
ФИБРИНОГЕН
Фибринопептиды Аи В (ФПА и
ФПВ) отщепляются тромбином от фибриногена, инициируя тем самым процесс полимеризации и превращение фибриногена в фибрин.
Полимеризация фибриногена
1) Превращение фибриногена в мономер фибрина начинается после того, как в результате отщепления тромбином N- концевого 16-членого фибринопептида А вцепи открывается участок Глу-Про-Арг, взаимодействующий с комплементарным участком в С- концевой области γ цепи
Коагуляционная фаза Этапы образования фибринового тромба) Образование нерастворимого геля фибрина.
Идёт инициация процесса самосборки протофибрилл, в которых периферический Д-домен одной молекулы взаимодействует с центральным Е-доменом другой центры агрегации. Между доменами молекул фибрина- мономера образуются нековалентные связи. Молекулы фибрина смещены относительно друг друга на ½ длины
Отщепление с конца Вцепи фибринопептида В (латеральная ассоциация протофибрилл)
3
) Стабилизация геля фибрина попарно сшиваются γ- цепи, а затем α- цепи фибриногена с образованием длинных полимеров.
Фаза стабилизации геля фибрина протекает с участием активного фактора Х, который, являясь ферментом трансглутаминазой, катализирует реакцию образования по крайней мере 6 амидных связей между остатками Глу и Лиз, каждой из пептидных цепей фибрина, связывая их друг с другом и связывает фибрин с фибронектином - тромб фиксируется на месте
4) Ретракция (сжатие) фибринового сгустка обеспечивает актомиозин тромбоцитов – сократительный белок тромбостенин, обладающий АТФ-азной активностью, участвует также в активации и агрегации тромбоцитов.
• Ретракция кровяного сгустка предупреждает полную закупорку сосудов, создавая возможность восстановления кровотока.
• Кровь здорового человека in vitro свёртывается за 5-10 минут. При этом образование протромбиназного комплекса занимает 2-5 секи превращение фибриногена в фибрин 2-5 сек.
Антикоагулянтная фаза препятствует распространению тромба короткий каскад реакций, в котором кроме тромбина участвуют белок-активатор тромбомодулин (Тм), витамин К-зависимая сериновая протеаза протеин С, белок-активатор S и факторы Va, VIIIa ; последовательно образуются 2 мембранных комплекса IIa-Тм-
Са2+ и тромбин в его составе активирует протеин С, который в составе комплекса Са- S- Са2+ гидролизует по 2 пептидные связи в факторах Va и VIIIa и превращает их в неактивные пептиды.
• Тромбин - последний фермент каскада реакций коагуляции ион же тормозит его, вызывая образование комплексов антикоагулянтной фазы на неповреждённом эндотелии сосудов, т.к. приобретает способность активировать протеин Столько после взаимодействия с тромбомодулином (причём связанный с
Тм тромбин не может превращать фибриноген в фибрин, не активирует фактор V и тромбоциты
Прокоагулянтный и антикоагулянтный эффекты тромбина
Тромбин оказывает прямой активирующий эффектна факторы V и VIII и
инактивирующее действие на факторы Va и VIIIa. Фактор VIII может быть активирован высокими концентрациями фактора IXa или следовыми концентрациями тромбина. В тоже время тромбин в комплексе с
тромбомодулином стимулирует антикоагулянтный эффект протеина С. Эти формы регуляции существенны для эффективного участия факторов Va ив процессах свертывания крови
Фибриноген 3 пары неидентичных цепей А цепи,Вβ, и γ связывает три иона Са2+с высоким (находятся в С-концевой области γ цепи) и около 10 с низким сродством, содержит 4 раздваивающиеся углеводные цепи, образующие
N- гликозидные связи с Асн52 и Асн364 β и цепей, на концах – сиаловые
к-ты
• Фибриноген подвергается множественной посттранляционной модификации (гликозилирование, фосфорилирование,
сульфатирование, гидроксилирование).
N- гликозидные связи с Асн52 и Асн364 β и цепей, на концах – сиаловые
к-ты
• Фибриноген подвергается множественной посттранляционной модификации (гликозилирование, фосфорилирование,
сульфатирование, гидроксилирование).
ФИБРИНОГЕН
Фибринопептиды Аи В (ФПА и
ФПВ) отщепляются тромбином от фибриногена, инициируя тем самым процесс полимеризации и превращение фибриногена в фибрин.
Полимеризация фибриногена
1) Превращение фибриногена в мономер фибрина начинается после того, как в результате отщепления тромбином N- концевого 16-членого фибринопептида А вцепи открывается участок Глу-Про-Арг, взаимодействующий с комплементарным участком в С- концевой области γ цепи
Коагуляционная фаза Этапы образования фибринового тромба) Образование нерастворимого геля фибрина.
Идёт инициация процесса самосборки протофибрилл, в которых периферический Д-домен одной молекулы взаимодействует с центральным Е-доменом другой центры агрегации. Между доменами молекул фибрина- мономера образуются нековалентные связи. Молекулы фибрина смещены относительно друг друга на ½ длины
Отщепление с конца Вцепи фибринопептида В (латеральная ассоциация протофибрилл)
3
) Стабилизация геля фибрина попарно сшиваются γ- цепи, а затем α- цепи фибриногена с образованием длинных полимеров.
Фаза стабилизации геля фибрина протекает с участием активного фактора Х, который, являясь ферментом трансглутаминазой, катализирует реакцию образования по крайней мере 6 амидных связей между остатками Глу и Лиз, каждой из пептидных цепей фибрина, связывая их друг с другом и связывает фибрин с фибронектином - тромб фиксируется на месте
4) Ретракция (сжатие) фибринового сгустка обеспечивает актомиозин тромбоцитов – сократительный белок тромбостенин, обладающий АТФ-азной активностью, участвует также в активации и агрегации тромбоцитов.
• Ретракция кровяного сгустка предупреждает полную закупорку сосудов, создавая возможность восстановления кровотока.
• Кровь здорового человека in vitro свёртывается за 5-10 минут. При этом образование протромбиназного комплекса занимает 2-5 секи превращение фибриногена в фибрин 2-5 сек.
Антикоагулянтная фаза препятствует распространению тромба короткий каскад реакций, в котором кроме тромбина участвуют белок-активатор тромбомодулин (Тм), витамин К-зависимая сериновая протеаза протеин С, белок-активатор S и факторы Va, VIIIa ; последовательно образуются 2 мембранных комплекса IIa-Тм-
Са2+ и тромбин в его составе активирует протеин С, который в составе комплекса Са- S- Са2+ гидролизует по 2 пептидные связи в факторах Va и VIIIa и превращает их в неактивные пептиды.
• Тромбин - последний фермент каскада реакций коагуляции ион же тормозит его, вызывая образование комплексов антикоагулянтной фазы на неповреждённом эндотелии сосудов, т.к. приобретает способность активировать протеин Столько после взаимодействия с тромбомодулином (причём связанный с
Тм тромбин не может превращать фибриноген в фибрин, не активирует фактор V и тромбоциты
Прокоагулянтный и антикоагулянтный эффекты тромбина
Тромбин оказывает прямой активирующий эффектна факторы V и VIII и
инактивирующее действие на факторы Va и VIIIa. Фактор VIII может быть активирован высокими концентрациями фактора IXa или следовыми концентрациями тромбина. В тоже время тромбин в комплексе с
тромбомодулином стимулирует антикоагулянтный эффект протеина С. Эти формы регуляции существенны для эффективного участия факторов Va ив процессах свертывания крови
Система свертывания крови и система фибринолиза - каскадные протеолитические ферментативные системы
Система фибринолиза
• состоит из профермента (плазминоген), ферментов, превращающих плазминоген (Пг) в сериновую протеазу, и сложный системы ингибиторов, контролирующих как активацию Пг, таки сам процесс лизиса фибрина.
• После выполнения гемостатической функции и регенерации ткани фибрин должен быть удалён для восстановления нормального кровотока
• Фибринолиз- ферментативное расщепление волокон фибрина с образованием растворимых пептидов, которые удаляются из сосудистого русла
Антитромбин III
(80-90% антикоагуляционной активности) может образовывать неактивные комплексы почти со всеми факторами свёртывания крови, а не только с тромбином, а гетерополисахарид гепарин по действию сходен с катализатором. Одна его молекула может обеспечить присоединение большого количества антитромбина к соответствующим факторам свёртывания крови
• Урокиназа (синтезированная в почках) в области повреждения выделяется из клеток и попадает в тромб, может активировать как свободный, таки связанный с фибрином плазминоген Пг.
• Компоненты системы фибринолиза участвуют также в разрушении внеклеточного матрикса и могут выполнять важную функцию в регуляции таких процессов, как эмбриогенез, регенерация тканей, рост и метастазирование опухолей Урокиназу, тканевой активатор плазминогена и стрептокиназу используют при тромболитической терапии инфаркта миокарда, тромбозах вен и артерий, гемодиализе
Фибринолитический процесс
Стрептокиназа
• состоит из профермента (плазминоген), ферментов, превращающих плазминоген (Пг) в сериновую протеазу, и сложный системы ингибиторов, контролирующих как активацию Пг, таки сам процесс лизиса фибрина.
• После выполнения гемостатической функции и регенерации ткани фибрин должен быть удалён для восстановления нормального кровотока
• Фибринолиз- ферментативное расщепление волокон фибрина с образованием растворимых пептидов, которые удаляются из сосудистого русла
Система противосвёртывания
• Ингибиторы сериновых протеаз серпины - выполняют свою функцию один разв жизни.
•
Механизм действия образуют стехиометрический комплекс с протеазой, в котором после расщепления по реактивному центру ингибитор остаётся ковалентно связанным с серином активного центра фермента. Этот комплекс выводится из кровотока и разрушается
• Ингибиторы сериновых протеаз серпины - выполняют свою функцию один разв жизни.
•
Механизм действия образуют стехиометрический комплекс с протеазой, в котором после расщепления по реактивному центру ингибитор остаётся ковалентно связанным с серином активного центра фермента. Этот комплекс выводится из кровотока и разрушается
Антитромбин III
(80-90% антикоагуляционной активности) может образовывать неактивные комплексы почти со всеми факторами свёртывания крови, а не только с тромбином, а гетерополисахарид гепарин по действию сходен с катализатором. Одна его молекула может обеспечить присоединение большого количества антитромбина к соответствующим факторам свёртывания крови
Основная функция протеина С (АПС) в гемостазе - инактивация факторов Va и VIIIa блокада PAI
Дефицит nS, также как и дефицит ПС, приводит к развитию тромбозов Активированный протеин С (АПС), сопрягаясь с теназным комплексом на фосфолипидной поверхности (активированный тромбоцит, вызывает деградацию фактора V.
ТМ - тромбомодулин, С4-СП - связывающий протеин, F1S - протеин S, ПС - протеин С, На, Va - активированные плазменные факторы, Vi - деградированный
ТМ - тромбомодулин, С4-СП - связывающий протеин, F1S - протеин S, ПС - протеин С, На, Va - активированные плазменные факторы, Vi - деградированный
• Урокиназа (синтезированная в почках) в области повреждения выделяется из клеток и попадает в тромб, может активировать как свободный, таки связанный с фибрином плазминоген Пг.
• Компоненты системы фибринолиза участвуют также в разрушении внеклеточного матрикса и могут выполнять важную функцию в регуляции таких процессов, как эмбриогенез, регенерация тканей, рост и метастазирование опухолей Урокиназу, тканевой активатор плазминогена и стрептокиназу используют при тромболитической терапии инфаркта миокарда, тромбозах вен и артерий, гемодиализе
Фибринолитический процесс
Стрептокиназа
Особенности гемостаза у новорожденных В раннем постнатальном периоде – физиологическое снижение уровня факторов свёртывания
(II,YII,IX,X,XI,XII), антикоагулянтов (антитромбина III, протеина Сидр, основных компонентов
фибринолиза и калликреин-кининовой системы. Система гемостаза уравновешена, нона более низком уровне, чему детей более старшего возраста и взрослых. Снижение активности системы гемостаза защитный механизм, тку ребёнка неизбежна активация системы при рождении ив ранний
постродовой период
(II,YII,IX,X,XI,XII), антикоагулянтов (антитромбина III, протеина Сидр, основных компонентов
фибринолиза и калликреин-кининовой системы. Система гемостаза уравновешена, нона более низком уровне, чему детей более старшего возраста и взрослых. Снижение активности системы гемостаза защитный механизм, тку ребёнка неизбежна активация системы при рождении ив ранний
постродовой период
Особенности гемостаза у новорожденных На состояние системы гемостаза новорожденных влияют сроки перевязки пуповины и первого прикладывания к груди. Ранняя перевязка пуповины до перекачивания крови из плацентарных сосудов в кровоток ребёнка приводит к большему снижению К-витаминзависимых факторов
свёртывания к 3-4 дням жизни Недоношенность приводит к более выраженному снижению уровней как прокоагулянтов, таки антикоагулянтов, вследствие чего у этих детей существенно возрастает риск как геморрагических, таки тромботических осложнений, но особенно ДВС-синдрома.
свёртывания к 3-4 дням жизни Недоношенность приводит к более выраженному снижению уровней как прокоагулянтов, таки антикоагулянтов, вследствие чего у этих детей существенно возрастает риск как геморрагических, таки тромботических осложнений, но особенно ДВС-синдрома.
Гемофилия наследственные болезни (1:10 000) характеризуются повышенной кровоточивостью обусловлены недостаточностью белков свёртывающей системы крови Гемофилия А-
мутация гена фактора VIII в Х-хромосоме-
80% всех случаев болезни
•
Гемофилия В-
мутация гена фактора Х
мутация гена фактора VIII в Х-хромосоме-
80% всех случаев болезни
•
Гемофилия В-
мутация гена фактора Х
СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ