Файл: Исследования кала при дисбактериозе и кишечных инфекциях студент 5 курса Лд5042.ppt

ИССЛЕДОВАНИЯ КАЛА ПРИ ДИСБАКТЕРИОЗЕ И КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЯХ

• Студент 5 курса Лд-504/2
• Таджидинов О.Х.

• Организм человека густо заселен микробами. Больше всего микробов обитает в толстом кишечнике человека (до 3-4 кг. микробов в кишечнике взрослого человека). Микроорганизмы, населяющие кишечник называются микрофлорой кишечника. Для здорового человека характерен определенный качественный и количественный состав микрофлоры (то есть количество определенных видов микробов, населяющих кишечник) который называется нормальной микрофлорой кишечника.
• Нормальная микрофлора кишечника выполняет множество важных функций: она обеспечивает синтез некоторых витаминов в организме, препятствует размножению в кишечнике болезнетворных (патогенных) бактерий, кроме того, повышает защитные силы организма (иммунитет) и участвует в процессах пищеварения.

Показатели нормальной микрофлоры

Нормальная микрофлора кишечника

• Тонкая кишка. Проксимальные отделы тонкой кишки содержат небольшое количество микроорганизмов - не превышает 103-105 КОЕ/мл. Чаще всего встречаются лактобактерии, стрептококки и актиномицеты. Это обусловлено, по-видимому, низким значением рН желудка, характером нормальной двигательной активности кишечника, антибактериальными свойствами желчи.
• В дистальных отделах тонкой кишки количество микроорганизмов увеличивается, достигая 107-108 КОЕ/г, при этом качественный состав сопоставим с таковым микрофлоры толстой кишки.
• Толстая кишка. В дистальных отделах толстой кишки количество микроорганизмов достигает 1011-1012КОЕ/г, а количество встречающихся видов достигает 500. Преобладающими микроорганизмами являются облигатные анаэробы, их содержание в этом отделе пищеварительного тракта превышает таковое аэробов в 1000 раз.
• Облигатная микрофлора представлена в основном бифидобактериями, эубактериями, лактобактериями, бактероидами, фузобактериями, пропионобактериями, пептострептококками, пептококками, клостридиями, вейлонеллами. Все они высокочувствительны к действию кислорода.
• Аэробные и факультативно анаэробные бактерии представлены энтеробактериями, энтерококками и стафилококками.
• В пищеварительном тракте микроорганизмы локализуются на поверхности эпителиальных клеток, в глубоком слое мукозного геля крипт, в толще мукозного геля, покрывающего кишечный эпителий, в просвете кишечника и в бактериальной биопленке.

Дисбактериоз

• Это клинико-лабораторный синдром, возникающий при целом ряде заболеваний и клинических ситуаций, который характеризуется изменением качественного и количественного состава нормофлоры определенного биотопа, а также транслокацией определенных ее представителей в несвойственные биотопы с последующими метаболическими и иммунными нарушениями. При дисбиотических нарушениях, как правило, происходят снижение колонизационной резистентности, угнетение функций иммунной системы, повышается восприимчивость к инфекционным заболеваниям.

Причины, приводящие к возникновению дисбактериозов:

• •  Длительная антибиотико-, химиоили гормонотерапия. Чаще всего дисбиотические нарушения возникают при использовании антибактериальных препаратов, относящихся к группе аминопенициллинов [ампициллин, амоксициллин, линкозаминов (клиндамицин и линкомицин)]. В этом случае наиболее тяжелым осложнением следует считать возникновение псевдомембранозного колита, ассоциированного сClostridium difficile.
• •  Воздействие жесткого γ-излучения (лучевая терапия, облучение).
• •  Заболевания желудочно-кишечного тракта инфекционной и неинфекционной этиологии (дизентерия, сальмонеллезы, онкологические заболевания).
• •  Стрессовые и экстремальные ситуации.
• •  Длительное пребывание в стационаре (инфицирование госпитальными штаммами), в условиях замкнутого пространства (космические станции, подводные лодки).

Стадии дисбактериоза

• •  I стадия компенсированная - фаза латентная (субклиническая). Происходит уменьшение количества одного из представителей индигенной микрофлоры без изменения других составляющих биоценоза. Клинически не проявляется - компенсированная форма дисбактериоза. При этой форме дисбактериоза рекомендуется диета.
• •  II стадия - субкомпенсированная форма дисбактериоза. Происходят снижение количества или элиминация отдельных представителей индигенной микрофлоры и увеличение содержания транзиторной условно-патогенной микрофлоры. Для субкомпенсированной формы характерны дисфункция кишечника и местные воспалительные процессы, энтерит, стоматит. При этой форме рекомендуются диета, функциональное питание, а для коррекции - пре- и пробиотики.
• •  III стадия - декомпенсированная. Основные тенденции изменения микрофлоры нарастают, условно-патогенные микроорганизмы становятся доминирующими, и отдельные представители распространяются за пределы биотопа и появляются в полостях, органах и тканях, в которых они обычно не встречаются, например E. coli в желчных путях, Candida в моче. Развивается декомпенсированная форма дисбактериоза вплоть до тяжелых септических форм. Для коррекции этой стадии нередко приходится прибегать к так называемой селективной деконтаминации - назначению антибактериальных препаратов из группы фторхинолонов, монобактамов, аминогликозидов per os с последующей длительной коррекцией микрофлоры с помощью диетического питания, пре- и пробиотиков.

Показания к проведению микробиологического исследования кала

• - длительно протекающие кишечные расстройства, при которых не удается выделить патогенные микроорганизмы, - затянувшийся период реконвалесценции после дизентерии и других острых кишечных заболеваний, - дисфункция кишечника у лиц, длительно подвергающихся воздействию радиации, химических веществ и т.п., а также при интенсивной антибиотико- и/или иммунодепрессивной терапии, длительной химиотерапии, гормональной терапии, - наличие бактериемии, гнойно-воспалительных очагов, трудно поддающихся лечению (пиелиты, холециститы, язвенный колит, энтероколит, вялотекущие пневмонии), - предоперационный период у лиц с факторами риска развития дисбактериоза кишечника, - аллергические заболевания (атонический дерматит, бронхиальная астма и пр.), трудно поддающиеся лечению.

• У детей первого года жизни показаниями к проведению исследования кала на микробиоценоз дополнительно к вышеперечисленным являются: - внутриутробная инфекция, - раннее искусственное вскармливание, - непереносимость грудного молока, - иммунодефицитные состояния, - частые острые респираторные инфекции, - задержка нарастания и падение массы тела, отставание в физическом развитии, - стоматит, молочница.

Правила сбора кала на дисбактериоз

• Материал (кал) на кишечный дисбактериоз собирается до начала лечения антибактериальными и химиотерапевтическими препаратами. Для исследования собирают свежевыделенный кал.
• За 3 - 4 дня до исследования отменить приём слабительных препаратов, касторового и вазелинового масла и прекратить введение ректальных свечей. Кал, полученный после клизмы, а также после приёма бария (при рентгеновском обследовании) для исследования непригоден.
• До сбора анализа помочитесь в унитаз, далее путём естественной дефекации в подкладное судно соберите испражнения (следить, чтобы не попала моча). Подкладное судно предварительно обрабатывается любым дезинфицирующим средством, тщательно промывается проточной водой несколько раз и ополаскивается кипятком.
• Кал собирается в чистый, одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой и ложечкой.
• На контейнере необходимо указать вашу фамилию, инициалы, дату рождения, дату и время сбора материала, запись должна быть сделана разборчивым почерком. В направительном бланке обязательно должен быть указан диагноз и дата начала заболевания, сведения о приёме антибиотиков. При взятии материала необходимо соблюдать стерильность.
• По возможности сбор материала на исследование должен осуществляться до назначения антибиотиков (если невозможно, то не ранее, чем через 12 часов после отмены препарата).

У новорожденных:

• 1. утром тщательно прогладить фланелевую пелену и подложить под ребенка
• 2. после опорожнения кишечника стерильным шпателем взять кал в объеме 5-10 г (1 чайная ложка), поместить взятый материал в стерильную банку/контейнер и сразу же закрыть крышкой.
• 3. доставить собранный материал в бактериологическую лабораторию не позднее 1,5-2 часов после сбора материала.

У детей и взрослых

• Утром пациент должен опорожнить кишечник в чистое (обдать кипятком) сухое судно без следов дезинфицирующих средств, надеть перчатки и стерильным шпателем взять кал в объеме 5-10 г (1 чайная ложка), поместить взятый материал в стерильную банку/контейнер и сразу же закрыть крышкой. Использованный шпатель и перчатки поместить в полиэтиленовый пакет, завязать и выбросить. Вымыть руки.
• ЕСЛИ судно (горшок) отсутствует, то необходимо взять чистый лист писчей бумаги, прогладить его горячим утюгом с двух сторон до желтоватого цвета. Удалить воду из подставки унитаза, поместить подготовленный лист бумаги. Далее после опорожнения кишечника стерильным шпателем взять кал в объеме 5-10 г (1 чайная ложка), поместить взятый материал в стерильную банку/контейнер и сразу же закрыть крышкой. Использованный лист после процедуры также помещают в полиэтиленовый пакет.
• Доставить собранный материал в бактериологическую лабораторию не позднее 1,5-2 часов после сбора материала.

Условия, соблюдение которых обязательно:

• не допускается замораживание;
• не допускается длительное хранение (более 5 - 6 часов);
• не пригодны никакие транспортные среды, кроме указанной;
• не допускается неплотно закрытый контейнер;
• не подлежит исследованию биоматериал, собранный накануне.

методы диагностики дисбактериоза кишечника:

• бактериологический анализ (определение состава фекальной микрофлоры, отражающий микробный состав лишь нижних отделов кишечника — наиболее доступный метод, однако недостаточно точный);
• биохимический экспресс-метод определения ферментативной активности надосадочной фракции фекалий;
• высоковольтный электрофорез на бумаге с целью обнаружения бета-аспартилглицина, бета-аспартиллизина, бета-аланина, 5-аминовалериановой и гамма-аминомасляной кислот и др.;
• ионная хроматография;
• газожидкостная хроматография;
• исследование микрофлоры в биоптате тощей кишки, полученном в ходе эндоскопического исследования, — наиболее точный метод, который, однако, из-за технических сложностей не может применяться достаточно широко.

Лабораторная диагностика дисбактериоза кишечника

• Метод исследования - бактериологический: мерный посев исследуемого материала с целью определения количества микроорганизмов наиболее значимых групп. Этапы исследования:
• приготовление серийных разведений суспензии испражнений;
• посев на питательные среды из разведений;
• учет результатов посева и ориентировочная идентификация микроорганизмов;
• оценка результатов.

Для подтверждения дисбактериоза используют также:

• Копрологическое исследование кала (несомненным признаком является наличие в кале большого количества переваренной клетчатки, внутриклеточного крахмала и йодофильной микрофлоры);
• посев желчи, которая в норме стерильна;
• посев мочи (бактериурия с высевом из мочи кишечной микрофлоры - признак генерализации дисбактериоза).

При дисбактериозе нарушается нормальное соотношение между анаэробной и аэробной микрофлорой

• Это прежде всего выражается в: - снижении концентрации бифидобактерий на 1-2 порядка, - снижении концентрации лактобактерий на 1-2 порядка, - нарастании концентрации кишечных палочек с измененными свойствами, - снижении концентрации нормальных кишечных палочек (< 1 млн. на 1 г. фекалий) или увеличение их содержания в 1 г фекалий > 1 млрд., - нарастании концентрации других условнопатогенных микроорганизмов.

Микробиологическе критерии дисбактериоза

• - нарастание количества условнопатогенных микроорганизмов одного или нескольких видов в кишечнике при нормальном количестве бифидобактерий; - нарастание одного или нескольких видов условнопатогенных микроорганизмов при умеренном снижении концентрации бифидобактерий (на 1-2 порядка); - снижение содержания облигатных представителей микробиоценоза (бифидобактерий и/или лактобацилл) без регистрируемого увеличения количества сапрофитной или условнопатогенной микрофлоры кишечника; - умеренное или значительное(< 107) снижение содержания бифидобактерий, сочетающееся с выраженными изменениями в аэробной микрофлоре - редукцией лактобацилл, появлением измененных форм кишечной палочки, обнаружением одного или нескольких представителей условнопатогенных микроорганизмов в высоких титрах до 107 - 108 КОЕ/г). Снижение числа анаэробных представителей облигатной микрофлоры, обладающих высокой антагонистической активностью, создает условия для развития условнопатогенных микроорганизмов: энтеробактерий, стафилококков и грибов рода Candida.