ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 09.11.2023
Просмотров: 17
Скачиваний: 1
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Миграция (жүзу). Біріншіден, центрифугалау жүреді және ұрық плазмасы жойылады. Содан кейін, жоғарғы жағына 0,5 -1 мл қоректік орта қосылады және 37 ° C-та инкубациялық кезеңнен кейін, ең жақсы қозғалатын сперматозоидтар түтікшенің түбінен жоғарыға көтеріледі (сау сперматозоидтар қоректік ортаға түседі). Сперматозоидтарға бай фракцияны алу үшін жоғарғы қабат жиналады. Ол әлі күнге дейін кеңінен қолданылады және нормозооспермияда пайдалы. Бұл 90% - дан астам PR (прогрестерон рецептор) сперматозоидтары бар фракцияларды алуға мүмкіндік береді.
Тығыздық градиенттері. Бұл техникада түтікке әр түрлі тығыздықтағы сұйықтық қабаттары құйылып, жоғарғы қабатқа ұрық салынады. Содан кейін, түтік центрифугалау арқылы жасуша қалдықтарын және қозғалмайтын жасушаларды сүзеді. Центрифугалаудан кейін сау шәует түтіктегі сұйықтықтың төменгі қабатында, ал қоқыс пен қозғалмайтын сперматозоидтар жоғарғы қабаттарда болады. Бұл процедура шамамен 60 минутты алады және олигозооспермияда, астенозооспермияда және қоқыстың көп мөлшерінде арнайы көрсетілген. Соңында барлық жасушалар түбіне дейін жетеді, бірақ қозғалғыштығы жоғары жасушалар ертерек келеді. Бұл процедураны көбінесе «Перколл әдісі» деп атайды, өйткені Перколл тығыздық ортасы ретінде жиі қолданылған, бірақ қазір басқа тығыздық орталары қолданылады.
Сүзу. Ол әр сперматозоидтың өтуіне мүмкіндік бермейтін сүзгіден тұрады. Қазіргі кезде ол аз қолданылады және фильтр арқылы моторикасы жақсы сперматозоидтар ғана өтеді.
Алайда, қазіргі уақытта олардан асып түсетін жаңа әдістер бар. Мысалы, PICSI, MAC немесе микрофлюид чиптері.
Өлшеу. Сперматозоидтардың in vitro конденсацияланатын дәрежесін бағалаудың көптеген әдістері жасалды. Сперматозоидты компьютерлік талдау (CASA) 1980 жылдары Шәует кинематикасын өлшеу үшін жасалды. CASA сперматозоидтардың қозғалғыштық параметрлерін талдау үшін сперматозоидты бақылау бағдарламалық жасақтамасымен бірге фазалық-контрастты микроскопияны қолданады. Қисық жылдамдық (VCL), түзу жылдамдық (VSL), орташа жол жылдамдығы (VAP) және бастың бүйірлік ығысу амплитудасы (ALH) сияқты кейбір параметрлер ұрықтандыру қабілетінің пайда болуымен оң байланысты екендігі және осылайша сперматозоидтардың гиперактивті қозғалғыштығын анықтау үшін қолданылатындығы көрсетілген.
Ұтқырлықты өлшеу гиперактивті қозғалғыштықтың болуын анықтау үшін өте маңызды болғанымен, акросомалық реакцияның пайда болуын анықтаудың қосымша әдістері жасалды.
Қарапайым әдіс coomassie brilliant blue g250-ді жасушаларды бояу үшін қолданады, бұл акросқа әсер етпейтін немесе реакцияланған визуалды дәлелдеуді қамтамасыз етеді. Жетілдірілген әдістер флуоресцентті немесе электронды микроскопия әдістерін қолданады. Флуоресцеин-конъюгацияланған Peanut agglutinin (FITC-PNA) немесе Pisum sativum agglutinin (FITC-PSA) сперматозоидты акросоманы флуоресцентті таңбалау үшін қолдануға болады, оны кейіннен флуоресцентті микроскоппен акросоманың күйін бағалау үшін қолдануға болады.
Пайдаланылған әдебиеттер
-
Johnson MH (2007). Essential reproduction (6th ed.). Malden Massachusetts: Blackwell Scientific Publications. pp. 177–178. -
Lozano GM, Bejarano I, Espino J, González D, Ortiz A, García JF, Rodríguez AB, Pariente JA (2009). "Density gradient capacitation is the most suitable method to improve fertilization and to reduce DNA fragmentation positive spermatozoa of infertile men". Anatolian Journal of Obstetrics & Gynecology -
Okabe M (2013). "The cell biology of mammalian fertilization". Development. 140 (22): 4471–4479. -
Visconti PE, Galantino-Homer H, Moore GD, Bailey JL, Ning X, Fornes M, Kopf GS (1998). "The molecular basis of sperm capacitation". Journal of Andrology. -
Puga Molina LC, Luque GM, Balestrini PA, Marín-Briggiler CI, Romarowski A, Buffone MG (2018). "Molecular Basis of Human Sperm Capacitation". Frontiers in Cell and Developmental Biology. -
Nabavi N, Todehdehghan F, Shiravi A (September 2013). "Effect of caffeine on motility and vitality of sperm and in vitro fertilization of outbreed mouse in T6 and M16 media". Iranian Journal of Reproductive Medicine. -
a b Barakat IA, Danfour MA, Galewan FA, Dkhil MA (2015). "Effect of various concentrations of caffeine, pentoxifylline, and kallikrein on hyperactivation of frozen bovine semen". BioMed Research International. 2015 -
Parrish JJ, Susko-Parrish J, Winer MA, First NL (1988). "Capacitation of bovine sperm by heparin". Biology of Reproduction. 38