Добавлен: 30.11.2023
Просмотров: 37
Скачиваний: 3
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
реакционной
смеси.
Таким образом, в течение 1-2 часов исследователю удается экспоненци- ально увеличить количество исходной нуклеиновой кислоты – мишени и из одной молекулы ДНК получить до нескольких десятков миллиардов копий ее фраг- мента.
Для проведения ПЦР в режиме реального времени, была использована 2,5х Реакционная смесь для проведения ПЦР-РВ в присутствии EVA Green (ООО
«Синтол»). Согласно протоколу, готовили реакционную смесь, затем подготавли- вали пробирки объемом 0,2 мл и вносили в них по 20 мкл подготовленной реак- ционной смеси и по 5 мкл образца кДНК. Готовые пробирки устанавливали в при- бор и вводили условия проведения ПЦР.
Температурно-временной режим амплификации
В результате описанных в отчете исследований была проведена оценка всхожести и ростовых показателей 120 сортообразцов ячменя, для дальнейшего фенотипического анализа. Параметры всхожести рассчитали в соответствии с правилами Международной ассоциации тестирования семян (ISTA). Отработана методика выделения РНК из проростков ячменя и проведения реакции обратной транскрипции, выделили РНК и провели реакцию обратной транскрипции более шестидесяти сортов рабочей выборки. В настоящее время ведется отработка ме- тодики работы с ПЦР в реальном времени.
По результатам проведенной работы опубликованы одна обзорная статья в журнале «Животноводство и кормопроизводство» и тезис в постерной сессии 6-й
Международной научной конференции “Генетика растений, геномика, Биоинфор- матика и биотехнология” (plantgen2021),14-18 июня 2021 года, Новосибирск, Рос- сия, запланирована публикация обзорной статьи.
– 1971. – Т. 56. – №. 2. – С. 341-361.
смеси.
Таким образом, в течение 1-2 часов исследователю удается экспоненци- ально увеличить количество исходной нуклеиновой кислоты – мишени и из одной молекулы ДНК получить до нескольких десятков миллиардов копий ее фраг- мента.
Для проведения ПЦР в режиме реального времени, была использована 2,5х Реакционная смесь для проведения ПЦР-РВ в присутствии EVA Green (ООО
«Синтол»). Согласно протоколу, готовили реакционную смесь, затем подготавли- вали пробирки объемом 0,2 мл и вносили в них по 20 мкл подготовленной реак- ционной смеси и по 5 мкл образца кДНК. Готовые пробирки устанавливали в при- бор и вводили условия проведения ПЦР.
Температурно-временной режим амплификации
| № п/п | Температурно – времен- ной режим | Число циклов |
| 1 | 95°С – 180 с | 1 |
| 2 | 95°С – 15 с | 40 |
| 3 | 62°С – 60 с |
Заключение
В результате описанных в отчете исследований была проведена оценка всхожести и ростовых показателей 120 сортообразцов ячменя, для дальнейшего фенотипического анализа. Параметры всхожести рассчитали в соответствии с правилами Международной ассоциации тестирования семян (ISTA). Отработана методика выделения РНК из проростков ячменя и проведения реакции обратной транскрипции, выделили РНК и провели реакцию обратной транскрипции более шестидесяти сортов рабочей выборки. В настоящее время ведется отработка ме- тодики работы с ПЦР в реальном времени.
По результатам проведенной работы опубликованы одна обзорная статья в журнале «Животноводство и кормопроизводство» и тезис в постерной сессии 6-й
Международной научной конференции “Генетика растений, геномика, Биоинфор- матика и биотехнология” (plantgen2021),14-18 июня 2021 года, Новосибирск, Рос- сия, запланирована публикация обзорной статьи.
-
Новикова А. А., Богданова О. В. ВОЗМОЖНОСТИ МАРКЕР-ОРИЕНТИ- РОВАННОЙ СЕЛЕКЦИИ ДЛЯ СОЗДАНИЯ СОРТОВ ЯЧМЕНЯ, УСТОЙЧИ- ВЫХ К БИОТИЧЕСКИМ И АБИОТИЧЕСКИМ ФАКТОРАМ (ОБЗОР) //Живот- новодство и кормопроизводство. – 2021. – Т. 104. – №. 1. – С. 138-148. -
Новикова А. А., Богданова О. В. Молекулярно-генетические методы оценки засухоустойчивости ярового ячменя //Генетика растений, геномика, био- информатика и биотехнология. – 2021. – С. 158-158. DOI 10.18699/PlantGen2021- 142
Список литературы
-
Higuchi R. et al. Simultaneous amplification and detection of specific DNA sequences //Bio/technology. – 1992. – Т. 10. – №. 4. – С. 413-417. -
Higuchi R. et al. Kinetic PCR analysis: real-time monitoring of DNA am- plification reactions //Bio/technology. – 1993. – Т. 11. – №. 9. – С. 1026-1030. -
Kleppe K. et al. Studies on polynucleotides: XCVI. Repair replication of short synthetic DNA's as catalyzed by DNA polymerases //Journal of molecular biology.
– 1971. – Т. 56. – №. 2. – С. 341-361.
-
Гамзаева Р.С. Влияние регуляторов роста на физиолого - биохимиче- ские показатели и продуктивность ярового ячменя // Известия СПбГАУ. 2017. №1 (46). URL: https://cyberleninka.ru/article/n/vliyanie-regulyatorov-rosta-na-fiziologo- biohimicheskie-pokazateli-i-produktivnost-yarovogo-yachmenya. -
Илли И.Э., Клименко Н.Н., Абрамова И.Н., Кузнецова Е.Н., Половин- кина С.В., Парыгин В.В. Влияние температуры при формировании семян на рост тканей прорастающего зародыша яровой пшеницы в условиях Предбайкалья // До- стижения науки и техники АПК. 2014. №7. URL: https://cyberleninka.ru/arti- cle/n/vliyanie-temperatury-pri-formirovanii-semyan-na-rost-tkaney-prorastayuschego- zarodysha-yarovoy-pshenitsy-v-usloviyah-predbaykalya. -
Кондратьев М.Н., Роньжина Е.С., Ларикова Ю.С. Влияние абиотических стрессов на метаболизм вторичных соединений в растениях // Известия КГТУ. 2018. №49. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/vliyanie-abioticheskih-stressov-na- metabolizm-vtorichnyh-soedineniy-v-rasteniyah. -
Туманян А.Ф, Хамдан Васим, Тютюма Н.В. Засухоустойчивость сортооб- разцов ярового ячменя // Вестник РУДН. Серия: Агрономия и животноводство. 2010. №2. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/zasuhoustoychivost-sortoobraztsov- yarovogo-yachmenya.