Файл: Лабораторная работа 2 Определение некоторых хлорорганических пестицидов в воде, продуктах питания, кормах методом хроматографии в тонком слое.docx

Скачать файл
Заказать решение

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 11.12.2023

Просмотров: 61

Скачиваний: 1

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.


Лабораторная работа №2

«Определение некоторых хлорорганических пестицидов в воде, продуктах питания, кормах методом хроматографии в тонком слое»




Цель: научиться определять хлорорганические пестициды.

Задачи:

  1. Определить содержание хлорорганических пестицидов в воде и вине.

  2. Определить содержание хлорорганических пестицидов в овощах и фруктах.

  3. Определить содержание хлорорганических пестицидов в зерне и грибах.

  4. Сделать вывод по содержанию хлорорганических пестицидов в образцах и сравнить с ПДК.

Лабораторное оборудование:

1) вакуумно-ротационный испаритель;

2) аппарат для встряхивания;

3) облучатель УФ-лучами;

4) воронки Бюхнера, ГОСТ 9147–69;

5) воронки химические, диам. 6 см, ГОСТ 86-13–64;

6) камера для хроматографирования, размером 105 x 165 мм, ГОСТ 10565–63;

7) колбы мерные, емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770–74;

8) микропипетки, ГОСТ 1770–74;

9) пипетки емкостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 1770–74;

10) цилиндры мерные емкостью 25, 50, 100, 250, 500 мл, ГОСТ 1770–74;

11) проявляющий раствор ХОП;

12) Н-гексан ч., МРТУ 6-09-2937–66;

13) натрий сернокислый безводный ч., ГОСТ 4166–66;

14) насыщенный раствор натрия сернокислого в серной кислоте;

15) серная кислота, ГОСТ 4204–66;

16) бумажный фильтр «Красная лента»;

17) фильтровальная бумага;

18) эксикатор;

19) пластинки для ТСХ «Силуфол»;

20) нитрат серебра;

21) дистиллированная вода;

22) аммиак 10 %;

23) ацетон;

24) р-р дилора в н-гексане (1000 мкг/мл);

25) р-р кельтана в н-гексане (1000 мкг/мл);

26) р-р трихлорметафос-3 в н-гексане (1000 мкг/мл);

27) проба № 1 «Измельчённые томаты»;

28) проба № 2 «Вода»;

29) проба № 3 «Измельчённые зерновые культуры».

Порядок выполнения работы.

Приготовьте рабочие растворы пестицидов

Задание 1. Приготовьте рабочую смесь дилора и кельтана с содержанием каждого пестицида 50 мкг/мл.

1. Набрать р-р дилора микропипеткой 0,5 мл и слить в пробирку «РС ХОП 50 мкг/мл».

2. Набрать р-р кельтана микропипеткой 0,5 мл и слить в пробирку «РС ХОП 50 мкг/мл».

3. Налить р-р н-гексана в пробирку «РС ХОП 50 мкг/мл» до метки 10 мл.

Задание 2.
Приготовьте рабочую смесь дилора и кельтана с содержанием каждого пестицида 10 мкг/мл.

1. Набрать р-р дилора микропипеткой 0,5 мл и слить в пробирку «РС ХОП 10 мкг/мл».

2. Набрать р-р кельтана микропипеткой 0,5 мл и слить в пробирку «РС ХОП 10 мкг/мл».

3. Налить р-р н-гексана в пробирку «РС ХОП 50 мкг/мл» до метки 50 мл.

Задание 3. Приготовьте рабочую смесь ТХМ-3 с содержанием пестицида 50 мкг/мл.

1. Набрать р-р ТХМ-3 микропипеткой 0,5 мл и слить в пробирку «РС ТХМ-3 50 мкг/мл».

2. Налить р-р н-гексана в пробирку «РС ТХМ-3 50 мкг/мл» до метки 10 мл.

Задание 4. Приготовьте рабочую смесь дилора и кельтана с содержанием пестицида 10 мкг/мл.

1. Набрать р-р ТХМ-3 микропипеткой 0,5 мл и слить в пробирку «РС ТХМ-3 10мкг/мл».

2. Налить р-р н-гексана в пробирку «РС ТХМ-3 10 мкг/мл» до метки 50 мл.

Задание 5. Приготовьте проявляющий раствор для определения ХОП.

1. Взять стекло, лопатку и нитрат серебра, подойти к весам и взвесить.

2. Лопаткой насыпать на стекло 0,5 г нитрата серебра.

3. Взять стекло с нитратом серебра и высыпать в коническую колбу на 100 мл «Проявляющий раствор ХОП».

4. Микропипеткой на 5 мл набрать дистиллированную воду и слить в колбу с нитратом серебра, смыв со стекла остатки. Стекло и пипетку положить на стол.

5. Микропипеткой на 1 мл набрать 0,5 мл аммиака и слить в колбу.

6. Налить в колбу ацетон до отметки 100 мл.

7. Перелить приготовленный раствор в пульверизатор «Проявляющий раствор ХОП».

Определите наличие пестицидов методом ТСХ

Задание 6. Приготовьте экстракт томата (Проба № 1).

1. Поставить на весы пустую чашу и взвесить 20 г истолчённого томата.

2. Пересыпать измельченные томаты в колбу «Проба № 1».

3. Взять мерный стакан и вставить воронку, а затем налить 30 мл гексана.

4. Переместить воронку из мерного стакан в колбу «Проба № 1» и р-р гексана из мерного цилиндра перелить в колбу «Проба № 1».

5. Закрыть колбу крышкой и поставить на аппарат для встряхивания на 15 минут.

6. Остановить аппарат для встряхивания и поставить колбу на стол.

7. Пипеткой на 10 мл набрать верхний слой жидкости и перелить в колбу «Экстракт проба № 1» 10 мл жидкости за 2 набора


8. Повторить п. 4–8 2 раза.

9. В мерный стакан вставить воронку для фильтрования и вложить фильтр «Красная лента».

10. Насыпать в воронку сернокислый натрий Na2SO4 на 2/3 высоты воронки.

11. Раствор из колбы отфильтровать в стакан через воронку.

12. Взять колбу с ротационного испарителя и налить в неё отфильтрованный раствор.

13. Установить колбу обратно на установку ротационного испарителя.

14. Открыть краники подачи и слива воды в холодильник и включить установку: температура 40 °С.

15. По завершении процесса испарения снять колбу и поставить на стол.
Задание 7. Подготовьте камеру для проведения ТСХ

1. Открыть камеру для ТСХ.

2. Листы фильтровальной бумаги вложить в камеру для ТСХ.

3. Налить в камеру для ТСХ н-гексан.

Задание 8. Определите наличие пестицидов методом ТСХ в «Пробе № 1».

1. Микропипеткой набрать экстракт из колбы ротационного испарителя.

2. Микропипеткой нанести пробу на пластинку «Силуфол», чтобы диаметр пятна не превышал 1 см.

3. Микропипеткой набрать диэтиловый эфир и капнуть в колбу с остатком экстракта, встряхнуть колбу вращательным движением

4. Микропипеткой набрать р-р экстракта из колбы и нанести на пятно на пластинке «Силуфол».

5. Микропипеткой набрать стандартный раствор пестицидов и нанести на пластинку слева и справа от капли с пробой.

6. Открыть камеру для ТСХ и установить пластинку «Силуфол».

7. Закрыть камеру для ТСХ.

8. После завершения подъёма диэтилового эфира по пластинке «Силуфол» открыть камеру и достать пластинку «Силуфол».

9. Положить пластинку «Силуфол» на стол и дождаться высыхания.

10. Орошить пластинку проявляющим раствором.

11. Установить пластинку «Силуфол» в облучатель УФ-лучами.

12. Через 15 минут нажать на окуляр облучателя. Измерить размеры пятен на треках и высоту подъема экстракта пробы и стандартных растворов.

13. Определить, какой пестицид (дилор, кельтан, ТХМ-3) присутствует в пробе, методом сравнения пройденного расстояния от линии старта стандартными растворами пестицидов.

14. Определить количество обнаруженного пестицида в пробе методом сравнения площадей пятен пробы и стандартных растворов. Между количеством препарата в пробе и площадью его пятна на пластинке существует прямая пропорциональная зависимость Х (мг/кг или мг/л), ее вычисляют по формуле




где A1 – содержание препарата в стандартном растворе, мкг; S1 – площадь пятна стандартного раствора, мм2; S2 – площадь пятна пробы, мм2; Р – масса или объем исследуемой пробы, г или мл.

Задание 9. Приготовьте экстракт воды (Проба № 2)

1. Налить в мерный цилиндр 200 мл воды.

2. Слить воду в колбу «Проба № 2».

3. Установить в мерный цилиндр воронку и налить 30 мл гексана.

4. Слить в колбу «Проба № 2».

5. Закрыть колбу крышкой и поставить на аппарат для встряхивания на 3 минуты.

6. Остановить аппарат для встряхивания.

7. Пипеткой на 10 мл набрать верхний слой жидкости, слить в колбу «Экстракт проба № 2».

8. Повторить п. 4–7 2 раза.

9. Добавить в колбу «Экстракт проба № 2» 10 г Na2SO4, применив лопатку лабораторную.

10. В мерный стакан установить воронку для фильтрования и вложить фильтр «Красная лента».

11. Насыпать в воронку сернокислый натрий Na2SO4 на 2/3 высоты воронки.

12. Раствор из колбы отфильтровать в стакан через воронку.

13. Взять колбу с ротационного испарителя и налить в неё отфильтрованный раствор

14. Установить колбу обратно на установку ротационного испарителя.

15. Открыть краники подачи и слива воды в холодильник и включить установку: температура 40°С.

16. По завершении процесса испарения снять колбу и поставить на стол.

Задание 10. Определите наличие пестицидов методом ТСХ (аналогично определению «Пробы № 1»).

Определить наличие пестицидов методом ТСХ аналогично определению «Пробы № 1».

Задание 11. Приготовьте экстракт зерна (Проба № 3)

1. Поставить на весы пустую чашу и взвесить 20 г зерна (муки).

2. Пересыпать измельченные зерна в колбу «Проба № 3».

3. В мерный стакан вставить воронку и налить 30 мл гексана.

4. Переместить воронку из мерного стакана в колбу «Проба № 3» и р-р гексана из мерного цилиндра перелить в колбу «Проба № 3».

5. Закрыть колбу крышкой и поставить на аппарат для встряхивания на 15 минут.

6. Остановить аппарат для встряхивания и поставить колбу на стол.

7. Пипеткой на 10 мл набрать верхний слой жидкости и перелить в колбу «Экстракт проба № 3» 10 мл жидкости за 2 набора


8. Повторить п. 4–8 2 раза.

9. В мерный стакан вставить воронку для фильтрования и вложить фильтр «Красная лента».

10. Насыпать в воронку сернокислый натрий Na2SO4 на 2/3 высоты воронки.

11. Раствор из колбы отфильтровать в стакан через воронку.

12. Взять колбу с ротационного испарителя и налить в неё отфильтрованный раствор.

13. Установить колбу обратно на установку ротационного испарителя.

14. Открыть краники подачи и слива воды в холодильник и включить установку: температура 40°С.

15. По завершении процесса испарения снять колбу и поставить на стол.

Задание 12. Определите наличие пестицидов методом ТСХ.

Определить наличие пестицидов методом ТСХ аналогично определению «Пробы № 1».

Обработка результатов исследования.

  1. Определение наличия пестицидов методом ТСХ в «Пробе № 1», экстракте томата.

Согласно МУ 4994-89 «Методические указания по определению в одной пробе фосфорорганических и хлорорганических пестицидов, применяемых на томатах, хроматографическими методами», при проведении анализа наличия пестицидов методом ТСХ Кельтан проявляется на пластинке «Силуфол» в виде пятна с , а Дилор – с , в роли подвижной фазой представлен н-гексан [1]. Следовательно, пятно Кельтана ближе к линии старта, чем пятно Дилора.

На рисунке 1 представлен результат определения наличия пестицидов в «Пробе № 1» методом ТСХ.

2*4 мм 6*6мм 4*3мм 2*6мм 6*8мм



2*2мм 2*6мм 4*8 мм

Рисунок 1 – Пластинка «Силуфол» с результатом определения наличия пестицидов в «Пробе № 1» методом ТСХ

Методом сравнения пройденного расстояния от линии старта стандартными растворами пестицидов было определено, что в пробе присутствуюет пестициды ТХМ-3 и Кельтан.

Определим количество обнаруженного пестицида ТХМ-3 в пробе методом сравнения площадей пятен пробы и стандартных растворов. Между количеством препарата в пробе и площадью его пятна на пластинке существует прямая пропорциональная зависимость Х (мг/кг или мг/л), ее вычисляют по формуле:

Смотрите также файлы