Файл: Инфекционные заболевания бруцеллёз студентка 2 курса 11 группы.rtf

Парвариши фарҳанги Бруцелла дар муҳити муқаррарии ғизоӣ, ки барои парвариши бактерияҳо, ки реаксияи бетараф ё каме сілтӣ доранд (рН 6,8-7,2) муваффақ мешавад. Нашъунамо дар шароити аэробӣ дар ҳарорати 37° ба даст меояд. Баъзе намудҳо ва биотипҳои Бруцелла барои нашъунамои худ, махсусан дар наслҳои аввал, ки аз ҳайвоноти табии бемор ҷудо карда шудаанд, дар ҳавои атмосфера консентратсияи афзояндаи CO2 (5-10%) талаб мекунанд.

Дар муқоиса бо дигар бактерияҳои гетеротрофӣ, Бруцелла нисбат ба маводи ғизоӣ серталабтар аст. Аз ин рӯ, барои ҷудокунии ибтидоӣ ва парвариши минбаъдаи ин бактерияҳо васоити махсуси ғизоӣ тавсия дода мешавад. Бо ин максад воситахои ҷигар ва гӯшт-ҷигар, махсусан бо илова намудани глицерин (2%) ва глюкоза (1%) бомуваффақият истифода мешаванд. Бо муваффақияти бешубҳа, таҳиякардаи N.V. Ploskirev миёна хушк "D", ки дар моҳӣ ва hydrolysates хамиртуруши асос ёфтааст. Ба акидаи муаллиф ва дигар мухаккикон (Н.Н. Островская ва А.А. Голубев, 1958) миёна «Д» нисбат ба мухити гепати баъзе бартарихо дорад. Ҳангоми парвариши Бруцелла дар муҳити картошка (Ҳаддлсон, 1943; В.Е. Корнеева, 1949 ва дигарон) ва дар муҳити Альбимӣ натиҷаҳои хуб ба даст оварда шуданд.

Кумитаи муштараки коршиносони ФАО/ТУТ оид ба бруцеллёз (1970) воситаҳои асосии зеринро барои ҷудокунии аввалия ва субкультураҳои минбаъдаи фарҳангҳои Бруцелла тавсия медиҳад: агар декстрозаи хуноба; агар картошка плюс зардоб; лубиёи триптӣ ва агар триптоза; агар хуни (5% хуни гӯсфанд дар агар миёна асосӣ).

Барои ҷудо кардани культураҳои бруцелла аз маводҳои олудашудаи микрофлораи бегона тавсия дода мешавад, ки пас аз илова кардани антибиотикҳое, ки ба афзоиши Бруцелла халал намерасонанд: полимиксин, бацитрацин, циклогексамид, актидион истифода шаванд.

Муҳити ғизоии омодашударо танҳо дар сурате мувофиқ донистан мумкин аст, ки дар он аксари штаммҳои Бруцелла бо як пошидани хурд (5-10 ҳуҷайраҳои микробҳо) мерӯянд.

Баъзе муҳаққиқон эҳтиёҷоти Бруцелларо ба манбаи нитроген ва омилҳои иловагии афзоиш омӯхтаанд. О.В. Кондратьев ва В.М. Степанов (1968, 1969) ба хулосае омад, ки нашъунамои Бруцелла дар сурати мавчуд будани 6 аминокислота дар мухити зист таъмин карда мешавад: глутамин, L-аланин, лизин, метионин, гистидин, систеин. Муҳимтарин манбаи нитроген, ба ақидаи онҳо, кислотаи глутамин ва систеин мебошанд. Зарурати бруцелла дар комплекси витаминхои В (B1 B2, B6) ва кислотаи никотиниро низ таъкид мекунад. Витамини А барои афзоиши танҳо баъзе штаммҳои Бруцелла лозим аст.

---

Бруцелла бо афзоиши суст, махсусан наслҳои аввали фарҳанг хос аст. Аз ин рӯ, эмкунии маводҳои аз ҳайвоноти табиии сироятшуда гирифташуда бояд то 4-5 ҳафта инкубатсия карда шавад, агар пештар афзоиш наёбад. Дар муҳити дуруст интихобшуда штаммҳои лаборатории Бруцелла дар давоми 24-48 соат ба таври фаровон афзоиш меёбанд.

Ҳангоми коштани бруцелла аз суспензияи ғафси бактерияҳо дар агари ҳамвор қабати нозуки шаффоф бо тобиши равгандор ба вуҷуд меояд, ки тадриҷан дағал шуда, абрнок шуда, камтар шаффоф мешавад ва ранги хокистарӣ бо ранги кабудӣ мегирад. Дар вакти коштани навъи бруцелла кариб хамин гуна тагьирот мушохида карда мешавад.

Дар зироатҳои дар шўрбои, ғафсшавии тадриҷан яксони миёна мушоҳида мешавад. Ҳангоми дар термостат муддати тӯлонӣ мондани культураи шўрбо дар қаъри зарф боришоти фуҷур ва дар рӯи муҳити атроф оҳиста ҳалқаи париеталӣ ё ҳалқа ва плёнка ба вуҷуд меояд.

Вақте ки дар табақчаҳои агар дар зарфҳои Петри кам пошида мешавад, Бруцелла одатан дар шакли колонияҳои мудаввар, барҷаста, каме шаффоф бо канори ҳамвор мерӯяд. Сатхи колонияхо хамвор, равгани равгандор аст. Бо дароз шудани давраи афзоиш колонияҳо камтар шаффоф мешаванд.

Хенру (1933), Хаддлсон (1952), Парнас ва Чодковски (1959), П.Н. Жованик (1972) колонияҳои Бруцелларо зери микроскоп бо равшании паҳлӯӣ омӯхт (техникаи ин таҳқиқот дар боби "Тағйирёбии Бруцелла" оварда шудааст). Дар зери ин равшанӣ маълум шуд, ки фарҳангҳои бруселла дар таркиби ҳуҷайраҳо аксаран гетерогенӣ (гетерогенӣ) мебошанд. Ҳуҷайраҳои шакли S колонияҳои мудаввар ва барҷастаро бо кунҷҳои ҳамвор ташкил медиҳанд. Дар зери равшании паҳлӯ, онҳо сатҳи ҳамвор ё мулоим ва дурахши хокистарӣ-кабуд бо ранги сабз доранд. Дар ин замина маркази хурди сурху зарди колония ба назар мерасад. Дар раванди таѓйирёбии популятсия ба таври стихиявї ба вуљуд омада, њуљайрањои R-, M- ё шакли дигар колонияњоеро ташкил медињанд, ки аз колонияњои шакли S, алалхусус аз рўи хусусияти люминессенсия ба таври љиддї фарќ мекунанд.

Культураи бруцелла хангоми дар хар 30—45 руз такроран коштан дар мухити сахти гизо нагз нигох дошта мешавад. Беҳтар аст, ки ин фарҳангҳоро дар шакли хушк нигоҳ доред. Хангоми хушкондан мухити дар таркибаш 1,5% желатин ва 10% сахароза дар оби софшуда истифода мешавад. Фарҳанги хушкро дар ампулаҳои хуб маҳкамшуда бидуни ҳаво дар ҳарорати 7° нигоҳ доред.

Патогенӣ ва вируснокии Бруцелла.

Бруцелла дар бадани хайвонхои сироятшуда асосан дар дохили хучайрахои системаи ретикулоэндотелиали зиндагй ва зиёд мешавад. Ин барои тасниф кардани онҳо ҳамчун паразитҳои дохилиҳуҷайравӣ асос медиҳад, гарчанде ки баъзан онҳо метавонанд берун аз ҳуҷайра пайдо шаванд. Бруцеллаҳо ба бадани ҳайвон ворид шуда, одатан дар бофтаҳои лимфоидӣ ҷойгир шуда, дар шакли пролифератҳои ретикулоэндотелиалӣ ва фокусҳои некробиотикӣ тағйироти патоморфологиро ба вуҷуд меоранд. Ин тағйироти патологӣ аз дараҷаи вирулентии фарҳанги додашуда вобаста аст.

---

Вирулентнокии ҳар як штамми фарҳанги Бруцелла моликияти инфиродии он ва то андозае ифодаи миқдории патогенӣ мебошад. Он одатан бо арзиши ҳадди ақали вояи сироятӣ (ID) чен карда мешавад, ки қодир ба ҳама ё аксари ҳайвоноти таҷрибавӣ сироят мекунад.

Ҳам дар байни лабораторӣ ва ҳам дар байни фарҳангҳои нав ҷудошудаи Бруцелла штаммҳои дорои дараҷаҳои вирулентӣ хеле гуногунро пайдо кардан мумкин аст. Дар таҷрибаҳо дар хукҳои гвинея, штаммҳои хеле вируленти ҳар се намуди классикии Бруцелла боиси инкишофи сирояти умумӣ мешаванд, ки аллакай дар миқдори 5-10 ҷисми микробҳо (б.т.) мешаванд. Мувофиқи маълумоти бисёре аз муаллифон ва натиҷаҳои таҳқиқоти худи мо, инкишофи сирояти умумӣ пас аз чунин сироят одатан дар давоми 4-5 ҳафта рух медиҳад.

Барои бисёр штаммҳои вирусии Бруцелла як ИД 25-50 bw ва баъзан бештар аст. Штаммҳои заиф ва авируленти Бруцелла мавҷуданд. Фарҳангҳои чунин штаммҳо дар ҳайвонот хуб реша намегиранд.

Муҳаққиқон ҳадди ақали вояи сироятии Бруцелларо дар таҷрибаҳо дар ҳайвоноти хоҷагӣ муайян карданд. Хаддлсон (1943) аз таҷрибаҳои МакЭвен ва дигарон ва Хатчинг истинод мекунад, ки дар он муҳаққиқон говҳои бордоршударо ба сирояти конъюнктивӣ бо вояи гуногуни фарҳанги Br гирифтор кардаанд. исқоти ҳамл.

Хаддлсон таъкид мекунад, ки барои говҳои ҳассосияти миёна ҳадди ақали вояи сироятии Br. abortus тақрибан 1 миллион бактерия (м. т.) буд ва дар таҷрибаҳои Хатчинг миқдори хеле камтар ва дар як муддати кӯтоҳ боиси аввалин далели сироят дар шакли санҷиши агглютинатсияи мусбӣ гардид. Вакте ки гусфандон ба таври пустй бо маданияти хеле заҳролуд Br. исқоти ҳамл, вояи 5-25 ҳазор Бруцелла танҳо сирояти минтақавиро ба вуҷуд овард (П.А. Вершилова, 1961). Инкишофи сирояти умумӣ мунтазам пас аз ворид кардани чунин фарҳанг дар вояи 100 ҳазор ҳуҷайраҳои микробҳо ба даст оварда мешуд. Ҳангоми ба конъюнктива ё луобпардаи маҳин ба миқдори камаш 1-500 миллион Бруцелла пошидан, сирояти мунтазами гӯсфандон мушоҳида карда мешавад.

Дар Бруцелла аксар вақт коҳиши стихиявии вирусӣ мушоҳида мешавад. Ин метавонад аз сабаби гуногунии аҳолии фарҳанг бошад. Ҳуҷайраҳои тағирёфтае, ки дар фарҳанги штамм пайдо мешаванд, бинобар бартарии хоси интихобии худ, тадриҷан шумораашон зиёд шуда, дар популяцияи ҳуҷайра бартарӣ пайдо карда, ба фарҳанг хосиятҳои нави тағирёфтаро медиҳад. Вирулентсияи заифро боз зиёд кардан мумкин аст. Барои ин, бо истифода аз амали қонуни интихоби табиӣ, фарҳангҳо тавассути бадани хукҳои гвинея ба бруцеллёз ҳассос ё дигар ҳайвоноти ба сирояти бруцеллез ҳассос чанд маротиба гузаронида мешаванд.

---

Дар шароити муқоисашавандаи таҷрибавӣ дар хукҳои гвинея, Бр. abortus ва Br. melitensis (П. Ф. Здродовский ва П. В. Воскресенский, 1930), инчунин Бр. Abortus ва Br. suis (Hardy et al., 1931) бо мақсади муайян кардани фарқияти патогенӣ дар намудҳои гуногуни Бруцелла. Натиљањои тањќиќот мухолиф буданд, аз ин рў, ин ё он навъи Бруцелларо барои хукњои гвинейї аз њама патогенї муайян кардан имкон надошт.

Кӯшишҳо барои баҳодиҳии вирулентии Бруцелла аз рӯи фаъолияти ферментативӣ ва хусусиятҳои метаболикии онҳо анҷом дода шуданд. Хаддлсон (1943) фаъолияти ферментҳои каталазаро дар ҳар се намуди классикии Бруцелла омӯхта, чунин мешуморад, ки дараҷаи баланди вирулентӣ ба фаъолияти баланди каталази штамм мувофиқат мекунад. Э.А. Драновская (1968) қайд мекунад, ки штаммҳои заиф вируленти Бр. abortus ва Br. melitensis аз штаммҳои вирусӣ бо фаъолияти баландтари баъзе системаҳои дегидрогеназа, ки дар мубодилаи энергия иштирок мекунанд, фарқ мекард.

Сохтори антигении Бруцелла.

Сирояти табии ба бруцеллёз, инчунин ба таври сунъй ворид намудани культураи бруцелла, одатан бо пайдоиши антителохои махсус дар бадани хайвон мушохида мешавад. Ин падида кайҳо боз барои ташхиси беморӣ ва дифференсиатсияи серологии намудҳо ва навъҳои гуногуни Бруцелла истифода мешуд.

Ҳанӯз дар соли 1932 Вилсон ва Майлз муайян карда буданд, ки ҳуҷайраҳои ҳар се намуди классикии Бруцелла, ки дар шакли муқаррарии ҳамвор S мебошанд, дорои ду антигенҳои аз ҷиҳати серологӣ фарқкунандаи А ва М мебошанд ва ҳар яке аз ин антигенҳо дар намудҳои гуногуни Бруцелла мавҷуд аст. маблағи нобаробар .. Чанде пас, Майлз (1939) фаҳмонд, ки Бр. melitensis, таносуби миқдорӣ байни антигенҳои А ва Мро тақрибан ҳамчун таносуби 1: 20 ифода кардан мумкин аст, дар ҳоле ки дар Br. abortus ва Br. suis - мисли 20:

1. Ин кашфиёт барои истифодаи зардобҳои адсорбшуда ҳангоми тасниф кардани фарҳанги омӯхташудаи Бруцелла ё ҳамчун Br. melitensis, ё ба як гурӯҳи ду намуди дигар. Ҳуҷайраҳои Br. suis нисбат ба ҳуҷайраҳои Br каме зиёдтар антигени M доранд. исқоти ҳамл. Аммо ин фарқият он қадар муҳим нест, ки он метавонад барои дифференсиатсияи серологии ин навъҳои Бруцелла истифода шавад. Минбаъд фактхо торафт бештар чамъ шуданд, ки гувохй медиханд, ки тафовути калони микдори дар таркиби антигенхои А ва М на танхо дар культурахои мансуб ба намудхои гуногун, балки дар штаммхои гуногуни як намуд низ мушохида мешавад. Ҳодисаҳои торафт зуд-зуд ошкор шудани вариантҳои серологӣ дар дохили ин ё он намуди Бруцелла истифодаи усули азхудкунии агглютининро бо мақсади дифференсиатсияи байнинамудҳои серологии ин бактерияҳо хеле душвортар мегардонд. Натичаи чунин тафовут хеле шартй ва нисбй буд (П. Ф. Здродовский, 1953). Дар ниҳоят, ҳамаи ин ба эътирофи он оварда расонд, ки тафриқаи Бруцелла барои РА бо зардоби якхела танҳо дар муайян кардани биотипҳо дар дохили ҳар се намуди классикии Бруцелла муҳим аст.

---

Бо истифода аз усулҳои гуногуни истихроҷ комплекси липоид-полисахарид-протеинро аз фарҳанги бруселла ҷудо кардан мумкин аст, ки хосиятҳои хоси антигенӣ ва заҳрнок дорад. Ҳангоми омӯзиши ин комплекси антигенӣ бо усули боришоти гелӣ маълум шуд, ки бо зардоби гомологӣ то 6 хатти боришот медиҳад. Ба ибораи дигар, дар иқтибосҳои Бруцелла бо истифода аз реаксияи боришоти гел то 6 антигенҳои гуногунро муайян кардан мумкин аст. Усули иммуноэлектрофорез имкон медиҳад, ки миқдори хеле зиёди ҷузъҳои антигенӣ дар Бруцелла муайян карда шавад.

Бо истифода аз усули боришоти гелӣ инчунин нишон дода шуд, ки Бруцелла дорои антигенҳои рӯизаминӣ ва чуқур мебошад.

И.И. Дубровская (1950-1968) мукаррар намуд, ки комплексхои антигени дар Бруцелла аз ду антиген иборатанд. Яке аз онҳо антигени навъи Бойвин мебошад, ки дар таркибаш полисахаридҳо, липидҳо ва сафедаҳо мавҷуд аст ва дигаре, ки ба истилоҳ ҷузъи чорум низ полисахариди мушаххас дорад, аммо хусусияти дигар, моддаи сафеда ва кислотаи дезоксирибонуклеин дорад. Дар навъҳои гуногуни Бруцелла, ин антигенҳо ба миқдори нобаробар мавҷуданд. Баръакси тамоми комплекси антигенӣ, ҷузъи чоруми он, ки фаъолияти серологӣ ва хосиятҳои аллергенӣ нишон медиҳад, заҳрнок нест.
Омӯзиши фарҳангҳои Brucella S- ва R-forms, I.I. Дубровская муайян кард, ки таркиби химиявии комплексхои антигении онхо тамоман дигар аст. Моддаҳои антигении R-культураҳо дорои сафедаи кам буданд ва ҷузъи ДНК надоранд. Комплекси антигении маданияти К-шакли бруцелла аз антигенхои маданияти S бо таркиби сифатии полисахаридхо фарк мекард.

Дар реаксияи боришоти гелӣ, антигенҳои шакли R нисбат ба антигенҳои шакли S ба таври назаррас камтар фаъолият нишон доданд ва танҳо як хатти боришотро бо зардоби гомологӣ доданд.

Шаклхои нохамвори хамаи намудхои Бруцелла барои онхо як антигени умумии К- доранд ва дорои антигенхои мушаххаси А ва М нестанд. Онхоро бо усули серологи фарк кардан мумкин нест (Лембке ва Кернлейн, 1950).

Зинда мондани Бруцелла дар муҳити зист ва маҳсулоти чорво.

Маълумоти адабиёт дар бораи зинда мондани бруселла дар объектҳои гуногуни муҳити зист гуногунанд. Дар тачрибахо 3. А. Кучеренко (1934) дар кабатхои руизаминии хок бруцелла то 40 руз, дар чукурии 5—8 см то 60 ва дар хоки пору пошида то 100 руз кобили хаёт нигох медошт. Ба гуфтаи М.Э. Авакумов (1934), бруцелла дар хок ва пору дар ҳарорати паст то 4,5 моҳ зинда мемонд. П.А. Вершилов ва А. Голубева (1972) нишон медиҳад, ки дар тобистон Бруцелла дар хок 3 моҳ ва дар зимистон то 4,5 моҳ, дар тудаҳои пору дар ҳарорати аз 50 - 67 ° - 25 рӯз ва муддати дарозтар дар хок қобили ҳаёт боқӣ мемонад. харорат 37—42°.

---