Файл: Отчет защищен с оценкой 07 августа 2021 г Руководитель образовательной программы.docx

День седьмой
Дата	20.07.2020
День недели	Вторник
Содержание работы (описание процесса)	Приготовление специальной среды для культивирования стволовых клеток (двукратный раствор DMEM – F-12): в 800 мл деионизированной воды разводим: 10г сухого реактива DMEM, 12.07г сухого реактива F-12, 4.9г NaHCO3, 3.5г глюкозы. Титруем полученный раствор до pH=7 (титр-HCl) Доводим объем до 1л фильтруем (стерилизуем) полученный раствор в вакуумном аппарате.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

День восьмой
Дата	21.07.2020
День недели	Среда
Содержание работы (описание процесса)	Принцип работы с лабораторными животными. Этические комитеты. Эвтаназия.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

День девятый
Дата	22.07.2020
День недели	Четверг
Содержание работы (описание процесса)	Проведение эвтаназии лабораторной мыши с помощью диэтилового эфира. Препарирование умерщвленной лабораторной мыши, взятие биопсийного материала для дальнейшего изучения гистологического препарата (мозжечок), а также образцов крови и мышц для изучения метода разделения белков – электрофореза. фиксация мозжечка в 4% растворе PBS-PFA. Промывка биопсийного материала растовором двукратного PBS 3 раза по 30 минут; Дегидратация будущего гистологического препарата в растворах С2Н5ОН разных концентраций: 50% - 30 минут, 60% - 30 минут, 70% - 30 минут, 80% - 30 минут, 90% - 30 минут, 95% - 30 минут; Вымачивание в растворах этанол:изопропанол: 3:1 (30 минут), 1:3 (30 минут); Вымачивание в растворе изпоропанола в парафине всю ночь.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

---

День десятый
Дата	23.07.2020
День недели	Пятница
Содержание работы (описание процесса)	Уплотнение материала в парафине: помещение аутопсийного материала в расплавленный парафин 1 на 2 часа при температуре 60°С перемещение препарата в расплавленный парафин 2 на 2 часа при температуре 60°С Приготовление парафиновых блоков: Заливание парафина в форму Помещение препарата в форму Изъятие парафина с препаратом внутри из формы, помещение на пластмассовый блок.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

День одиннадцатый
Дата	26.07.2020
День недели	Понедельник
Содержание работы (описание процесса)	Изучение метода Электрофореза по Леммли.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

День двенадцатый
Дата	27.07.2020
День недели	Вторник
Содержание работы (описание процесса)	Приготовление гелей для электрофореза: концентрирующий: 0,5 M трис-HCl, pH6,7 (1.25 мл) 30% АА-МБА (0.75 мл) 0,1 M ЭДТА (0.1 мл) 50% глицерин (0.5 мл) 10% ДСН (0.05 мл) Довести объем водой (до 4.5 мл) Разделяющий: 1,5 M трис-HCl, pH8,9 (5 мл) 30% АА-МБА (6 мл) 0,1 M ЭДТА (0.4 мл) 50% глицерин (2 мл) 10% ДСН (0.2 мл) Довести объем водой (5.4 мл)
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

---

День тринадцатый
Дата	28.08.2020
День недели	Среда
Содержание работы (описание процесса)	Сборка установки для электрофореза: скрепляем специальные стекла между собой, чтобы получить герметичную пластину, в которую будем заливать гели: сначала разделяющий гель (в раствор, что мы приготовили в прошлый день, добавили полимеризующее вещество). Для того, чтобы поверхность была ровная, мы приливаем 1 мл 5% раствора бутилового спирта, изменяющего коэффициент поверхностного натяжения. Когда гель застынет, излишек спирта убираем фильтровальной бумагой. Добавляем концентрирующий гель и накрываем гребнем. после застывания геля гребень вынимаем. Пластины с гелем устанавливают в держатель для геля. Держатель устанавливается в установку для электрофореза. Приготовление белков плазмы крови и мышц к электрофорезу: С помощью спектрофотометра с длиной оптической длины 10нм и длиной волны 280нм, доводим образцы до плотности примерно равной 2мг/мл (кровь разводили 1:13.5 мышцы 1:4) К белковым растворам доливаем SDS с красителем бромфеноловый синий и 5% меркартоэтанол в соотношении 1:1 (100 мкл буфера к 100 мкл пробы) В пространство между двумя гелями заливаем до краев раствор Running Buffer (общий объем 500мл) смешанный с SDS (общий объем 5мл). Оставшийся раствор вливаем в установку, в которой вставлены наши пластины. В ячейки концентрирующего геля вносим по 10мкл: В крайние - стандарт (итого 4 ячейки) Между стандартами на одной стороне только белки мышц На другой – белки плазмы крови Подключаем к прибору для электрофореза и включаем на 22 мА. ждем примерно 1.5 часа. Затем достаем наши пластинки, фиксируем в 7% уксусной кислоте и окрашиваем белки красителем Кумасси.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

День четырнадцатый
Дата	29.08.2020
День недели	Четверг
Содержание работы (описание процесса)	Промывка геля «быстрым» способом (заливаем кипяток и ставим на мешалку на 10 минут. Повторяем до прозрачности геля) и анализ результата электрофореза по Лэммли.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

---

День шестнадцатый
Дата	30.08.2020
День недели	Пятница
Содержание работы (описание процесса)	Приготовление гистологических срезов на микротоме с одноразовыми ножами, перенос среза на предметное стекло, сушка на гистологическом столике.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

День семнадцатый
Дата	2.08.2020
День недели	Понедельник
Содержание работы (описание процесса)	Гидратация парафиновых срезов в батареи спиртов.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

День восемнадцатый
Дата	3.08.2020
День недели	вторник
Содержание работы (описание процесса)	Окрашивание парафиновых срезов Антителами I (специфичны на актин-бетатубулин) и антителами II, а так же окрашивание ядер красителем DAPI.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

День девятнадцатый
Дата	4.08.2020
День недели	среда
Содержание работы (описание процесса)	Анализ гистологического препарата методом флуоресцентной микроскопии. Получение микрофотографий препаратов.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

---

День двадцатый
Дата	5.08.2020
День недели	четверг
Содержание работы (описание процесса)	Работа с индивидуальным заданием. Анализ научной литературы.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

День двадцать первый
Дата	6.08.2020
День недели	Пятница
Содержание работы (описание процесса)	Оформление отчета по практике. Подготовка к защите отчета. Консультация перед защитой.
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

День защиты отчета
Дата	7.07.2020
День недели	Суббота
Содержание работы (описание процесса)	Сдача и защита отчетов и дневников перед руководителями практики. Подведены итоги практики по получению первичных профессиональных умений и навыков, в том числе первичных умений и навыков научно-исследовательской деятельности (биологической).
Соответствие графику
Оценка
Подпись руководителя практики

3. Результаты защиты отчета

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Отчет защищен «____» _______________________ 20___ г.

С оценкой ____________________
Руководитель ОП «Медицинская биохимия» _________________ Т.В. Момот

---