Файл: Биологическое значение образования спор и капсул, методы их.pdf

6

пемтидогликанового  слоя  клеточной  стенки, 

Ц П М   и  цитоплазматического 

содержимого.

Протоплазматический 

цилиндр 

обвививается 

пучком 

нитчатых 

структур 

аксиальных  фибрилл.  Число  их  колеблется  от  2  до  100.  Один 

конец 

каждой 

аксиальной 

фибриллы 

прикреплен 

вблизи 

полюса 

протоплазматического  цилиндра,  другой  конец  свободный.  Клетка содержи! 
по  два  набора  фибрилл,  прикрепленных  Субполярно  у  каждого  клеточною 
конца. Так  как каждая  аксиальная  фибрилла тянется вдоль почти всей клетки 

пучки  фибрилл,  прикрепленных  у  разных  полюсов,  в  центральной  части 

перекрываются.

Методика  приготовления  препарата «висячая  капля».

Выращивают  молодую  12-16-часовую  бульонную  культуру  изучаемых 

бактерий,  смазывают  вазелином  края  лунки  на  специальном  предметном 
стекле,  наносят  каплю  взвеси  в  центр  покровного  стекла.  Предметное стекло 
с лункой  переворачивают и  накладывают на покровное стекло так, чтобы оно 
прилипло,  а  капля  оказалась  в  центре  лунки.  Затем  его  осторожно  еще  раз 
перевертывают  покровным  стеклом  вверх,  чтобы  капля  висела  в  центре 
герметично  закрытой лунки.  Под 8-кратным объективом  находят край капли, 

в  этом  состоянии  фиксируют  предметное  стекло  клеммами  и  меняют 
объектив  на 40-кратный, а затем  и  на 90-кратный.  Коэффициент преломления 

(КП)  тела  микробной  клетки  незначительно  отличается  от  КП  окружающей 
среды,  поэтому для  более  контрастного  изображения  объекта надо затемнить 
поле зрения,  прикрыв диафрагму  и

опустив  конденсор  на  оптимальную  высоту.  Подвижность  хорошо 

видна уже  при  400-кратном  увеличении.  При  активном  движении  бактерии с 
помощью  жгутиков  меняют  место  положения  и  пересекают  все  поле  зрения. 

Старая  по  возрасту  культура  малоподвижна,  при  внимательном  изучении 

можно  заметить  активность  только  некоторых  ее  клеток  (не  путать  о 

броуновским  движением,  когда  бактерии  совершают  просто  колебательные 

движения).

Для  приготовления  препарата  «раздавленная  капля»  центр  ооычного 

предметного  стекла  наносят  каплю  исследуемой  культуры  и  накрывают 
покровным  стеклом,  при  этом  необходимо  рассчитать  объем  капли  так, 

чтобы она  не  вытекала за края  покровного стекла.  Микроскопию  проводят  по 

обычной  методике,  но  прикрыв диафрагму  и спустив  конденсор.

Имеются 

и 

прямые 

методы 

обнаружения 

жгутиков. 

Напри 

мер,  метод  серебрения  по  Морозову  для  обнаружения  жгутиков  основан  на 

искусственном  увеличении  размеров  жгутиков  за  счет  наслоения  на  них

7

аммиачного серебря  Ко ярем* минросштии

H I   « С

1

ТОМ

нм 

h im

  M tfH n w iM r  Гц«гг|Н(Н  с л

О к ,» ., 

ь м г i n n v r n H t iN U M '  м н к ,н н ,,„  аИИКМИ.  н f w p

К   » I K

1

l < № \ V n « W l M

4

  Г ч н л г р н 'м  

МИК<АИГГ«>ИИ  ,>г< р . у ж и

НМЛ 

Н 

ле пр ы . 

К 

п р и р о д *  

т м * «  

и м с в т *  

. 

м ^ * * , » *  

м к   я о п т у с т о й ч и в м е   м и к о б а к т е р и и  

Х и м и ч е с к а я   с т р у г ? > р я   ю т о *  

, w « o *  

Ф > п т а  

б а к т е р и й  

о т л и ч а е т е *  

с о д е р ж а н и е м  

ш я ч к т с л ь т м  

ю а и с т  

ж м р с в о с к о в ы х   в е щ е с т в ,  л и п и д о в ,  с т е а р и н о в ы х   к и с л о т   (д о  

40%>.  и  ту гиту 

ои* 

у с т о й ч и в ы  

к 

к и с л о т а м ,  с п и р т а м ,  щ е л о ч а м  

и 

п л о х о   в о с п р и н и м а ю т   е р е ся м  

ш т о р м е   п р и   о к р а ш и в а н и и   п р и х о д и т е *  

подогревать  Окрашенные 

Л а г т е р и и  

у с т о й ч и в ы   к  о б е с ц в е ч и в а н и ю

Наиболее  распространенным  методом  окраски  кислотоустойчивы* 

бактерий  являете*  метол  Циля  Нильсена.

М е то д   Ц и л я   -   Н и л ьсен а

1.  Подготовить стекло.

2.  Нанести  мазок.
3.  Подсушить.
4.  Зафиксировать в  пламени горелки.
5.  На  препарат  положить  небольшой листочек фильтровальной бумаги, 

напить  на  нес фуксин  Циля.  Нагреть  в  пламени  горелки до появления  паров  и 

оставить  на  5  мин.  можно  подогреть  в  это  время  1-2  paw.  Затем  бумажку 
убрать

6.  Обработать  5°о-ным  раствором  серной  кислоты 

10 сек.

7  Промыть водой.

8.  Окрасить  метиленовой синькой Леффлера 3-5  мин.

9.  Промыть водой.

10  Просушить фильтровальной бумагой.
11 .Микроскопировать.

Микроскопическая картина:

кислотоустойчивые баы ерии 

красные;

некие лот оустойч иные бактерии  синие
Решающим  дифференцирующим  моментом  а  иом  метите  шатается 

иПггапг  серж.й  кислоты,  т.«.  некисло!о>сiойчнкыг  отмерим  ж*«о 
ойосмоечимилса 

кислоюй 

и 

воспринимаю! 

кн«ричи>*«> 

«жроеку 

(мпичеиокуш  синь),  а  висло шуетойчмкыс  нс  ойееиасчиааюгсв  и  л -я ю м  

окрашенными фу кс ином

Примечание 

И 

масшкшес  к|»емя  вмечо  ' V

h

OTO  рачворв  серной 

КИСЛОТЫ  рекомендует  приме.пнь  ДМ  обеемвачнваии.  »  Хиы й  р о т о р  

соля ж *  кислого  спирю  и  килср-кик-ж.  ею  оо  мспшсиио  слабо шкгиого 

роюоаюю «шейка мажа, 

уж

окрашемжмо фуксином