Файл: ГФ 11-1.pdf

Приладожья, Поморья и Прионежья –   

www.alppp.ru.

 Постоянно действующий третейский суд. 

--------T------T---T--T------T------T-------T------T-----T----T------

T------T------¬

¦

¦

   0  

¦

¦

 2

¦

   0  

¦

¦

   2   

¦

¦

¦

  2 

¦

¦

¦

   2  

¦

¦

¦

  y   

¦

 d 

¦

d 

¦

  y   

¦

  d   

¦

  d    

¦

  y1  

¦

  d  

¦

 d  

¦

  y  

¦

  d   

¦

  d   

¦

¦

¦

   1  

¦

¦

¦

   2  

¦

¦

¦

¦

¦

¦

   2 

¦

¦

¦

+-------+------+---+--+------+------+-------+------+-----+----+------

+------+------+

¦

¦

 222  

¦

 3 

¦

9 

¦

 229  

¦

- 1,75

¦

 3,0625

¦

 222  

¦

 0,5 

¦

0,25

¦

 235 

¦

 2,25 

¦

5,0625

¦

¦

¦

 217  

¦

- 2

¦

4 

¦

 231  

¦

  0,25

¦

 0,0625

¦

 220  

¦

- 1,5

¦

2,25

¦

 231 

¦

- 1,75

¦

3,0626

¦

¦

¦

 218  

¦

- 1

¦

1 

¦

 228  

¦

- 2,75

¦

 7,5625

¦

 221  

¦

- 0,5

¦

0,25

¦

 233 

¦

 0,25 

¦

0,0625

¦

¦

¦

 219  

¦

 0 

¦

0 

¦

 235  

¦

  4,25

¦

18,0625

¦

 233  

¦

 1,5 

¦

2,25

¦

 232 

¦

- 0,75

¦

0,5625

¦

+-------+------+---+--+------+------+-------+------+-----+----+------

+------+------+

¦

Сумма  

¦

 876  

¦

 0 

¦

14

¦

 923  

¦

  0   

¦

 28,75 

¦

 886  

¦

  0  

¦

 5  

¦

 931 

¦

  0   

¦

 8,75 

¦

¦

Среднее

¦

219,00

¦

¦

¦

230,75

¦

¦

¦

221,50

¦

¦

¦

232,75

¦

¦

¦

L-------+------+---+--+------+------+-------+------+-----+----+------

+------+-------

II.5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АНТИБИОТИКОВ МЕТОДОМ

ДИФФУЗИИ В АГАР НА ЧАШКАХ ПЕТРИ

Описанная в предыдущем параграфе методика определения активности антибиотиков по схеме 

латинского квадрата предполагает использование лотков. Возможен и другой способ определения 

этой активности - по диффузии в агар на чашках Петри. Ниже описан трехдозный вариант этого 

метода <*>. 

--------------------------------

<*> Этот раздел основан на разработке Всесоюзного НИИ антибиотиков и Государственного 

НИИ по стандартизации и контролю лекарственных средств Министерства здравоохранения СССР. 

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей

Приладожья, Поморья и Прионежья –   

www.alppp.ru.

 Постоянно действующий третейский суд. 

    Стандартный (S) и испытуемый (U) образцы растворяют из расчета

1 мг в 1 мл (основной раствор),  затем готовят по три концентрации

                                S    S    S

рабочих  растворов  стандарта (D1,  D2,  D3) и испытуемого образца

  U   U   U

(D1, D2, D3),      относящиеся друг  к  другу  как  1:2:4.  Все  6

растворов    закапывают    на    одну    чашку    Петри,    причем

последовательность внесения  растворов  в  цилиндры  или  в  лунки

должна быть  случайной  (возможные   последовательности   внесения

растворов приведены в табл.  II.5.1). Число чашек n должно быть не

меньше 6.

    Для уменьшения  влияния  колебаний  во времени между внесением

различных  растворов  рекомендуется   после   внесения   растворов

выдерживать чашки в течение 1-2 ч при комнатной температуре. После

                                                   S           U

измерения зон  угнетения  роста  результаты опыта у   ,  и    у

                                                   i,j         i,j

(i =  1, 2, 3 -  номера  доз,  j = 1,  2,  ...,  n - номера чашек)

записывают в таблицу (как показано в  приведенном  ниже  численном

примере).   Там   же   записывают  получаемые  расчетом  следующие

вспомогательные величины:

                         S               U

               Si = SUM у    и Ui = SUM у                 (II.5.1)

                     j   i,j         j   i,j

- суммы по чашкам для каждой дозы стандарта и испытуемого образца;

                            S           U

                  Tj = SUM у     + SUM у   ,              (II.5.2)

                        i   i,j     i   i,j

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей

Приладожья, Поморья и Прионежья –   

www.alppp.ru.

 Постоянно действующий третейский суд. 

- суммы по всем дозам для каждой чашки;

у = SUM у    = (S1 + S2 + S3) +(U1 + U2 + U3) = SUM Tj   (II.5.3)

     i,j  i,j                                     j

- суммы всех диаметров зон задержки роста по всем дозам и чашкам.

Далее вычисляют:

          S = S1 + S2 + S3  и  U = U1 + U2 + U3           (II.5.4)

- суммы всех диаметров зон задержки роста отдельно для стандарта и

для испытуемого образца;

                L  = S3 - S1   и L  = U3 - U1             (II.5.5)

                 S                U

- "линейные контрасты" для стандарта и для испытуемого образца;

       Q  = S1 - 2S2 + S3   и  Q  = U1 - 2U2 + U3         (II.5.6)

        S                       U

"квадратичные контрасты" для стандарта и для испытуемого образца. 

Для проверки законности дальнейших расчетов следует провести дисперсионный анализ 

результатов опыта в соответствии с табл. II.5.2, а именно должно получиться F < F(95%; f, fост) для 

строк 2, 3, 4 и F > F (95%) для строки 1. 

Выполнение первого условия одновременно означает, что вариации в этих строках 2, 3, 4 

должны рассматриваться как случайные, и поэтому их следует включить в остаточную вариацию, 

произведя также перерасчет значимости линейной регрессии (кстати, это относится и к вариациям в 

строках 5 и 6, если они окажутся незначимыми). Разумеется, при указанном перерасчете степени 

свободы вариаций, включаемых в остаточную вариацию, должны прибавляться к числу степеней 

свободы последней (fост). 

Таблица II.5.1 

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей

Приладожья, Поморья и Прионежья –   

www.alppp.ru.

 Постоянно действующий третейский суд.