Файл: 005 lec bio.pdf

Ферменты: неконкурентное ингибирование

41

Абзимы

42

Недостатки абзимов

43

Применение ферментов

44

Ферментативный анализ

45

Инженерная

энзимология

46

Получение ферментных препаратов

Название ферментных препаратов складывается из сокращенного названия основного фермента и видового названия микроорганизмапродуцента. Например, препарат, содержащий в своей основе амилолитические ферменты и полученный при помощи культуры Aspergillus oryzae, называется амилоризин. В названии препарата указывается также способ культивирования и степень концентрирования и очистки:

Aspergillus oryzae

I – название основного фермента;

II – название микроорганизма-продуцента; III – окончание;

IV – способ культивирования: "П" – поверхностный, "Г" – глубинный; V – степень очистки (концентрирования)

47

Степень концентрирования и очистки

ФП имеют разную степень концентрирования и очистки: х, 3х, 3х-Ф, 10х, 20х, 25х.

Гх: неочищенная культурная жидкость.

Г3х: имеют ферментативную активность в 3 раза выше, чем Гх. Получены путем распылительной сушки концентрированной культуральной жидкости. Концентрируют вакуум-выпариванием при 30˚С с добавлением стабилизаторов (NaCl). Это тоже "грязные" ФП

(1010 спор/г).

Г3х-Ф: культуральную жидкость фильтруют, концентрируют, сушат. Это частично очищенные ФП, так как удалена биомасса, активность выше, чем у Г3х.

Г10х: обрабатывают коагулянтами культуральную жидкость, фильтруют, концентрируют, осаждают ферменты органическими растворителями, ферментный осадок отделяют от жидкой фазы и высушивают.

Г20х: для получения используют ультрафильтрацию, остальное -- как в Г10х.

Пх: получают высушиванием культуры грибов, "грязные", аналогичны Г3х.

П10х, П25х: водная экстракция ферментов, отделение экстракта; осаждение органических соединений; отделение осадка в Н2О,

добавление стабилизатора и наполнителя, сушка.

48

Поверхностный способ производства ферментов

49

Глубинный способ производства ферментов

50

Технологическая схема получения глубинного посевного материала

51

Рост мицелия, образование α-амилазы и потребление субстрата в глубинной культуре A. oryzae

1 – α-амилаза;

2 – мицелий;

3 – сухие вещества среды

52

Схема получения препаратов неочищенных ферментов (препаратов с индексами П2Х, Г2Х, П3Х, Г3Х)

53

Схема получения препаратов с индексом П10Х

54

Схема получения препаратов с индексом Г10Х

55

Схема получения кристаллического препарата α-

амилазы A. oryzae

56

Принципиальная схема

57