ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 10.02.2025
Просмотров: 1456
Скачиваний: 3
СОДЕРЖАНИЕ
2 Общие указания к методике выполнения и защиты лабораторных работ…...… 5
6.1 Количественное определение общего азота по методу Къельдаля.………..29
6.2 Определение различных форм азота в молоке и сыре………………………34
6.3 Определение белка в молоке по Лоури……………………………………….38
2 Общие указания к методике выполнения и защиты лабораторных работ
3 Аминокислоты, пептиды и белки
3.1 Протеиногенные аминокислоты
3.3 Биологическое значение аминокислот
5 Физико-химические свойства белков
5.1 Определение изоэлектрической точки белков
5.2 Высаливание белков сульфатом аммония
5.3 Необратимое осаждение белков
5.3.1 Осаждение белков органическими веществами
3.3.2 Денатурация белков при нагревании
5.3.3 Осаждение белков концентрированными минеральными
5.3.4 Осаждение белков органическими кислотами
5.3.5 Осаждение белков солями тяжелых металлов
5.4 Разделение и очистка белков методом диализа
6 Методы определения азота в биологических объектах
6.1 Количественное определение общего азота по методу Къельдаля
6.2 Определение различных форм азота в молоке и сыре
Нерастворимые в воде азотистые Растворимые в воде азотистые
6.2.1 Метод определения общего количества азота в сыре
6.2.2 Метод определения общего количества растворимого азота
6.2.3 Метод определения азотосодержащих небелковых соединений
6.2.4 Метод определения аминного азота (пептиды, аминокислоты, амиды, аммиак)
6.3 Определение белка в молоке по Лоури
20 40 60 80 100 120 140 С10-6, г/мл
7 Определение влажности весовым методом
7.1 Метод высушивания до постоянной массы
7.2 Определение влажности ускоренным методом высушивания
7.3 Определение влажности экспрессным методом высушивания
8 Список используемых источников
- положением аминогруппы, например:
CН2 -CН2 –СООН CН2 -CН2 -CН2–СООН
NН2 NН2
- аминопропионовая кислота - аминомасляная кислота
(- аланин)
Таблица 1Аминокислоты, постоянно встречающиеся в составе белков
|
|
Аминокислота (эмпирическое и рациональ-ное название) |
Формула NН2 R-СН-СООН |
Сокращенное название рус/лат |
|
1 |
Глицин - аминоуксусная кислота |
NН2 Н -СН-СООН |
Гли/Gly |
|
2 |
Аланин -аминопропионовая кислота |
NН2 Н3С- СН-СООН
|
Ала/Аla |
|
3 |
Валин -аминоизовалериановая кислота |
NН2 Н3С-СН- СН-СООН СН3 |
Вал/Val |
|
4 |
Лейцин -аминоизокапроновая кис-лота |
NН2 Н3С-СН-СН2-СН-СООН СН3 |
Лей/Leu |
|
5 |
Изолейцин (-амино--этил--метил- пропионовая кислота) |
NН2 Н3С-СН2-СН -СН-СООН СН3 |
Иле/Ile |
|
6 |
Серин (-амино--оксипропионо-вая кислота) |
NН2 НО-СН2 -СН-СООН |
Сер/Ser |
|
7 |
Треонин (-амино--оксимасляная кислота |
NН2 Н3С-СН-СН-СООН ОН |
Тре/Thr |
|
8 |
Цистеин (-амино--меркаптопропи-оновая кислота) |
NН2 НS-CН2 -СН-СООН |
Цис/Cys |
|
9 |
Метионин (-амино--метилтиомасля-ная кислота |
NН2 Н3С-S-СН2-СН2 -СН-СООН |
Мет/Met |
|
10 |
Лизин (--диаминокапроновая кислота) |
NН2 Н2N- СН2 -СН2-СН2-СН2 -СН-СООН |
Лиз/Lys |
|
Продолжение таблицы 1 |
|||
|
11 |
Аргинин (-амино-блуанидил-п-вале-риановая кислота) |
NН NН2 Н2N-C-NН-СН2-СН2 -СН-СООН
|
Арг/Arg |
|
|
Гистидин (-амино--имидазолпро-пионовая кислота) |
-СН2 -СН-СООН N N-Н NН2
|
Гис/His |
|
13 |
Аспарагиновая кислота, аспартат (-аминоянтарная кислота) |
NН2 НООС-СН2 -СН-СООН |
Асп/Asp |
|
14 |
Глутаминовая кислота, глутамат (-аминоглутаровая кислота |
NН2 НООС-СН2 -СН2-СН-СООН |
Глу/Glu |
|
|
Фенилаланин (-амино--фенил-пропи-оновая кислота) |
NН2 -СН2-СН-СООН |
Фен/Phe |
|
|
Тирозин (-амино--(п-гидроксифенил)пропионовая кислота) |
NН2 НО- -СН2-СН-СООН |
Тир/Tyr |
|
|
Триптофан (-амино--индолилпро- пионовая кислота) |
СН2-СН-СООН NН2 N Н |
Трп/Trp |
|
|
Пролин (пирролидин--карбоновая кислота) |
СООН NH |
Про/Pro |
|
19 |
Аспарагин |
О NН2 NН2-С-СН2-СН-СООН |
Асн/Asn |
|
20 |
Глутамин |
О NН2 NН2-С-СН2-СН2-СН-СООН |
Глн/Gln |
В молекуле всех природных аминокислот (за исключением глицина), в - положении, все четыре валентные связи заняты различными заместителями, такой атом углерода является асимметрическим, и получил название хирального атома. В следствии этого растворы аминокислот обладают оптической активностью – вращают плоскость плоскополяризованного света. Причем при прохождении через них поляризованного луча происходит вращение плоскости поляризации либо в право (+), либо влево (-). По расположению атомов и атомных группировок в пространстве относительно асимметрического атома различают L –и D- изомеры аминокислот. Знак и величина оптического вращения зависит от природы боковой цепи аминокислот (R – группы).
В составе белков обнаруживаются только L- изомеры аминокислот. D- формы аминокислот в природе встречаются редко.
Кроме указанных выше 20 аминокислот в составе некоторых белков обнаружены, так называемые, модифицированные аминокислоты, например цистин:
СН2-СН-СООН
S NН2 -часто встречается в белке (клейковине) злаков
S – СН-СООН
NН2
О
Н
СН2-СН-(СН2)2-СН-СООН



-
СООН NН2
ОН NН2
NН
Оксиприлон Оксилизин
Эти две аминокислоты содержатся в белке соединительной ткани – коллагене.
НООС-СН-СН2-СН-СООН - входит в состав протромбина (белок сверты-
вания крови
НООС NН2
- карбоксиглутаминовая кислота
СН2-СН-СООН - входит в состав фермента – глутатион-
пероксидаза, в котором S (сера) заме-
НSе NН2 нена Sе (селеном)
Селеноцистеин
Эти аминокислоты образуются после завершения синтеза белка в рибосоме клеток путем посттрансляционной химической модификации.
3.2 Классификация аминокислот
В зависимости от строения и свойств радикала аминокислот их можно классифицировать следующим образом:
1) По строению радикалов
2) По полярности радикалов
Таблица 2- Классификация аминокислот по строению радикалов
|
Ациклические |
Циклические |
|||
|
Моноаминомонокарбоновые |
Моноаминодикарбоновые |
Диаминомонокарбоновые |
Гомоциклические |
Гетероциклические |
|
Глицин (Гли) |
Аспарагиновая кислота (Асп) |
Лизин (Лиз) |
Фенилаланин (Фен) |
Триптофан (Трп) |
|
Аланин (Ала) |
|
Аргинин (Арг) |
|
|
|
Валин (Вал) |
|
|
Тирозин (Тир) |
Гистидин (Гис) |
|
Лейцин (Лей) |
Глутаминовая кислота (Глу) |
|
|
|
|
Изолейцин (Иле) |
|
|
|
Пролин (Про) |
|
Серин (Сер) |
|
|
|
|
|
Цистеин (Цис) |
Глутамин (Глн) |
|
|
|
|
Метионин (Мет) |
Аспарагин (Асн) |
|
|
|
|
Треонин (Тре) |
|
|
|
|
Присутствие в структуре аминокислот ионогенных групп, карбоксильной и аминной, определяет их кислотно-основные свойства. В нейтральных растворах и кристаллах аминокислоты существуют в форме биполярных ионов – цвиттер – ионов:
R- СН – СОО
NН3+
В зависимости от рН среды аминокислоты могут быть в форме анионов, катионов, электронейтральных биполярных ионов или в виде смеси этих форм с доминированием одной из них.
В сильнокислых растворах аминокислоты присутствуют в виде положительных ионов, а в щелочных – в виде отрицательных ионов, т.е аминокислоты – это амфотерные соединения:
NН3+ NН2
R-С-СОО + ОН R – C - СОО + Н2О
Н Н
NН3+ NН3+
R-С-СОО + Н+ R – C - СООН
Н Н
Помимо вклада - амино и - карбоксильной групп в общий заряд молекулы аминокислоты может вносить еще и третья ионогенная группа, присутствующая в радикале некоторых аминокислот.
Таблица 3 - Классификация аминокислот по полярности радикалов
-
Полярные гидрофильные
Неполярные гидрофобные
Заряженные
Незаряженные
Асп
Гли
Ала
Глу
Сер
Вал
Лиз
Асн
Мет
Арг
Глн
Лей
Гис
Иле
Цис
Фен
Тир
Три
Про




12
15
16










17




18