Файл: В комплексе мероприятий по профилактике и борьбе с инфекционными болезнями важное место занимает дезинфекция.rtf
ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 29.10.2023
Просмотров: 160
Скачиваний: 1
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
При наличии роста на МПА подсчитывают колонии и изучают морфологию их при малом увеличении микроскопа. В случае возникновения подозрения на выделение возбудителя сибирской язвы идентификацию такой культуры проводят в порядке, предусмотренном действующими методическими указаниями.
При наличии роста на дифференциально-диагностической среде в крышку чашки Петри вносят 1-2 см культуры при 20+2°С в течение 1 мин, после чего визуально или под малым увеличением микроскопа проводят учет теста. Под действием паров аммиака происходит порозовение колоний микроорганизмов, обладающих фосфатозной активностью.
Bacanthracisфосфатозной активностью не обладает и его колонии остаются бесцветными. При отсутствии роста или характерных колоний на плотных средах и наличии роста на МПБ делают дробные посевы из МПБ на плотную питательную среду.
При просмотре посевов учитывают общее число проб, в которых обнаружен рост санитарно-показательных микроорганизмов, а при споровой инфекции - и колонии непатогенных спорообразующих аэробов рода Bacillus.
Метод отпечатков на тонком слое плотной питательной среды наиболее приемлем в условиях промышленного ведения животноводства на комплексах, птицефабриках и других объектах, где имеются лаборатории.
Ванны и пробирки с пробами-отпечатками, доставленные в лабораторию, помещают на 16-18 ч в термостат при температуре 37°С. После инкубирования пробы просматривают невооруженным глазом на наличие роста.
При отсутствии микроколоний и изменения среды пробы дальнейшим исследованиям не подвергают. В сомнительных случаях, когда отсутствует рост макроколоний, но изменены цвет или прозрачность среды, фиксируют над пламенем, окрашивают по Муромцеву и микроскопируют с целью обнаружения микроколоний. Учитывают общее число отпечатков, в которых обнаружен рост микроорганизмов.
Контроль качества заключительной дезинфекции при туберкулезе проводят параллельно двумя методами по выделению стафилококка и микобактерий.
Смывы обрабатывают, как указано выше. Из центрифуга эта каждой объединенной пробы делают высев на среды для выделения стафилококков, готовят по шесть мазков на узких (1,2Х7,5 см) предметных стеклах. Мазки высушивают при комнатной температуре или в термостате 2-3 ч, складывают по два тыльной стороной и погружают в 8-12%-ный раствор серной кислоты на 15 мин. После этого стекла-мазки берут пинцетом и погружают на 5-10 с в стерильную дистиллированную воду, а затем переносят в пробирки со средой Сотона (в 940 см* дистиллированной воды растворяют 4 г аспарагина, 2 - лимонной кислоты, 0,5 - калия фосфорнокислого двузамещенного, 0,5 -сернокислой магнезии и 0,05 г лимоннокислого аммиачного ' железа). Затем добавляют 60 см нейтрального глицерина. После полного растворения аспарагина и солей показатель рН среды должен быть 7,4. Среду разливают по 200 см в колбы вместимостью 250 см и стерилизуют 30 мин в автоклаве при 1,5 атм. Перед использованием в колбу со средой Сотона добавляют 30 см
1 стерильной сыворотки крови крупного рогатого скота, разливают в стерильные пробирки по 7-8 см2 и помещают на 12 суток в термостат при 37-38°С.
Пробы почвы с прилегающей территории и соскобов с поверхности помещений (каждую в отдельности) помещают в колбу, заливают двух- или трехкратным количеством дистиллированной воды, взбалтывают и фильтруют через двойной слой марли в узкогорлую колбу вместимостью 200-250 сма. К фильтрату добавляют 2-3 см! ксилола или авиационного бензина, встряхивают 15-20мини дол ивают дистиллированную воду до горлышка. Содержимое отстаивают 30 мин с целью получения флотата, из которого готовят мазки на узких предметных стеклах.
При наличии роста стафилококков хотя бы в одной исследованной пробе качество дезинфекции признают неудовлетворительным и дальнейшее исследование по выделению микобактерий не проводят.
Стекла с мазками извлекают из пробирок на 6-, 8- и 12-й день инкубирования, высушивают, фиксируют над пламенем горелки, окрашивают по Циль-Нильсену и микроскопируют для обнаружения микроколоний.
Оценка результатов исследования. Качество профилактической дезинфекции помещений для получения и содержания молодняка скота (птицы) и текущей дезинфекции изолированных секций (боксов, скотных дворов) с автономной системой жизнеобеспечения животных признают удовлетворительным при отсутствии роста санитарно-показательных микроорганизмов в 90% исследованных проб.
При профилактической дезинфекции помещений для содержания взрослого поголовья и текущей дезинфекции частично освобожденные от животных или неизолированных помещений допускается выделение санитарно-показательных микроорганизмов из 20% исследованных проб.
Качество заключительной дезинфекции при ее контроле по выделению бактерий группы кишечной палочки, стафилококков, грибов и микобактерий признают удовлетворительным при отсутствии выделения названных культур во всех исследованных, пробах.
При споровых инфекциях качество дезинфекции признают удовлетворительным при отсутствии роста. При прямом посеве на МПа допускают рост единичных (не более трех в смыве) колоний непатогенных спорообразующих аэробов рода Bacillus.
Метод контроля качества профилактической аэрозольной дезинфекции, проводимой формалином,
предназначен для быстрого (непосредственно после окончания экспозиции дезинфекции) контроля качества дезинфекции животноводческих помещений. Он основан на окрашивании индикаторной среды под воздействием газовой и капельной фаз аэрозоля формальдегида. В качестве индикатора используют среду Эндо, которая под воздействием формальдегида в процессе аэрозольной дезинфекции приобретает резко очерченное окрашивание. Перед проведением дезинфекции подготавливают индикаторные пробирки (стеклянные трубки диаметром 4-8 мм и длиной 40-50 мм). В качестве таких пробирок могут быть использованы пробирки Уленгута или отрезки пипеток, запаянные с одного конца. Пробирки заливают расплавленной индикаторной средой до уровня обреза пробирок, запечатывают парафином и хранят 1 мес (со дня изготовления) при температуре 0-5°С. Для учета результатов без линейки на индикаторные пробирки при их изготовлении можно нанести риски на расстоянии 18 и 30 мм. от среза пробирки. Для экспресс-метода контроля качества аэрозольной дезинфекции помещений используют среду Эндо, выпускаемую биологической промышленностью в сухом виде; 2%-ную взвесь сухой среды в дистиллированной воде доводят до кипения и пропускают через ватный фильтр, после чего среду заливают в пробирки при помощи пипеток, наносят на пол, стены, потолок помещения и находящееся в нем оборудование. Особо важно прикрепить индикаторные средства в труднодоступных местах (внутри оборудования, у щелей и т.д.). На одно помещение требуется в среднем 10-15 пробирок. Перед размещением с пробирок снимают парафиновые колпачки. На полу помещения пробирки устанавливают, а на стенах прикрепляют открытым концом вверх, на потолке фиксируют открытым концом вниз.
Оценку качества дезинфекции проводят непосредственно после окончания экспозиции (12 или 24 ч). Линейкой с миллиметровой шкалой измеряют длину окрашенного столбика индикаторной среды, начиная с обреза пробирки. Дезинфекцию считают удовлетворительной, если глубина окрашивания среды после экспозиции 12 ч составляет не менее 18 мм, а после экспозиции 24 ч - 30 мм.
Контроль качества дезинфекции спецодежды. Качество дезинфекции спецодежды, мешкотары и прочих изделий из тканевых материалов, подвергаемых обеззараживанию в камерах, методом замачивания в дезинфицирующем растворе, кипячением или по режимам одновременной стирки и дезинфекции, контролируют по выделению тест-культур микроорганизмов из тест-объектов, закладываемых в подлежащий обеззараживанию материал.
При контроле качества дезинфекции в очагах бактериальных (кроме туберкулеза) и вирусных инфекций в качестве тест-культур используют музейные штаммы кишечной палочки, золотистого стафилококка (St.aureus - штамм 209-Р) и антракои-да (Вас. anthracoides - штамм 96).
Музейные культуры (после лиофильной сушки) хранят при температуре минус 4°С не более двух лет; в виде посевов на МПА (посев уколом) под слоем стерильного вазелинового масла (толщина слоя 1,5-3 мм) - не более шести месяцев.
В качестве тест-объектов используют кусочки батистовой ткани, импрегнированные соответствующей тест-культурой (батистовую ткань стирают, гладят, нарезают на кусочки размером 5 *10 мм, которые раскладывают по 50 шт. в чашки Петри. Чашки завертывают в плотную бумагу и стерилизуют 30 мин в автоклаве при температуре 110°С (0,5 атм).
Стерильные тест-объекты в той же чашке Петри заливают смесью двухмиллиардной взвеси тест-культуры и инактивированной сыворотки крови (или 40-50%-ной эмульсии кала животных), взятых в соотношении 1:1 (из расчета 1 смГ! на 1 тест-объект). Чашку Петри закрывают крышкой и оставляют при комнатной температуре на 20 мин. Затем тест-объекты переносят в другую чашку Петри на поверхность стерильной фильтровальной бумаги, положенной в два слоя на дно чашки, покрывают сверху листом стерильной фильтровальной бумаги, чашку закрывают крышкой. Через 10 мин тест-объекты переносят на поверхность листа стерильной фильтровальной бумаги в чашке Петри, подсушивают 20-30 мин в термостате при 37°С.
Тест-объекты (по 2 шт.) закладывают в стерильные мешочки размером 5х 8 см, изготовленные в виде конверта из той же ткани, что и подлежащие обеззараживанию изделия, и помещают в карман спецодежды или пришивают нитками к подлежащим обеззараживанию изделиям.
При дезинфекции (методом замачивания в дезинфицирующих растворах или кипячением) изделия с вложенными в них тест-объектами размещают послойно внизу, в середине и в верхней части емкости, а при обеззараживании в камере - в разных местах ее.
По истечении экспозиции дезинфекции или цикла стирка ополаскивание отжим при использовании метода одновременного обеззараживания и стирки мешочки с тест-объектами помещают в стерильные чашки Петри и доставляют в лабораторию для исследования.