Файл: Российский государственный аграрный университет мсха имени К. А. Тимирязева.pdf

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ
РОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ –
МСХА имени К.А. ТИМИРЯЗЕВА
(ФГБОУ ВО РГАУ - МСХА имени К.А. Тимирязева)
ВЫПУСКНАЯ КВАЛИФИКАЦИОННАЯ РАБОТА
(бакалаврская работа)
«Анализ вторичных метаболитов и биологической активности экстрактов
суспензионных культур клеток аюги туркестанской (Ájuga turkestánica (Regel) Briq.)»
по направлению 19.03.01 «Биотехнология»
Бакалавр:
Гладыш Наталья Станиславовна
Научный руководитель:
к.б.н. Халилуев М.Р.
Научные консультанты:
к.б.н. Титова М.В., к.б.н. Попова Е.В.
Москва
2023

Цель и задачи исследования
Целью работы является сравнительный анализ вторичных метаболитов и биологической активности экстрактов из биомассы суспензионных клеточных культур живучки туркестанской (Ajuga
turkestanica), выращенных на питательных средах с различным гормональным составом.
Задачи исследования:
1. Изучить ростовые характеристики суспензионных культур клеток живучки туркестанской, выращенных на питательных средах с различным гормональным составом (всего 14 линий);
2. С использованием метода ВЭЖХ ЭР МС провести скрининг целевых вторичных метаболитов в исследуемых линиях суспензионных культур клеток живучки туркестанской.
3. С использованием 3-х различных методов провести анализ антиоксидантной активности экстрактов из биомассы исследуемых линий суспензионных культур клеток живучки туркестанской.
2

Материалы и методы
В качестве объектов исследования использовали 12 штаммов суспензионной культуры клеток Ajuga turkestanica, депонированные во Всероссийской коллекции растительных клеток и органов высших растений
Института физиологии растений под соответствующими номерами (шифрами): 1, 2, 3, 4, 5, 7, 14, 14, 30, 55, 73.
1. Для культивирования использовали среды с минеральной основой по
Гамборгу (В5, макроэлементы) и Мурасиге и Скугу (MS, микроэлементный состав) с различным составом витаминов и регуляторов роста.
2. Для характеристики суспензионных культур оценивали жизнеспособность, сравнивали кривые роста и производные параметры роста такие как индекс роста (I), удельная скорость роста (μ), экономический коэффициент (Y), продуктивность по сухой биомассе (P).
3. Антиоксидантную активность определяли спектрофотометрическими методами: DPPH, ABTS (TEAC), NBT.
4. При проведении ВЭЖХ ИЭР МС использовали стандартные образцы экдистерона (20-гидроксиэкдизон) и туркестерона.
3

Рис. 1 - Различия в гормональном составе питательной среды культивирования A. turkestanica
4

Результаты и обсуждение
Рис. 2 - Классификация исследуемых штаммов суспензионных культур Ajuga turkestanica на основе ростовых и экономических показателей (в расчете на сухой вес)
5

6

Результаты и обсуждение
Рис. 3 - Репрезентативные кривые роста (в расчете на сухой вес) штаммов Ajuga turkestanica,
иллюстрирующие динамику роста штаммов из групп с разной экономической продуктивностью
7

Результаты и обсуждение спектрофотометрия
8

Результаты и обсуждение вэжх
9

Выводы
10