Файл: Учебнометодическое пособие по биологической химии часть обмен белков, обмен липидов, биохимия крови, печени, мочи, слюны Основные константы.pdf
ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 01.12.2023
Просмотров: 57
Скачиваний: 1
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Е
оп
г/л
Е
оп
г/л
Е
оп
г/л
Е
оп
г/л
0,01 0,025 0,33 0,64 0,65 1,26 0,97 1,90 0,02 0,050 0,34 0,66 0,66 1,28 0,98 1,92 0,03 0,075 0,35 0,68 0,67 1,30 0,99 1,94 0,04 0,10 0,36 0,70 0,68 1,32 1,0 1,96 0,05 0,12 0,37 0,72 0,69 1,34 1,1 1,98 0,06 0,14 0,38 0,74 0,70 1,36 1,2 2,0 0,07 0,16 0,39 0,75 0,71 1,38 1,3 2,2 0,08 0,18 0,40 0,76 0,72 1,40 1,4 2,4 0,09 0,20 0,41 0,78 0,73 1,42 1,5 2,6 0,10 0,22 0,42 0,80 0,74 1,44 1,6 2,8 0,11 0,24 0,43 0,82 0,75 1,46 1,7 3,0 0,12 0,25 0,44 0,84 0,76 1,48 1,8 3,2 0,13 0,26 0,45 0,86 0,77 1,50 1,9 3,4 0,14 0,28 0,46 0,88 0,78 1,52 2,0 3,6 0,15 0,30 0,47 0,90 0,79 1,54 2,1 3,8 0,16 0,32 0,48 0,92 0,80 1,56 2,2 4,0 0,17 0,34 0,49 0,94 0,81 1,58 2,3 4,2 0,18 0,35 0,50 0,69 0,82 1,60 2,1 4,4 0,19 0,36 0,51 0,98 0,83 1,62 2,5 4,6 0,20 0,38 0,52 1,00 0,84 1,64 2,6 4,8 0,21 0,40 0,53 1,02 0,85 1,66 2,7 5,0 0,22 0,42 0,54 1,04 0,86 1,68 2,8 5,2 0,23 0,44 0,55 1,06 0,87 1,70 2,9 5,4 0,24 0,46 0,56 1,08 0,88 1,72 3,0 5,6 0,25 0,48 0,57 1,10 0,89 1,74 3,1 5,8 0,26 0,50 0,58 1,12 0,90 1,76 3,2 6,0 0,27 0,52 0,59 1,14 0,91 1,78 3,3 6,2 0,28 0,54 0,60 1,16 0,72 1,80 3,4 6,4 0,29 0,56 0,61 1,18 0,93 1,82 3,5 6,6 0,30 0,58 0,62 1,20 0,94 1,84 3,6 6,8 0,31 0,60 0,63 1,22 0,95 1,86 3,7 0,32 0,62 0,64 1,24 0,96 1,88 3,8
Клинико-диагностическое значение В нормальной моче белок присутствует в количествах, которые обычными методами лабораторной диагностики не открываются. Если белок в моче открывается даже в следовых количествах – это протеинурия, которая может быть как функциональной, таки патологической. В мочу чаще попадают белки сыворотки крови (альбумины, поэтому иногда это явление называют альбуминурией. Почечные протеинурии возникают при остром гломерулонефрите, нефротическом синдроме, токсикозе беременных, нарушениях почечного кровоснабжения, при сердечной недостаточности. Внепочечные протеину- рии связаны с поражением мочевыводящих путей, предстательной железы, имеют место при анемиях, заболеваниях печени. Функциональные протеинурии встречаются у детей раннего возраста, при длительном стоянии (ортостатическая, ходьбе (маршевая. В. Качественное определение глюкозы в моче Реакция Фелинга) Принцип основан на способности глюкозы восстанавливать при нагревании в щелочной среде гидроксид меди (II) (голубого цвета) в гидроксид меди (I) (желтого цвета) и оксид меди (I) (красного цвета. Порядок выполнения работы В пробирку внести 20 капель мочи, содержащей глюкозу, и добавить
15-20 капель реактива Фелинга. Пробирку нагреть до кипения и прокипятить в течение 1 минуты, появляется красный осадок оксида меди (I). Для сравнения проделать реакцию с нормальной мочой.
87 В. Обнаружение сахара в моче с помощью индикатора бумаги «Глюкотест» Принцип основан на специфическом окислении глюкозы с помощью фермента глюкооксидазы. Высвобождающийся пероксид водорода разлагается пероксидазой и окисляет краситель. Изменение окраски сравнивается с готовой шкалой. Этот метод позволяет не только обнаруживать глюкозу в мочено и определить предварительно ее содержание в пределах 1-20 гл. Порядок выполнения работы В пробирку налить 5-7 мл исследуемой мочи и погрузить в нее окрашенную часть полоски «Глюкотест». Вытащить полоску, положить на чашку Петри и оставить для развития окраски на 2 минуты. Сравнить развивающуюся окраску со стандартной шкалой. Содержимое глюкозы определить по стандартной шкале. Сделать заключение.
88 Г. Количественное определение глюкозы в моче по методу
Альтгаузена Принцип основан на способности глюкозы в щелочной среде при нагревании разрушаться с образованием окрашенных продуктов. Интенсивность развивающегося окрашивания пропорциональна количеству глюкозы, присутствующей в моче. Порядок выполнения работы В пробирку отмерить 4 мл мочи и добавить 20 капель 10% гидроксида натрия. Прокипятить в течение одной минуты и оставить на 10 минут при комнатной температуре для развития окраски. Интенсивность окрашивания сравнить со стандартной шкалой, представляющей собой таким же образом обработанную мочу, содержащую
5; 10; 15; 20; 30; 40 гл сахара. Сделать заключение о содержании сахара в исследуемой моче.
Клинико-диагностическое значение В нормальной моче сахар присутствует в количестве 0,20. гл, что ниже разрешающей способности обычных лабораторных методов диагностики. Если доступными лабораторными методами в моче обнаружен сахар, это глюкозурия. Различают глюкозурию гипергликемическую и почечную. При гипергликемической глюкозурии причиной появления сахара в моче является значительная гипергликемия, превышающая порог почечной проницаемости для глюкозы (8-10 ммоль/л). При почечной глюкозу- рии нарушается способность почки реабсорбировать глюкозу из первичной мочи (ренальный диабет. При ряде лизосомных болезней, обусловленных врожденными фермен- топатиями, в моче могут появиться другие моносахара: фруктоза, галактоза, нейраминовая кислота и др.
89 Д. Качественное обнаружение в мочекровии кровяных пигментов (бензидиновая проба Принцип основан на способности пероксидазы и каталазы крови разрушать перекись водорода до атомарного кислорода, который окисляет бензидин в п-хинондиимид сине-зеленого цвета. Порядок выполнения работы В пробирку налить 20 капель мочи, в которой ожидается присутствие крови, добавить 20 капель раствора бензидина в уксусной кислоте и 5-6 капель пероксида водорода. При наличии кровянных пигментов моча окрашивается в сине-зеленый цвет. Для сравнения проделать пробу с нормальной мочой. Данные оформить в виде протокола.
Клинико-диагностическое значение Кровь в моче (гематурия) появляется при нарушении целостности кровеносных сосудов почки и мочевыводящих путей. При тяжелых инфекционных заболеваниях, отравлениях гемолитическими ядами, ожогах, гемолитических анемиях происходит разрушение эритроцитов, переход гемоглобина в плазму, гемоглобин появляется в моче (гемоглобинурия.
90 Е. Качественное обнаружение желчных пигментов в моче Е. Проба Родина Принцип основан на окислении билирубина мочи в биливердин под действием различных реагентов. Порядок выполнения работы В пробирку налить 3 мл мочи и осторожно, по стенке наслоить 10-15 капель 1% раствора йода. Если в моче присутствуют желчные пигменты, тона границе раздела появляется зеленое кольцо биливердина. Для сравнения проделать пробу с нормальной мочой. Е. Проба Розенбаха Порядок выполнения работы Через маленький фильтр профильтровать 2-3 мл мочи. В конус фильтра внести 1-2 капли концентрированной азотной кислоты. При наличии в моче желчных пигментов появляются на фильтре окрашенные кольца фиолетовое, синее, зеленое, красное, желтое. Первым появляется зеленое кольцо. Для сравнения проделать пробу с нормальной мочой. Данные оформить в виде протокола.
91
Клинико-диагностическое значение В нормальной моче желчные пигменты лабораторными методами диагностики не обнаруживаются. Желчные пигменты обнаруживаются в моче при паренхиматозной и обтурационной желтухах, когда появляется сообщение между печеночными ходами и кровеносными сосудами вследствие нарушения целостности печеночных клеток или, изменения проницаемости их мембран. В кровь попадает прямой (связанный) билирубин. Этот билирубин фильтруется в мочу. Развивается билирубинурия. Ж. Обнаружение кетоновых тел в моче Принцип основан на способности кетоновых тел (ацетон, ацетоуксусная, β-гидроксимасляная кислоты) давать цветные реакции с различными реагентами. (Смотри работу № 23)
Клинико-диагностическое значение Кетоновые тела в норме образуются в печени здоровых людей из аце- тил-КоА. Током крови они поставляются к мышцам, где подвергаются окислению. Обычными методами лабораторной диагностики в моче кетоновые тела не обнаруживаются, т. к. их выведение у здоровых людей не превышает 20-50 мг/сутки. Резкое увеличение кетоновых тел в моче (кето- нурия) характерно для сахарного диабета, поскольку при этом активируется кетогенез и развивается кетонемия. Кетоновые тела определяются в моче при голодании, кахексии, в послеоперационном периоде, при гликогенозах и интоксикациях.
92
4. БИОХИМИЯ СЛЮНЫ Цель изучения раздела усвоить химический состав слюны и ее роль в процессах жизнедеятельности. Уметь находить взаимосвязь между нарушением химического состава слюны и возможными патологическими процессами в полости рта и зубной ткани. Научиться самостоятельно проводить химический анализ смешанной слюны. Основные вопросы раздела
1. Химический состав слюны. Роль слюны в процессах жизнедеятельности.
3. Взаимосвязь между патологическими процессами в ротовой полости и химическим составом слюны. Слюна – это секрет слюнных желез, выделяющийся в полость рта и участвующий в пищеварении. В выполнении биологических функций участвует смешанная слюна, представляющая собой смесь секретов слюнных желез, микрофлоры полости рта и продуктов ее жизнедеятельности, слу- щенных эпителиальных клеток слизистой полости рта. Ежесуточно у взрослого человека выделяется дол слюны. Смешанная слюна вязкая (за счет гликопротеинов, мутная (за счет микрофлоры и слущенных эпителиальных клеток) биологическая жидкость, рН которой зависит от состояния полости рта и характера пищи (при растительной пище рН слюны сдвигается в щелочную, аживотной – в кислую сторону) Вода Плотный остаток (0,5%)
99,5% Органические вещества Минеральные вещества Белок (ферменты Анионы Катионы амилаза, мальтаза, лизоцим Хлориды Натрий Остаточный азот Фосфаты Калий
Моносахара Бикарбонаты Магний Липиды Бромиды Кальций Витамины Фториды и др. Гормоны Роданиды
93 Белки слюны представлены ферментами, альбуминами, иммуноглобулинами (А, М, гликопротеинами. В слюне есть особые белки, которые индуцируют отложение фосфорнокалиевых солей на зубах кальций связывающий белок и белок с высоким сродством к гидроксиапатиту. Эти белки способствуют образованию зубного налета и зубного камня. Биологическая роль слюны
1. Смачивание пищи и облегчение проглатывания пищевого комка.
2. Растворение компонентов пищи, что обеспечивает их воздействие на пищеварительные анализаторы.
3. Первоначальная химическая обработка углеводов за счет амилазы.
4. Химическая защита полости рта от токсического действия микробов за счет лизоцима.
5. Механическая защита полости рта (муцины, жидкая часть.
6. Двусторонний транспорт веществ между слизистой полости рта, зубами и слюной.
7. Слюна – основной источник поступления в эмаль зуба Са, Р и других минеральных веществ. Работа 39. ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА СМЕШАННОЙ СЛЮНЫ Цель работы научиться самостоятельно проводить химический анализ смешанной слюны.
1. Определение рН слюны Принцип метода основан на способности универсальной индикаторной бумаги изменять окраску в зависимости от рН биологической жидкости. Порядок выполнения работы
Наполоску универсальной индикаторной бумаги нанести несколько капель неразбавленной собственной слюны. Сравнить развивающуюся окраску с эталонной шкалой. Сделать заключение о рН данной слюны.
2. Качественное обнаружение белка в слюне
биуретовой реакцией Принцип метода основан на способности белка в щелочной среде при взаимодействии с ионами меди давать сине-фиолетовое окрашивание, интенсивность которого пропорциональна содержанию белка.
94 Порядок выполнения работы В пробирку внести 15-20 капель неразбавленной слюны, добавить 1 каплю сульфата меди, 4-5 капель 10% гидроксида натрия. Записать результат. Обнаружение муцинов в слюне Принцип метода основан на способности муцинов выпадать в осадок в кислой среде. Порядок выполнения работы В пробирку внести 2-3 мл неразбавленной слюны, добавить 10— 15 капель уксусной кислоты. Тщательно встряхнуть. Выпадает осадок. Профильтровать через влажный фильтр. Осадок на фильтре – муцин слюны (фильтрат сохранить до следующего опыта.
4. Открытие в слюне хлоридов Принцип метода основан на способности ионов хлора образовывать с нитратом серебра нерастворимый осадок. Порядок выполнения работы К фильтрату, полученному в предыдущем опыте, добавить по каплям раствор нитрата серебра. Результаты опыта записать.
5. Открытие в слюне роданидов Принцип метода основан на способности роданистых солейдавать розовое окрашивание с хлоридом железа (III). Порядок выполнения работы На полоску фильтровальной бумаги, обработанную хлоридом железа
(III) нанести 1-2 капли неразбавленной слюны. При наличии в слюне роданидов появляется розовое окрашивание, интенсивность которого пропорциональна содержанию роданидов. Сравните содержание роданидов (по окраске бумаги) в слюне курящих и некурящих.
5. Качественное открытие амилазы в слюне. Принцип метода основан на способности фермента гидролизовать крахмал и превращать его через декстрины в мальтозу.
95 Порядок выполнения работы В пробирку внести 20-30 капель 0,5% раствора крахмала, добавить несколько капель неразведенной слюны и оставить при комнатной температуре на 10 минут. Через 10 минут добавить в реакционную смесь 2-3 капли реактива Люголя. Для сравнения проделать реакцию с исходным раствором крахмала. Данные записать, сделать заключение. Сделать заключение о химическом составе собственной слюны. Теоретически обосновать возможность нарушений биохимических процессов в ротовой полости при изменениях химического состава слюны.
96 Биохимические показатели биологических жидкостей человека Показатель Биолог. жидкость Норма Повышенное Пониженное
1 2
3 4
5
Аминный азот Сыворотка крови
0,2-0,43 гл Печеночная кома, отравление фосфором, хлороформом, ква- шиоркор, тяжелый сахарный диабет, после кровотечения
Нефрозы, после введения инсулина, гормона роста, андрогенов Общий белок
– « –
65-80 гл Дегидратация, ожоги, рвота, миеломная болезнь Голодание, тиреотоксикоз, поражение печени, поражение почек Альбумины гл Дегидратация, гиперпро- теинемия
Гипопротеинемия, поражение почек, поражение печени, наследственные дефект, токсикоз беременности, ожоговая болезнь, квашиоркор, голодание Глобулины суммарно гл
Коллагенозы, поражение почек Некроз печени, нефротический синдром Фракции глобулинов гл 4-
7 гл Острые воспалительные, некро- тические заболевания коллагено- зы, метастазирование опухолей Гепатиты, некрозы пече- ни,гипотиреозы
β-
5-9 гл Атеросклероз, ожирение, нефротический синдром, инфаркт миокарда, гипотиреоз Острые заболевания печени, анемия, цирроз печени
γ-
8-17 гл Хронические воспаления, деструкция ткани, онкозаболевания, белковая недостаточность, голодание, цирроз печени, обтураци- онная желтуха
Иммунодефицитные заболевания, интоксикация кортикостероидами, врожденный дефект, отравление бензолом, метастазы опухоли в кости.
Альбуми- ново-гло- булиновый коэффициент Сыворотка крови
1,6-2,0 Поражение печени, почек Остаточный азот
– « –
14-25 ммоль л Неукротимая рвота, обширные ожоги, нарушение выделительной функции почек, туберкулез, поражение мочевыводяших путей Тяжелая печеночная недостаточность, голодание, поздние сроки беременности, мало- белковая диета Мочевина
– « –
3,3-8,3 ммоль л Хронические поражения почек, злокачественные опухоли моче- выводящих путей, отравление сулемой, усиленный распад белков, непроходимость кишечника Злокачественная анемия, отравление фосфором, хинином, ги- перпротеиновая диета
Малобелковая диета, поздние сроки беременности, врожденные дефекты ферментных систем мочеобразования Мочевина Моча 330-580 ммоль/л Уремия, нефрит, ацидоз, поражение псчени(цирроз, атрофия, паренхиматозная желтуха)
97
Обший холестерин ммоль/л Атеросклероз, сахарный диабет, миелоидный нефроз, микседема, механическая желтуха, наследственные нарушения обмена холестерина Анемия, туберкулез, гипертиреоз, паренхиматозная желтуха, раковая кахексия, голодание Билирубин обший
– « –
1,7-20,5 мкмоль/ л Гемолитическая анемия, инфекционный гепатит, физиологическая желтуха новорожденных, рак желчного пузыря, обтураци- онная желтуха, абсцесс печени, хронический гепатит, рак желчного пузыря Прием барбитуратов и витамина С Калий Плазма крови
3,8-4,6 ммоль/л
Гиперальдостеронизм, ацидоз, ожоги, гипоксия, травматический токсикоз, анурия Неукротимая рвота, профузные поносы, применение мочегонных средств
1 2
3 4
5 Глюкоза Кровь 3,3-5,5 ммоль/л Сахарный диабет, стероидный диабет, острый панкреатит, опухоли мозга, гиперфункция щитовидной железы, гипофиза, эмоциональное возбуждение Передозировка инсулина, поражение почек (ренальный диабет, отравление фосфором, бензо- лом,гиперпродукция инсулина, недостаточность функции щитовидной железы, коры надпочечников, голодание. Порог почечной проницаемости для глюкозы Кровь 8,0-10,0 ммоль/л
Ренальный диабет Гликопротеины Сыворотка крови
1,2-1,6 гл Туберкулез легких, пнев- мония,плеврит, острый ревматизм, сахарный диабет, онкозабо- левания, подагра, инфаркт миокарда Сиаловые кислоты
– « –
0,55-
0,79 гл Опухоли мозга, инфаркт миокарда, онкозаболевания, туберкулез, остеомиелит, нефроз Пернициозная анемия, дегенеративные процессы в нервной ткани, гемохроматоз Кетоновые тела
– « – до 30 мг/л Голодание, сахарный диабет, диабетическая кома, гипертирсоз, поражение печени, безуглеводная диета, гликогенозы, алкалозы Общие липиды гл Ожирение, алкоголизм, гипотиреоз, цирроз печени, панкреатит, обтурационная желтуха, гликоге- нозы, сахарный диабет, нефрит Голодание, гипертиреоз, острые инфекции, пернициозная анемия Натрий
– « –
130-170 ммоль/л Избыточное поступление спи- щей, гиперальдостеронизм, респираторный ацидоз, неукротимая рвота Недостаток Na в пище, почечная недостаточность, гипоальдостеро- низм, применение диуретиков, неукротимая рвота, ожоги, сердечная недостаточность
98 1
2 3
4 5 Кальций общий Сыворотка крови
2,25-2,75 ммопь/л
Гипервитаминоз Д, гиперпарати- реоз, лейкозы, карцинома скелета, наследственная гиперкаль- ииемия, разрушения костной ткани
Гипопаратиреоз, наследственная тетания, гиповитаминоз Д, хроническая почечная недостаточность Фосфор неорганический ммоль/л Наследственная тетания, гипер- витаминоз Д, гипопаратиреоз, хронические поражения почек Отравление алкоголем, поражение гипофиза, гиповитаминоз Д, генетич. деф. рН Кровь
7,36-7,42 Алкалоз Ацидоз Хлориды Кровь
95-103 ммоль/л Дегидратация, сердечная недостаточность, алкалоз, травмы мозга, передозировка кортикостероидов Стеноз привратника, бессолевая диета, перегревание, усиленное потоотделение, язвенный колит Буферные основания
(БО) Плазма крови
44-54 ммоль/л Неукротимая рвота, острая печеночная недостаточность, печеночная кома, травмы центральной нервной системы, сепсис, гипокалиемия, введение стероидных гормонов, гипер- вентиляния легких Гипоксия, гиповентиляция легких, острая и хроническая почечная недостаточность, дегидратация организма, сахарный диабет, диабетическая кома, голодание, тяжелая адреналиновая недостаточность Стандартный бикарбонат (СБ)
– « –
21-25 ммоль/л Сдвиг буферных ммоль/л Алкалоз Ацидоз
Креатинин Моча 4,4-17,4 ммоль сутки Сахарный диабет, гипотиреоз, гипофункция половых желез, инфекционные заболевания Гипертиреоз, мышечная дистрофия, врожденная миотомия, заболевание почек Общая кислотность Же- луд. сок
40-60 ммоль/л
Гиперацидные гастриты, язва желудка и 12-перстной кишки
Гипоацидные и анацидные га- стриты, опухоли желудка, неукротимая рвота Свободная НС Же- луд. сок
20-40 ммоль/л Связанная НС
– « –
10-12 ммоль/л Пепсин
– « –
0,2 -0,4 мг/мл Амилаза Сыворотка крови
3,3-8,9 мг/сек/л или 12-32 мг/час/ мл Острый панкреатит, вирусный гепатит, рак поджелудочной железы,почечная недостаточность, поражение слюнных желез, отравление салицилатами, фурасимидом Некроз поджелудочной железы
99 1
2 3
4 5 Холинэстераза мкмоль/ мл/час Гипертоническая болезнь, язвенная болезнь желудка, миома матки, нефрозы Поражение печени, отравление фосфоорганическими соединениями, генетический дефект, рак печени
Альдолаза
– « –
3-8 ед. Инфаркт миокарда, гемолитическая анемия, хронические заболевания печени, острый панкреатит, инфекционный гепатит, послеоперационные состояния
Глугами- коаспара- гиновая трансами- наза АсАТ
(ГОТ)
– « –
0,1-0,45 ммолъ
ПВК/л
(5-40 ед/л) Инфаркт миокарда, алкогольная интоксикация, гепатиты, жировая дистрофия печени, острый панкреатит, токсические поражения печени
Глутами- коалани- новая тран- саминаза
АлАТ(ГПТ)
– « –
0,1-0,7 ммоль л
(5-35 ед/л) Инфекционный гепатит, хронический гепатит, инфекционный мононуклеоз, дистрофия печени Щелочная фосфатаза
– « –
0,5-1,3 ммоль
НР/л/ч
Гиперпаратиреоз, остеомаляция, саркома остеогенная, хронический гепатит, жировое перерождение печени, цирроз печени, отравление барбитуратами, салицилатами, сульфаниламидами Гипотиреоз, гипофизарная карликовость, белковое голодание, авитаминоз С Кислая фосфатаза
– « –
0,05-
0,13 ммоль
НР/л/ч
Гиперпаратиреоз, метастазы опухолей в кости, лимфогранулематоз, карцинома желудка, предстательной железы, молочной железы
100 Основные биохимические показатели в педиатрии Показатель Единицы измерения Возраст новорожденный грудной от 1 до 4 лет старше 4 лет Общий белок гл
47-65 50-72 61-75 62-78 глобулины гл
9-10 6,5-8,5 8-11 10-18 Мочевина ммоль/л до 7,0 до 8,0 до 8,3 до 8,3
Креатинин мкмоль/л
27-88 18-35 27-62 53-106 Мочевая кислота ммоль/л
<0,34
<0,22
<0,15
<0,4 Глюкоза ммоль/л
0,3-3,3 0,7-4,2 1,8-5,4 3,3-5,5 Общие липиды гл
1,4-4,5 4,0-6,0 4,9-8,2 4-8
Триглице- риды гл
0,4-1,4 0,3-1,7 0,4-2,0 0,13-1,6
НЭЖК гл
1,3-1,4 0,6-1,3 0,3-0,6 0,45 Холестерин общий ммоль/л
1,3-4,4 1,6-4,9 2,6-6,0 5,2±1,2 Калий ммоль/л
3,6-6,1 3,6-5,8 3,1-5,1 3,7-5,4 Кальций ммоль/л
1,9-2,5 2,1-2,7 2,3-2,75 2,2-2,55 Натрий ммоль/л
132-147 128-143 132-145 146-157 Хлориды ммоль/л
95-116 93-112 96-111 95-110 Железо сыворотки крови ммоль/л
6,4-33 7,7-33 11-28 11-28 Билирубин нмоль/л
30-100 1,7-17 1,7-20,5 1,7-20,5 Тироксин Т) мг/л
80-240 55-210 75-220 66-175 Тироксин- связывающий глобулин мкат/л
18 18-32 16-32 1-3-26 Щелочная фосфатаза мкат/л до 7 до 8 до 8 2,4-22,5
101 ПЕРЕЧЕНЬ ПРАКТИЧЕСКИХ НАВЫКОВ Студент входе изучения курса биохимии должен освоить
1. Правила забора биоматериала для анализа, условия и сроки хранения проб.
2. Правила работы в биохимической лаборатории, требования к чисоте посуды, химических реактивов, уметь приготовить простейшие реактивы для анализа.
3. Уметь открывать качественно в биологических жидкостях присутствие белка, глюкозы, кетоновых тел, крови, молочной кислоты, желчных пигментов.
4. Уметь количественно определять в крови содержание глюкозы, холестерина, свободного и конъюгированного билирубина, остаточного азота, мочевины, креатинина, кальция, хлоридов, магния, сиаловых кислот, гликопротеинов, фенилпировиноградной и ксантуреновой кислот. Владеть техникой скрининг-тестов и экспресс-методами биохимии.
6. Уметь провести биохимический анализ желудочного сока с расчетом всех видов кислотности, определением активности пепсина, обнаружением патологических составных частей с последующим обоснованным заключением.
7. Владеть навыками выделения, очистки и разделения белков и ферментов, освоить основы ферментативного метода анализа.
8. Уметь работать с аппаратурой термостатами водяными и воздушными, центрифугой, фотоэлектроколориметром, рН-метром, рефрактометром, спектрофотометром.
9. Знать основные биохимические константы и причины, способные приводить к отклонению основных биохимических показателей биологических жидкостей. Уметь использовать полученные теоретические знания для решения конкретных практических ситуационных задач.
102 Использованная литература
1.
103 ОГЛАВЛЕНИЕ Раздел I Обмен и функции аминокислот. Биосинтез нуклеиновых кислот и белка Основы молекулярной генетики ………………………. …………
3 Работа 1. Определение кислотности желудочного сока водной порции (по Михаэлису)……………………………….
6 Работа 2. Количественное определение пепсина в желудочном соке (по Пятницкому Н.П.) ……………………......
9 Работа 3. Патологические составные части желудочного сока ……………… 10 Возрастная характеристика процессов переваривания и всасывания белков.
12 Работа 4. Определение активности аминотрансфераз ……………………….. 13 Работа 5. Определения свободного аминного азота в сыворотке крови ……………………………………………………
17 Работа 6. Количественное определение мочевой кислоты в сыворотке крови ……………………………………………………
19 Работа 7. Количественное определение фенилпировиноградной кислоты в моче ……………………………………………………….
21 Работа 8. Определение ксантуреновой кислоты в моче ……………………… 23 Работа 9.
Скрининг-тесты для выявления наследственных нарушений обмена аминокислот ……………………………………
25 Работа 10. Количественное определение мочевины крови уреазным методом ……………………………………………
26 Работа 11. Количественное определение креатинина в сыворотке крови ……………………………………………………
27 Раздел II Обмен и функции липидов. Взаимосвязь обмена аминокислот, углеводов и липидов
29 Работа 12. Качественное открытие липопротеинов…………………………. 32 Работа 13. Определение свободных (неэтерифицированных) жирных кислот в сыворотке крови (НЭЖК)………………………..
33 Работа 14. Роль альбуминов в транспорте высших жирных кислот ……………………………………………………….
34 Работа 15. Эмульгирование жиров ……………………………………………. 35 Работа 16. Качественные реакции на жѐлчные кислоты …………………...... 36 Работа 17. Кинетика действия липазы ………………………………………... 37 Работа 18. Влияние желчи на активность липазы. 38 Работа 19. Определение общих липидов крови турбидиметрическим методом ………………………………………
39 Работа 20. Определение содержания β-липопротеиновсыворотки крови (по Бурштейну)…………………………………………….....
41 Работа 21. Количественное определение общего холестерина в сыворотке крови ……………………………………………………
42
104 Работа 22. Определение холестерина в ЛПВП и расчет индекса атерогенности по методу Е.А. Бородина …………………
47 Работа 23. Обнаружение кетоновых тел ……………………………………….. 48 Раздел III Функциональная биохимия 52 Глава 1. Биохимия крови Работа 24. Количественное определение хлоридов крови по методу Банга ……………………………………………….
53 Работа 25. Количественное определение кальция в сыворотке крови ……………………………………………………
55 Работа 26. Количественное определение кальция в сыворотке крови титрометическим методом ……………………..
56 Работа 27. Количественное определение магния в сыворотке крови ……………………………………………………
58 Работа 28. Количественное определение железа в сыворотке крови ……………………………………………………
60 Работа 29. Количественное определение остаточного азота в сыворотке крови по методу Асселя ………………………..
62 Работа 30. Качественное открытие билирубина диазореакцией Эрлиха ……………………………………………….
64 Работа 31. Количественное определение билирубина в сыворотке крови ……………………………………………………
65 Работа 32. Определение общего (прямого и непрямого) билирубина по методу Ендрашика и соавт.…………………………
66 Глава 2. Биохимия печени …………………………………………………. 71 Работа 33. Тимоловая проба ……………………………………………………..73 Работа 34. Количественное определение активности щелочной фосфатазы (ЩФ) сыворотки крови ……………………..
74 Работа 35. Определение в моче свободных и ацетилированных форм сульфаниламидов ………………………
75 Глава 3. Биохимия мочи 78 Работа 36. Определение рН мочи ………………………………………………..79 Работа 37. Определение титрационной кислотности мочи по методу Фолина ……………………………………………..
79 Работа 38. Качественное открытие и количественное определение патологических компонентов мочи Глава 4. Биохимия слюны 92 Работа 39. Изучение химического состава смешанной слюны …………………………………………………..
93 Биохимические показатели биологических жидкостей человека Основные биохимические показатели в педиатрии. 100 Перечень практических навыков …………………………………………………...101 Использованная литература
105
Корочанская Светлана Петровна
Сторожук Петр Григорьевич Быков Илья Михайлович
УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ ПО БИОЛОГИЧЕСКОЙ ХИМИИ ЧАСТЬ 2 Обмен белков, обмен липидов, биохимия крови, печени, мочи, слюны. Основные константы биологических жидкостей человека Типография ГБОУ ВПО КубГМУ Минздравсоцразвития России
350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4
Тел/факс 268-36-84 Отпечатано в типографии методом цифровой печати Подписано в печать 23.05.12 Тираж 700 экз.
106
оп
г/л
Е
оп
г/л
Е
оп
г/л
Е
оп
г/л
0,01 0,025 0,33 0,64 0,65 1,26 0,97 1,90 0,02 0,050 0,34 0,66 0,66 1,28 0,98 1,92 0,03 0,075 0,35 0,68 0,67 1,30 0,99 1,94 0,04 0,10 0,36 0,70 0,68 1,32 1,0 1,96 0,05 0,12 0,37 0,72 0,69 1,34 1,1 1,98 0,06 0,14 0,38 0,74 0,70 1,36 1,2 2,0 0,07 0,16 0,39 0,75 0,71 1,38 1,3 2,2 0,08 0,18 0,40 0,76 0,72 1,40 1,4 2,4 0,09 0,20 0,41 0,78 0,73 1,42 1,5 2,6 0,10 0,22 0,42 0,80 0,74 1,44 1,6 2,8 0,11 0,24 0,43 0,82 0,75 1,46 1,7 3,0 0,12 0,25 0,44 0,84 0,76 1,48 1,8 3,2 0,13 0,26 0,45 0,86 0,77 1,50 1,9 3,4 0,14 0,28 0,46 0,88 0,78 1,52 2,0 3,6 0,15 0,30 0,47 0,90 0,79 1,54 2,1 3,8 0,16 0,32 0,48 0,92 0,80 1,56 2,2 4,0 0,17 0,34 0,49 0,94 0,81 1,58 2,3 4,2 0,18 0,35 0,50 0,69 0,82 1,60 2,1 4,4 0,19 0,36 0,51 0,98 0,83 1,62 2,5 4,6 0,20 0,38 0,52 1,00 0,84 1,64 2,6 4,8 0,21 0,40 0,53 1,02 0,85 1,66 2,7 5,0 0,22 0,42 0,54 1,04 0,86 1,68 2,8 5,2 0,23 0,44 0,55 1,06 0,87 1,70 2,9 5,4 0,24 0,46 0,56 1,08 0,88 1,72 3,0 5,6 0,25 0,48 0,57 1,10 0,89 1,74 3,1 5,8 0,26 0,50 0,58 1,12 0,90 1,76 3,2 6,0 0,27 0,52 0,59 1,14 0,91 1,78 3,3 6,2 0,28 0,54 0,60 1,16 0,72 1,80 3,4 6,4 0,29 0,56 0,61 1,18 0,93 1,82 3,5 6,6 0,30 0,58 0,62 1,20 0,94 1,84 3,6 6,8 0,31 0,60 0,63 1,22 0,95 1,86 3,7 0,32 0,62 0,64 1,24 0,96 1,88 3,8
Клинико-диагностическое значение В нормальной моче белок присутствует в количествах, которые обычными методами лабораторной диагностики не открываются. Если белок в моче открывается даже в следовых количествах – это протеинурия, которая может быть как функциональной, таки патологической. В мочу чаще попадают белки сыворотки крови (альбумины, поэтому иногда это явление называют альбуминурией. Почечные протеинурии возникают при остром гломерулонефрите, нефротическом синдроме, токсикозе беременных, нарушениях почечного кровоснабжения, при сердечной недостаточности. Внепочечные протеину- рии связаны с поражением мочевыводящих путей, предстательной железы, имеют место при анемиях, заболеваниях печени. Функциональные протеинурии встречаются у детей раннего возраста, при длительном стоянии (ортостатическая, ходьбе (маршевая. В. Качественное определение глюкозы в моче Реакция Фелинга) Принцип основан на способности глюкозы восстанавливать при нагревании в щелочной среде гидроксид меди (II) (голубого цвета) в гидроксид меди (I) (желтого цвета) и оксид меди (I) (красного цвета. Порядок выполнения работы В пробирку внести 20 капель мочи, содержащей глюкозу, и добавить
15-20 капель реактива Фелинга. Пробирку нагреть до кипения и прокипятить в течение 1 минуты, появляется красный осадок оксида меди (I). Для сравнения проделать реакцию с нормальной мочой.
87 В. Обнаружение сахара в моче с помощью индикатора бумаги «Глюкотест» Принцип основан на специфическом окислении глюкозы с помощью фермента глюкооксидазы. Высвобождающийся пероксид водорода разлагается пероксидазой и окисляет краситель. Изменение окраски сравнивается с готовой шкалой. Этот метод позволяет не только обнаруживать глюкозу в мочено и определить предварительно ее содержание в пределах 1-20 гл. Порядок выполнения работы В пробирку налить 5-7 мл исследуемой мочи и погрузить в нее окрашенную часть полоски «Глюкотест». Вытащить полоску, положить на чашку Петри и оставить для развития окраски на 2 минуты. Сравнить развивающуюся окраску со стандартной шкалой. Содержимое глюкозы определить по стандартной шкале. Сделать заключение.
88 Г. Количественное определение глюкозы в моче по методу
Альтгаузена Принцип основан на способности глюкозы в щелочной среде при нагревании разрушаться с образованием окрашенных продуктов. Интенсивность развивающегося окрашивания пропорциональна количеству глюкозы, присутствующей в моче. Порядок выполнения работы В пробирку отмерить 4 мл мочи и добавить 20 капель 10% гидроксида натрия. Прокипятить в течение одной минуты и оставить на 10 минут при комнатной температуре для развития окраски. Интенсивность окрашивания сравнить со стандартной шкалой, представляющей собой таким же образом обработанную мочу, содержащую
5; 10; 15; 20; 30; 40 гл сахара. Сделать заключение о содержании сахара в исследуемой моче.
Клинико-диагностическое значение В нормальной моче сахар присутствует в количестве 0,20. гл, что ниже разрешающей способности обычных лабораторных методов диагностики. Если доступными лабораторными методами в моче обнаружен сахар, это глюкозурия. Различают глюкозурию гипергликемическую и почечную. При гипергликемической глюкозурии причиной появления сахара в моче является значительная гипергликемия, превышающая порог почечной проницаемости для глюкозы (8-10 ммоль/л). При почечной глюкозу- рии нарушается способность почки реабсорбировать глюкозу из первичной мочи (ренальный диабет. При ряде лизосомных болезней, обусловленных врожденными фермен- топатиями, в моче могут появиться другие моносахара: фруктоза, галактоза, нейраминовая кислота и др.
89 Д. Качественное обнаружение в мочекровии кровяных пигментов (бензидиновая проба Принцип основан на способности пероксидазы и каталазы крови разрушать перекись водорода до атомарного кислорода, который окисляет бензидин в п-хинондиимид сине-зеленого цвета. Порядок выполнения работы В пробирку налить 20 капель мочи, в которой ожидается присутствие крови, добавить 20 капель раствора бензидина в уксусной кислоте и 5-6 капель пероксида водорода. При наличии кровянных пигментов моча окрашивается в сине-зеленый цвет. Для сравнения проделать пробу с нормальной мочой. Данные оформить в виде протокола.
Клинико-диагностическое значение Кровь в моче (гематурия) появляется при нарушении целостности кровеносных сосудов почки и мочевыводящих путей. При тяжелых инфекционных заболеваниях, отравлениях гемолитическими ядами, ожогах, гемолитических анемиях происходит разрушение эритроцитов, переход гемоглобина в плазму, гемоглобин появляется в моче (гемоглобинурия.
90 Е. Качественное обнаружение желчных пигментов в моче Е. Проба Родина Принцип основан на окислении билирубина мочи в биливердин под действием различных реагентов. Порядок выполнения работы В пробирку налить 3 мл мочи и осторожно, по стенке наслоить 10-15 капель 1% раствора йода. Если в моче присутствуют желчные пигменты, тона границе раздела появляется зеленое кольцо биливердина. Для сравнения проделать пробу с нормальной мочой. Е. Проба Розенбаха Порядок выполнения работы Через маленький фильтр профильтровать 2-3 мл мочи. В конус фильтра внести 1-2 капли концентрированной азотной кислоты. При наличии в моче желчных пигментов появляются на фильтре окрашенные кольца фиолетовое, синее, зеленое, красное, желтое. Первым появляется зеленое кольцо. Для сравнения проделать пробу с нормальной мочой. Данные оформить в виде протокола.
91
Клинико-диагностическое значение В нормальной моче желчные пигменты лабораторными методами диагностики не обнаруживаются. Желчные пигменты обнаруживаются в моче при паренхиматозной и обтурационной желтухах, когда появляется сообщение между печеночными ходами и кровеносными сосудами вследствие нарушения целостности печеночных клеток или, изменения проницаемости их мембран. В кровь попадает прямой (связанный) билирубин. Этот билирубин фильтруется в мочу. Развивается билирубинурия. Ж. Обнаружение кетоновых тел в моче Принцип основан на способности кетоновых тел (ацетон, ацетоуксусная, β-гидроксимасляная кислоты) давать цветные реакции с различными реагентами. (Смотри работу № 23)
Клинико-диагностическое значение Кетоновые тела в норме образуются в печени здоровых людей из аце- тил-КоА. Током крови они поставляются к мышцам, где подвергаются окислению. Обычными методами лабораторной диагностики в моче кетоновые тела не обнаруживаются, т. к. их выведение у здоровых людей не превышает 20-50 мг/сутки. Резкое увеличение кетоновых тел в моче (кето- нурия) характерно для сахарного диабета, поскольку при этом активируется кетогенез и развивается кетонемия. Кетоновые тела определяются в моче при голодании, кахексии, в послеоперационном периоде, при гликогенозах и интоксикациях.
92
4. БИОХИМИЯ СЛЮНЫ Цель изучения раздела усвоить химический состав слюны и ее роль в процессах жизнедеятельности. Уметь находить взаимосвязь между нарушением химического состава слюны и возможными патологическими процессами в полости рта и зубной ткани. Научиться самостоятельно проводить химический анализ смешанной слюны. Основные вопросы раздела
1. Химический состав слюны. Роль слюны в процессах жизнедеятельности.
3. Взаимосвязь между патологическими процессами в ротовой полости и химическим составом слюны. Слюна – это секрет слюнных желез, выделяющийся в полость рта и участвующий в пищеварении. В выполнении биологических функций участвует смешанная слюна, представляющая собой смесь секретов слюнных желез, микрофлоры полости рта и продуктов ее жизнедеятельности, слу- щенных эпителиальных клеток слизистой полости рта. Ежесуточно у взрослого человека выделяется дол слюны. Смешанная слюна вязкая (за счет гликопротеинов, мутная (за счет микрофлоры и слущенных эпителиальных клеток) биологическая жидкость, рН которой зависит от состояния полости рта и характера пищи (при растительной пище рН слюны сдвигается в щелочную, аживотной – в кислую сторону) Вода Плотный остаток (0,5%)
99,5% Органические вещества Минеральные вещества Белок (ферменты Анионы Катионы амилаза, мальтаза, лизоцим Хлориды Натрий Остаточный азот Фосфаты Калий
Моносахара Бикарбонаты Магний Липиды Бромиды Кальций Витамины Фториды и др. Гормоны Роданиды
93 Белки слюны представлены ферментами, альбуминами, иммуноглобулинами (А, М, гликопротеинами. В слюне есть особые белки, которые индуцируют отложение фосфорнокалиевых солей на зубах кальций связывающий белок и белок с высоким сродством к гидроксиапатиту. Эти белки способствуют образованию зубного налета и зубного камня. Биологическая роль слюны
1. Смачивание пищи и облегчение проглатывания пищевого комка.
2. Растворение компонентов пищи, что обеспечивает их воздействие на пищеварительные анализаторы.
3. Первоначальная химическая обработка углеводов за счет амилазы.
4. Химическая защита полости рта от токсического действия микробов за счет лизоцима.
5. Механическая защита полости рта (муцины, жидкая часть.
6. Двусторонний транспорт веществ между слизистой полости рта, зубами и слюной.
7. Слюна – основной источник поступления в эмаль зуба Са, Р и других минеральных веществ. Работа 39. ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА СМЕШАННОЙ СЛЮНЫ Цель работы научиться самостоятельно проводить химический анализ смешанной слюны.
1. Определение рН слюны Принцип метода основан на способности универсальной индикаторной бумаги изменять окраску в зависимости от рН биологической жидкости. Порядок выполнения работы
Наполоску универсальной индикаторной бумаги нанести несколько капель неразбавленной собственной слюны. Сравнить развивающуюся окраску с эталонной шкалой. Сделать заключение о рН данной слюны.
2. Качественное обнаружение белка в слюне
биуретовой реакцией Принцип метода основан на способности белка в щелочной среде при взаимодействии с ионами меди давать сине-фиолетовое окрашивание, интенсивность которого пропорциональна содержанию белка.
94 Порядок выполнения работы В пробирку внести 15-20 капель неразбавленной слюны, добавить 1 каплю сульфата меди, 4-5 капель 10% гидроксида натрия. Записать результат. Обнаружение муцинов в слюне Принцип метода основан на способности муцинов выпадать в осадок в кислой среде. Порядок выполнения работы В пробирку внести 2-3 мл неразбавленной слюны, добавить 10— 15 капель уксусной кислоты. Тщательно встряхнуть. Выпадает осадок. Профильтровать через влажный фильтр. Осадок на фильтре – муцин слюны (фильтрат сохранить до следующего опыта.
4. Открытие в слюне хлоридов Принцип метода основан на способности ионов хлора образовывать с нитратом серебра нерастворимый осадок. Порядок выполнения работы К фильтрату, полученному в предыдущем опыте, добавить по каплям раствор нитрата серебра. Результаты опыта записать.
5. Открытие в слюне роданидов Принцип метода основан на способности роданистых солейдавать розовое окрашивание с хлоридом железа (III). Порядок выполнения работы На полоску фильтровальной бумаги, обработанную хлоридом железа
(III) нанести 1-2 капли неразбавленной слюны. При наличии в слюне роданидов появляется розовое окрашивание, интенсивность которого пропорциональна содержанию роданидов. Сравните содержание роданидов (по окраске бумаги) в слюне курящих и некурящих.
5. Качественное открытие амилазы в слюне. Принцип метода основан на способности фермента гидролизовать крахмал и превращать его через декстрины в мальтозу.
95 Порядок выполнения работы В пробирку внести 20-30 капель 0,5% раствора крахмала, добавить несколько капель неразведенной слюны и оставить при комнатной температуре на 10 минут. Через 10 минут добавить в реакционную смесь 2-3 капли реактива Люголя. Для сравнения проделать реакцию с исходным раствором крахмала. Данные записать, сделать заключение. Сделать заключение о химическом составе собственной слюны. Теоретически обосновать возможность нарушений биохимических процессов в ротовой полости при изменениях химического состава слюны.
96 Биохимические показатели биологических жидкостей человека Показатель Биолог. жидкость Норма Повышенное Пониженное
1 2
3 4
5
Аминный азот Сыворотка крови
0,2-0,43 гл Печеночная кома, отравление фосфором, хлороформом, ква- шиоркор, тяжелый сахарный диабет, после кровотечения
Нефрозы, после введения инсулина, гормона роста, андрогенов Общий белок
– « –
65-80 гл Дегидратация, ожоги, рвота, миеломная болезнь Голодание, тиреотоксикоз, поражение печени, поражение почек Альбумины гл Дегидратация, гиперпро- теинемия
Гипопротеинемия, поражение почек, поражение печени, наследственные дефект, токсикоз беременности, ожоговая болезнь, квашиоркор, голодание Глобулины суммарно гл
Коллагенозы, поражение почек Некроз печени, нефротический синдром Фракции глобулинов гл 4-
7 гл Острые воспалительные, некро- тические заболевания коллагено- зы, метастазирование опухолей Гепатиты, некрозы пече- ни,гипотиреозы
β-
5-9 гл Атеросклероз, ожирение, нефротический синдром, инфаркт миокарда, гипотиреоз Острые заболевания печени, анемия, цирроз печени
γ-
8-17 гл Хронические воспаления, деструкция ткани, онкозаболевания, белковая недостаточность, голодание, цирроз печени, обтураци- онная желтуха
Иммунодефицитные заболевания, интоксикация кортикостероидами, врожденный дефект, отравление бензолом, метастазы опухоли в кости.
Альбуми- ново-гло- булиновый коэффициент Сыворотка крови
1,6-2,0 Поражение печени, почек Остаточный азот
– « –
14-25 ммоль л Неукротимая рвота, обширные ожоги, нарушение выделительной функции почек, туберкулез, поражение мочевыводяших путей Тяжелая печеночная недостаточность, голодание, поздние сроки беременности, мало- белковая диета Мочевина
– « –
3,3-8,3 ммоль л Хронические поражения почек, злокачественные опухоли моче- выводящих путей, отравление сулемой, усиленный распад белков, непроходимость кишечника Злокачественная анемия, отравление фосфором, хинином, ги- перпротеиновая диета
Малобелковая диета, поздние сроки беременности, врожденные дефекты ферментных систем мочеобразования Мочевина Моча 330-580 ммоль/л Уремия, нефрит, ацидоз, поражение псчени(цирроз, атрофия, паренхиматозная желтуха)
97
Обший холестерин ммоль/л Атеросклероз, сахарный диабет, миелоидный нефроз, микседема, механическая желтуха, наследственные нарушения обмена холестерина Анемия, туберкулез, гипертиреоз, паренхиматозная желтуха, раковая кахексия, голодание Билирубин обший
– « –
1,7-20,5 мкмоль/ л Гемолитическая анемия, инфекционный гепатит, физиологическая желтуха новорожденных, рак желчного пузыря, обтураци- онная желтуха, абсцесс печени, хронический гепатит, рак желчного пузыря Прием барбитуратов и витамина С Калий Плазма крови
3,8-4,6 ммоль/л
Гиперальдостеронизм, ацидоз, ожоги, гипоксия, травматический токсикоз, анурия Неукротимая рвота, профузные поносы, применение мочегонных средств
1 2
3 4
5 Глюкоза Кровь 3,3-5,5 ммоль/л Сахарный диабет, стероидный диабет, острый панкреатит, опухоли мозга, гиперфункция щитовидной железы, гипофиза, эмоциональное возбуждение Передозировка инсулина, поражение почек (ренальный диабет, отравление фосфором, бензо- лом,гиперпродукция инсулина, недостаточность функции щитовидной железы, коры надпочечников, голодание. Порог почечной проницаемости для глюкозы Кровь 8,0-10,0 ммоль/л
Ренальный диабет Гликопротеины Сыворотка крови
1,2-1,6 гл Туберкулез легких, пнев- мония,плеврит, острый ревматизм, сахарный диабет, онкозабо- левания, подагра, инфаркт миокарда Сиаловые кислоты
– « –
0,55-
0,79 гл Опухоли мозга, инфаркт миокарда, онкозаболевания, туберкулез, остеомиелит, нефроз Пернициозная анемия, дегенеративные процессы в нервной ткани, гемохроматоз Кетоновые тела
– « – до 30 мг/л Голодание, сахарный диабет, диабетическая кома, гипертирсоз, поражение печени, безуглеводная диета, гликогенозы, алкалозы Общие липиды гл Ожирение, алкоголизм, гипотиреоз, цирроз печени, панкреатит, обтурационная желтуха, гликоге- нозы, сахарный диабет, нефрит Голодание, гипертиреоз, острые инфекции, пернициозная анемия Натрий
– « –
130-170 ммоль/л Избыточное поступление спи- щей, гиперальдостеронизм, респираторный ацидоз, неукротимая рвота Недостаток Na в пище, почечная недостаточность, гипоальдостеро- низм, применение диуретиков, неукротимая рвота, ожоги, сердечная недостаточность
98 1
2 3
4 5 Кальций общий Сыворотка крови
2,25-2,75 ммопь/л
Гипервитаминоз Д, гиперпарати- реоз, лейкозы, карцинома скелета, наследственная гиперкаль- ииемия, разрушения костной ткани
Гипопаратиреоз, наследственная тетания, гиповитаминоз Д, хроническая почечная недостаточность Фосфор неорганический ммоль/л Наследственная тетания, гипер- витаминоз Д, гипопаратиреоз, хронические поражения почек Отравление алкоголем, поражение гипофиза, гиповитаминоз Д, генетич. деф. рН Кровь
7,36-7,42 Алкалоз Ацидоз Хлориды Кровь
95-103 ммоль/л Дегидратация, сердечная недостаточность, алкалоз, травмы мозга, передозировка кортикостероидов Стеноз привратника, бессолевая диета, перегревание, усиленное потоотделение, язвенный колит Буферные основания
(БО) Плазма крови
44-54 ммоль/л Неукротимая рвота, острая печеночная недостаточность, печеночная кома, травмы центральной нервной системы, сепсис, гипокалиемия, введение стероидных гормонов, гипер- вентиляния легких Гипоксия, гиповентиляция легких, острая и хроническая почечная недостаточность, дегидратация организма, сахарный диабет, диабетическая кома, голодание, тяжелая адреналиновая недостаточность Стандартный бикарбонат (СБ)
– « –
21-25 ммоль/л Сдвиг буферных ммоль/л Алкалоз Ацидоз
Креатинин Моча 4,4-17,4 ммоль сутки Сахарный диабет, гипотиреоз, гипофункция половых желез, инфекционные заболевания Гипертиреоз, мышечная дистрофия, врожденная миотомия, заболевание почек Общая кислотность Же- луд. сок
40-60 ммоль/л
Гиперацидные гастриты, язва желудка и 12-перстной кишки
Гипоацидные и анацидные га- стриты, опухоли желудка, неукротимая рвота Свободная НС Же- луд. сок
20-40 ммоль/л Связанная НС
– « –
10-12 ммоль/л Пепсин
– « –
0,2 -0,4 мг/мл Амилаза Сыворотка крови
3,3-8,9 мг/сек/л или 12-32 мг/час/ мл Острый панкреатит, вирусный гепатит, рак поджелудочной железы,почечная недостаточность, поражение слюнных желез, отравление салицилатами, фурасимидом Некроз поджелудочной железы
99 1
2 3
4 5 Холинэстераза мкмоль/ мл/час Гипертоническая болезнь, язвенная болезнь желудка, миома матки, нефрозы Поражение печени, отравление фосфоорганическими соединениями, генетический дефект, рак печени
Альдолаза
– « –
3-8 ед. Инфаркт миокарда, гемолитическая анемия, хронические заболевания печени, острый панкреатит, инфекционный гепатит, послеоперационные состояния
Глугами- коаспара- гиновая трансами- наза АсАТ
(ГОТ)
– « –
0,1-0,45 ммолъ
ПВК/л
(5-40 ед/л) Инфаркт миокарда, алкогольная интоксикация, гепатиты, жировая дистрофия печени, острый панкреатит, токсические поражения печени
Глутами- коалани- новая тран- саминаза
АлАТ(ГПТ)
– « –
0,1-0,7 ммоль л
(5-35 ед/л) Инфекционный гепатит, хронический гепатит, инфекционный мононуклеоз, дистрофия печени Щелочная фосфатаза
– « –
0,5-1,3 ммоль
НР/л/ч
Гиперпаратиреоз, остеомаляция, саркома остеогенная, хронический гепатит, жировое перерождение печени, цирроз печени, отравление барбитуратами, салицилатами, сульфаниламидами Гипотиреоз, гипофизарная карликовость, белковое голодание, авитаминоз С Кислая фосфатаза
– « –
0,05-
0,13 ммоль
НР/л/ч
Гиперпаратиреоз, метастазы опухолей в кости, лимфогранулематоз, карцинома желудка, предстательной железы, молочной железы
100 Основные биохимические показатели в педиатрии Показатель Единицы измерения Возраст новорожденный грудной от 1 до 4 лет старше 4 лет Общий белок гл
47-65 50-72 61-75 62-78 глобулины гл
9-10 6,5-8,5 8-11 10-18 Мочевина ммоль/л до 7,0 до 8,0 до 8,3 до 8,3
Креатинин мкмоль/л
27-88 18-35 27-62 53-106 Мочевая кислота ммоль/л
<0,34
<0,22
<0,15
<0,4 Глюкоза ммоль/л
0,3-3,3 0,7-4,2 1,8-5,4 3,3-5,5 Общие липиды гл
1,4-4,5 4,0-6,0 4,9-8,2 4-8
Триглице- риды гл
0,4-1,4 0,3-1,7 0,4-2,0 0,13-1,6
НЭЖК гл
1,3-1,4 0,6-1,3 0,3-0,6 0,45 Холестерин общий ммоль/л
1,3-4,4 1,6-4,9 2,6-6,0 5,2±1,2 Калий ммоль/л
3,6-6,1 3,6-5,8 3,1-5,1 3,7-5,4 Кальций ммоль/л
1,9-2,5 2,1-2,7 2,3-2,75 2,2-2,55 Натрий ммоль/л
132-147 128-143 132-145 146-157 Хлориды ммоль/л
95-116 93-112 96-111 95-110 Железо сыворотки крови ммоль/л
6,4-33 7,7-33 11-28 11-28 Билирубин нмоль/л
30-100 1,7-17 1,7-20,5 1,7-20,5 Тироксин Т) мг/л
80-240 55-210 75-220 66-175 Тироксин- связывающий глобулин мкат/л
18 18-32 16-32 1-3-26 Щелочная фосфатаза мкат/л до 7 до 8 до 8 2,4-22,5
101 ПЕРЕЧЕНЬ ПРАКТИЧЕСКИХ НАВЫКОВ Студент входе изучения курса биохимии должен освоить
1. Правила забора биоматериала для анализа, условия и сроки хранения проб.
2. Правила работы в биохимической лаборатории, требования к чисоте посуды, химических реактивов, уметь приготовить простейшие реактивы для анализа.
3. Уметь открывать качественно в биологических жидкостях присутствие белка, глюкозы, кетоновых тел, крови, молочной кислоты, желчных пигментов.
4. Уметь количественно определять в крови содержание глюкозы, холестерина, свободного и конъюгированного билирубина, остаточного азота, мочевины, креатинина, кальция, хлоридов, магния, сиаловых кислот, гликопротеинов, фенилпировиноградной и ксантуреновой кислот. Владеть техникой скрининг-тестов и экспресс-методами биохимии.
6. Уметь провести биохимический анализ желудочного сока с расчетом всех видов кислотности, определением активности пепсина, обнаружением патологических составных частей с последующим обоснованным заключением.
7. Владеть навыками выделения, очистки и разделения белков и ферментов, освоить основы ферментативного метода анализа.
8. Уметь работать с аппаратурой термостатами водяными и воздушными, центрифугой, фотоэлектроколориметром, рН-метром, рефрактометром, спектрофотометром.
9. Знать основные биохимические константы и причины, способные приводить к отклонению основных биохимических показателей биологических жидкостей. Уметь использовать полученные теоретические знания для решения конкретных практических ситуационных задач.
102 Использованная литература
1.
1 2 3 4 5 6 7
Алейникова Т.П., Рубцова Г.В. Биохимия. Руководство к практическим занятиям по биологической химии. – М Высшая школа,
1988.– 239 с.
Пустовалова Л.М. Практикум по биохимии для студентов вузов. –
Ростов-на-Дону: Феникс, 1999. – 541 с.
3.
Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимическим исследованиями лабораторной диагностике. – М Медпресс-информ, 2004.
– с.
4.
Бышевский А.Ш., Терсенов О.А. Биохимия для врача. – Екатеринбург Уральский рабочий, 1994. – 383 с.
5. Клиническая биохимия / Под ред. член-корр. РАН В.А. Ткачука.
– М ГЭОТАР-МЕД, 2006. – 566 с.
6.
Хейль В, Коберштейн Р, Цавта Б. Референтные пределы у взрослых и детей. – М Лабпресс, 2001. – 176 с.
7.
Чиркин А.А. Клинический анализ лабораторных данных. – М Медицинская литература, 2004. – 380 с.
8. Медицинские и лабораторные технологии. Справочник / Под редакцией проф. АИ. Карпищенко. – Санкт-Петербург: Интермедика,
2002. В х т.
1988.– 239 с.
Пустовалова Л.М. Практикум по биохимии для студентов вузов. –
Ростов-на-Дону: Феникс, 1999. – 541 с.
3.
Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимическим исследованиями лабораторной диагностике. – М Медпресс-информ, 2004.
– с.
4.
Бышевский А.Ш., Терсенов О.А. Биохимия для врача. – Екатеринбург Уральский рабочий, 1994. – 383 с.
5. Клиническая биохимия / Под ред. член-корр. РАН В.А. Ткачука.
– М ГЭОТАР-МЕД, 2006. – 566 с.
6.
Хейль В, Коберштейн Р, Цавта Б. Референтные пределы у взрослых и детей. – М Лабпресс, 2001. – 176 с.
7.
Чиркин А.А. Клинический анализ лабораторных данных. – М Медицинская литература, 2004. – 380 с.
8. Медицинские и лабораторные технологии. Справочник / Под редакцией проф. АИ. Карпищенко. – Санкт-Петербург: Интермедика,
2002. В х т.
103 ОГЛАВЛЕНИЕ Раздел I Обмен и функции аминокислот. Биосинтез нуклеиновых кислот и белка Основы молекулярной генетики ………………………. …………
3 Работа 1. Определение кислотности желудочного сока водной порции (по Михаэлису)……………………………….
6 Работа 2. Количественное определение пепсина в желудочном соке (по Пятницкому Н.П.) ……………………......
9 Работа 3. Патологические составные части желудочного сока ……………… 10 Возрастная характеристика процессов переваривания и всасывания белков.
12 Работа 4. Определение активности аминотрансфераз ……………………….. 13 Работа 5. Определения свободного аминного азота в сыворотке крови ……………………………………………………
17 Работа 6. Количественное определение мочевой кислоты в сыворотке крови ……………………………………………………
19 Работа 7. Количественное определение фенилпировиноградной кислоты в моче ……………………………………………………….
21 Работа 8. Определение ксантуреновой кислоты в моче ……………………… 23 Работа 9.
Скрининг-тесты для выявления наследственных нарушений обмена аминокислот ……………………………………
25 Работа 10. Количественное определение мочевины крови уреазным методом ……………………………………………
26 Работа 11. Количественное определение креатинина в сыворотке крови ……………………………………………………
27 Раздел II Обмен и функции липидов. Взаимосвязь обмена аминокислот, углеводов и липидов
29 Работа 12. Качественное открытие липопротеинов…………………………. 32 Работа 13. Определение свободных (неэтерифицированных) жирных кислот в сыворотке крови (НЭЖК)………………………..
33 Работа 14. Роль альбуминов в транспорте высших жирных кислот ……………………………………………………….
34 Работа 15. Эмульгирование жиров ……………………………………………. 35 Работа 16. Качественные реакции на жѐлчные кислоты …………………...... 36 Работа 17. Кинетика действия липазы ………………………………………... 37 Работа 18. Влияние желчи на активность липазы. 38 Работа 19. Определение общих липидов крови турбидиметрическим методом ………………………………………
39 Работа 20. Определение содержания β-липопротеиновсыворотки крови (по Бурштейну)…………………………………………….....
41 Работа 21. Количественное определение общего холестерина в сыворотке крови ……………………………………………………
42
104 Работа 22. Определение холестерина в ЛПВП и расчет индекса атерогенности по методу Е.А. Бородина …………………
47 Работа 23. Обнаружение кетоновых тел ……………………………………….. 48 Раздел III Функциональная биохимия 52 Глава 1. Биохимия крови Работа 24. Количественное определение хлоридов крови по методу Банга ……………………………………………….
53 Работа 25. Количественное определение кальция в сыворотке крови ……………………………………………………
55 Работа 26. Количественное определение кальция в сыворотке крови титрометическим методом ……………………..
56 Работа 27. Количественное определение магния в сыворотке крови ……………………………………………………
58 Работа 28. Количественное определение железа в сыворотке крови ……………………………………………………
60 Работа 29. Количественное определение остаточного азота в сыворотке крови по методу Асселя ………………………..
62 Работа 30. Качественное открытие билирубина диазореакцией Эрлиха ……………………………………………….
64 Работа 31. Количественное определение билирубина в сыворотке крови ……………………………………………………
65 Работа 32. Определение общего (прямого и непрямого) билирубина по методу Ендрашика и соавт.…………………………
66 Глава 2. Биохимия печени …………………………………………………. 71 Работа 33. Тимоловая проба ……………………………………………………..73 Работа 34. Количественное определение активности щелочной фосфатазы (ЩФ) сыворотки крови ……………………..
74 Работа 35. Определение в моче свободных и ацетилированных форм сульфаниламидов ………………………
75 Глава 3. Биохимия мочи 78 Работа 36. Определение рН мочи ………………………………………………..79 Работа 37. Определение титрационной кислотности мочи по методу Фолина ……………………………………………..
79 Работа 38. Качественное открытие и количественное определение патологических компонентов мочи Глава 4. Биохимия слюны 92 Работа 39. Изучение химического состава смешанной слюны …………………………………………………..
93 Биохимические показатели биологических жидкостей человека Основные биохимические показатели в педиатрии. 100 Перечень практических навыков …………………………………………………...101 Использованная литература
105
Корочанская Светлана Петровна
Сторожук Петр Григорьевич Быков Илья Михайлович
УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ ПО БИОЛОГИЧЕСКОЙ ХИМИИ ЧАСТЬ 2 Обмен белков, обмен липидов, биохимия крови, печени, мочи, слюны. Основные константы биологических жидкостей человека Типография ГБОУ ВПО КубГМУ Минздравсоцразвития России
350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4
Тел/факс 268-36-84 Отпечатано в типографии методом цифровой печати Подписано в печать 23.05.12 Тираж 700 экз.
106