ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 29.11.2023
Просмотров: 117
Скачиваний: 2
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
на качественный состав микрофлоры оказывает влияние различных факторы. в воду могут попадать патогенные микроорганизмы возбудителя дизентерии холеры гепатита А сальмонеллы летоспиры возбудители туляремии и другие. хотя вода не является благоприятной средой для размножения патогенных микроорганизмов они способны определённое время сохраняться в ней. по характеру пользования выделяет питьевую воду централизованного и местного водоснабжения забором из открытых водоёмов или подземных источников воду плавательных бассейнах лёд медицинские хозяйственные и другие. особого внимания санитарные точки зрения требует сточные воды.основаниями для санитарного-микробиологических исследований воды являются:
Отбор хранения транспортировка пробПробу отбирают стерильные ёмкости плотно закрытые пробками силиконовыми резиновыми или из других материалов и защищённые колпачками из плотной бумаги или алюминиевой фольгой.если воду отбирают после обеззараживания химическими реагентами то для нейтрализации в ёмкость до стерилизации вносят натрия серного потокислый и с расчёта 10 мг на 500 мл воды. при исследовании воды из распределительной сети отбор проб и с крана производят после его обжигания и последующего спуска воды не менее 10 минут на полностью открытом кране при отборе проб напор воды уменьшает водой воды набирают столько чтобы пространство между пробкой и поверхностью воды было достаточно пробка не должна смачиваться водой при транспортировке.отобранную пробу маркирует заполняет направление с указанием места даты времени забора цели исследования фамилии специалистов отбиравшего пробы доставляет при температуре 4-10 градусов по Цельсия срок начала исследования от момента отбора проб не должен превышать 6 часов. если пробу нельзя охладить их исследовать в течение 2 часов после забора.если не может быть соблюдено время доставки пробы и температура хранения анализ проводить нельзя.Определение общего числа микроорганизмовметод определяет в питьевой воде общее число мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов способных на питать на магаре образовывать колоний при температуре 37° в течение 24 часов и видимые с увеличением в 2 раза.из каждой пробы делают посев не менее двух объёмов по 1 мл глубинным методом.пробы в отличие тщательно перемешивается и по 1 мл вносится в 200 стерильные чашки Петри слегка приоткрывая крышки в каждую чашку вливают расплавленные или остужённый питательный агар 45 49° c в количестве 12 мл на чашку диаметром 90-100 мм содержимое быстро перемешивается избегая образования пузырьков воздуха и попадания агара края и крышки чашки после застывания агара чашки помещают в термостат вверх дном и инкубирует при 37° 24 часа.После термостатирования подсчитывают все выросшие колонии учитывает только те чашки на которых выросла не более 300 изолированных колоний. количество колоний на обеих частях суммируют и делят на два находят среднее арифметическое.результаты выражают числом колонии образующих единицы в одном миллилитре исследуемой воды.
если почёт кого они невозможен то в протоколе отмечает сплошной рост. определение ОКБ и ТКБ методом мембранной фильтрацииМетод основан на фильтрации установленного объёма воды через мембранные фильмы выращивание посевов на среди эндо и последующим идентификации колоний по культуральным и биохимическим свойствам.при исследовании питьевой воды анализирует три объёма по 100 мл. воду фильтрует через мембранный фильтры. Фильтры с помощью пломбированного пинцета осторожно переносит на среду эндо не переворачивая фильтр и избегая пузырьков между средой и фильтром. чашки инкубируют при 37° 24 часа. если на фильтрах нет роста или вырос линии характерной колонии выдаёт отрицательный результат ОКБ и ТКБ не обнаружены в 100 мл.если выросли колонии тёмно-красный красный с металлическим блеском или без него с отпечатком на обратной стороне фильтра отсчитывают число кого не каждого типа отдельно ставят тесты для определения ОКБ и ТКБ. для подтверждения ОКБ исследуют не менее 3-4 колоний каждого типа. для подтверждения ТКБ следует все типичные колония но не более 10. каждую колонии следует на оксидазную активность принадлежность к окраске по граму, ферментацию лактозы.для определения оксидазной активности бумажки СИП-оксидаза смачивают дистиллированной водой. часть колонии стеклянной палочкой наносят на подготовленную фильтровальную бумагу штрихом.Реакция считается положительной если в течение 1 минуты появятся синие фиолетово-коричневое окрашивание штриха. при отрицательной реакции цвета штриха не меняется. при положительной реакции эту колонию из дальнейшего исследования исключают.из оксидазоотрицательной колонии делают мазок окрашивают по Граму и микроскопируют. при наличии грамм отрицательных аспорогенных палочек определяют ферментацию лактозы. оставшуюся часть колонии засевают параллельнов две пробирки с лактозной средой. для подтверждения ОКБ инкубирует при 37°, 48 часов ТКБ 44° 24 часа. первичный учёт возможен через 4-6 часов. при наличии кислоты и газа дают положительный ответ. при отсутствии кислоты и газа или при наличии только кислоты пробирки для окончательного ответа на ТКБ оставляют до 24 часов на ОКБ до 48 часов. при отсутствии ОКБ и ТКБ на всех фильтрах результат выписывают не обнаружено КОЕ ОКБ в 100 мл и не обнаружено КОЕ ТКБ в 100 мл.При подтверждении ОКБ и ТКБ колонии подсчитывают на всех фильтрах и выражает результат анализа в 100 мл воды.
вычисление производят по формуле x = a x 100 / vгде x - число колоний в 100 мл V - профильтрованный объём воды через фильтр на который велся учёт А - число подсчитанных на этих фильтрах колоний в суммеопределение ОКБ ТКБ титрационным методом этот метод может быть использован
при исследовании 3 объёмов по 100 мл результаты оцениваются качественно и при обнаружении ОКБ и ТКБ хотя бы в одном из 3 объёмов делается запись обнаружены в 100 мл при исследовании количественным методом определяют наиболее верное число ОКБ и ТКБ по таблице отрицательном ответы наличие ОКБ во всех исследованных объёмах в этой заключении не обнаружено 100 млопределение спор сульфитредуцирующих клостридийметод основан на выращивание посева в железа сульфид на агаре в условиях приближённых к анаэробных и при подсчёте сват чёрных колонийПробу воды 20 мл прогревает на водяной бане в пробирках при температуре 75 + -5° c 15 минут для исключения вегетативных форм. при исследовании хлорированной воды подогревании пробы можно не производить. определение проводят методом фильтрования в пробирках методом фильтрования в чашках и методом прямого посева. при определении прямым посевом стерильные пробирки вносят
-
выборы источника централизованного хозяйства на питьевого водоснабжения и контроль за ним -
контроль эффективности обеззараживание питьевой воды централизованного водоснабжения -
наблюдение за санитарной эпидемиологические состояния воды открытых водоёмов -
контроль эффективности обеззараживания воды плавательных бассейнов -
расследование водных вспышек инфекционных болезней
Отбор хранения транспортировка пробПробу отбирают стерильные ёмкости плотно закрытые пробками силиконовыми резиновыми или из других материалов и защищённые колпачками из плотной бумаги или алюминиевой фольгой.если воду отбирают после обеззараживания химическими реагентами то для нейтрализации в ёмкость до стерилизации вносят натрия серного потокислый и с расчёта 10 мг на 500 мл воды. при исследовании воды из распределительной сети отбор проб и с крана производят после его обжигания и последующего спуска воды не менее 10 минут на полностью открытом кране при отборе проб напор воды уменьшает водой воды набирают столько чтобы пространство между пробкой и поверхностью воды было достаточно пробка не должна смачиваться водой при транспортировке.отобранную пробу маркирует заполняет направление с указанием места даты времени забора цели исследования фамилии специалистов отбиравшего пробы доставляет при температуре 4-10 градусов по Цельсия срок начала исследования от момента отбора проб не должен превышать 6 часов. если пробу нельзя охладить их исследовать в течение 2 часов после забора.если не может быть соблюдено время доставки пробы и температура хранения анализ проводить нельзя.Определение общего числа микроорганизмовметод определяет в питьевой воде общее число мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов способных на питать на магаре образовывать колоний при температуре 37° в течение 24 часов и видимые с увеличением в 2 раза.из каждой пробы делают посев не менее двух объёмов по 1 мл глубинным методом.пробы в отличие тщательно перемешивается и по 1 мл вносится в 200 стерильные чашки Петри слегка приоткрывая крышки в каждую чашку вливают расплавленные или остужённый питательный агар 45 49° c в количестве 12 мл на чашку диаметром 90-100 мм содержимое быстро перемешивается избегая образования пузырьков воздуха и попадания агара края и крышки чашки после застывания агара чашки помещают в термостат вверх дном и инкубирует при 37° 24 часа.После термостатирования подсчитывают все выросшие колонии учитывает только те чашки на которых выросла не более 300 изолированных колоний. количество колоний на обеих частях суммируют и делят на два находят среднее арифметическое.результаты выражают числом колонии образующих единицы в одном миллилитре исследуемой воды.
если почёт кого они невозможен то в протоколе отмечает сплошной рост. определение ОКБ и ТКБ методом мембранной фильтрацииМетод основан на фильтрации установленного объёма воды через мембранные фильмы выращивание посевов на среди эндо и последующим идентификации колоний по культуральным и биохимическим свойствам.при исследовании питьевой воды анализирует три объёма по 100 мл. воду фильтрует через мембранный фильтры. Фильтры с помощью пломбированного пинцета осторожно переносит на среду эндо не переворачивая фильтр и избегая пузырьков между средой и фильтром. чашки инкубируют при 37° 24 часа. если на фильтрах нет роста или вырос линии характерной колонии выдаёт отрицательный результат ОКБ и ТКБ не обнаружены в 100 мл.если выросли колонии тёмно-красный красный с металлическим блеском или без него с отпечатком на обратной стороне фильтра отсчитывают число кого не каждого типа отдельно ставят тесты для определения ОКБ и ТКБ. для подтверждения ОКБ исследуют не менее 3-4 колоний каждого типа. для подтверждения ТКБ следует все типичные колония но не более 10. каждую колонии следует на оксидазную активность принадлежность к окраске по граму, ферментацию лактозы.для определения оксидазной активности бумажки СИП-оксидаза смачивают дистиллированной водой. часть колонии стеклянной палочкой наносят на подготовленную фильтровальную бумагу штрихом.Реакция считается положительной если в течение 1 минуты появятся синие фиолетово-коричневое окрашивание штриха. при отрицательной реакции цвета штриха не меняется. при положительной реакции эту колонию из дальнейшего исследования исключают.из оксидазоотрицательной колонии делают мазок окрашивают по Граму и микроскопируют. при наличии грамм отрицательных аспорогенных палочек определяют ферментацию лактозы. оставшуюся часть колонии засевают параллельнов две пробирки с лактозной средой. для подтверждения ОКБ инкубирует при 37°, 48 часов ТКБ 44° 24 часа. первичный учёт возможен через 4-6 часов. при наличии кислоты и газа дают положительный ответ. при отсутствии кислоты и газа или при наличии только кислоты пробирки для окончательного ответа на ТКБ оставляют до 24 часов на ОКБ до 48 часов. при отсутствии ОКБ и ТКБ на всех фильтрах результат выписывают не обнаружено КОЕ ОКБ в 100 мл и не обнаружено КОЕ ТКБ в 100 мл.При подтверждении ОКБ и ТКБ колонии подсчитывают на всех фильтрах и выражает результат анализа в 100 мл воды.
вычисление производят по формуле x = a x 100 / vгде x - число колоний в 100 мл V - профильтрованный объём воды через фильтр на который велся учёт А - число подсчитанных на этих фильтрах колоний в суммеопределение ОКБ ТКБ титрационным методом этот метод может быть использован
-
при отсутствии материалов и оборудования необходимых для выполнения анализа методом мембранной фильтрации -
при анализе воды с большим содержанием взвешенных веществ -
в случае преобладания в воде посторонной посторонний микрофлоры препятствующие получению на фильтрах изолированных колоний ОКБ
-
в среде накопления нет признаков роста -
на секторе и среды эндо нет роста -
на среди эндо выросли не характерные для калиморфных бактерий колонии -
все колонии оказались оксидазоложительными -
все колония оказались грамположительными -
если на среде с лактозой не отмечено газообразования.
при исследовании 3 объёмов по 100 мл результаты оцениваются качественно и при обнаружении ОКБ и ТКБ хотя бы в одном из 3 объёмов делается запись обнаружены в 100 мл при исследовании количественным методом определяют наиболее верное число ОКБ и ТКБ по таблице отрицательном ответы наличие ОКБ во всех исследованных объёмах в этой заключении не обнаружено 100 млопределение спор сульфитредуцирующих клостридийметод основан на выращивание посева в железа сульфид на агаре в условиях приближённых к анаэробных и при подсчёте сват чёрных колонийПробу воды 20 мл прогревает на водяной бане в пробирках при температуре 75 + -5° c 15 минут для исключения вегетативных форм. при исследовании хлорированной воды подогревании пробы можно не производить. определение проводят методом фильтрования в пробирках методом фильтрования в чашках и методом прямого посева. при определении прямым посевом стерильные пробирки вносят
-
по 10 мл в 2 стерильные пробирки или -
по 5 мл в 4 стерильные пробирки