ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 09.09.2020
Просмотров: 8009
Скачиваний: 76
155
Обзор методов гидробиологических исследований подготовлен на основе
обобщения информации из перечисленных в списке литературы источников.
РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА
Водоросли: Справочник / под общ. ред. С.П. Вассера. Киев: Наук. думка, 1989. 608 с.
Киселев И.А. Планктон морей и континентальных водоемов. Л.: Наука, 1969. Т. 1.
Вводные и общие вопросы планктологии. 658 с.
Кузнецов С.И., Дубинина Г.А. Методы изучения микроорганизмов. М.: Наука, 1989.
288 с.
Кузьмин Г.В. Фитопланктон. Видовой состав и обилие // Методика изучения
биогеоценозов внутренних водоемов / под. ред. Ф.Д. Мордухай-Болтовского. М.: Наука, 1975.
С. 73-87.
Методические рекомендации по сбору и обработке материалов при гидробиологических
исследованиях на пресноводных водоемах. Фитопланктон и его продукция / Ред. Г.Г. Винберг,
Г.М. Лаврентьева. Л.: ГосНИОРХ, ЗИН АН СССР, 1984. 32 с.
Методы изучения пресноводного фитопланктона: методическое руководство: автор-сост.
Садчиков А.П. М.: Изд-во «Университет и школа», 2003. 157 с.
Романенко В.И., Кузнецов С.И. Экология микроорганизмов пресных водоемов.
Лабораторное руководство. Л.: Наука, 1974. 193 с.
Руководство по гидробиологическому мониторингу пресноводных экосистем. СПб.:
Гидрометеоиздат, 1992. 180 с.
Руководство по методам гидробиологического анализа поверхностных вод и донных
отложений. Л.: Гидрометеоиздат, 1983. 239 с.
Топачевский А.В., Масюк Н.П. Пресноводные водоросли Украинской ССР. К.: Вища
школа. Головное изд-во, 1984. 336 с.
Федоров В.Д. О методах изучения планктона и его активности. М.: Изд-во МГУ, 1979.
168 с.
156
ГЛАВА 7. МЕТОДЫ ГЕЛЬМИНТОЛОГИЧЕСКИХ
ИССЛЕДОВАНИЙ
7.1. Освоение методов гельминтологических исследований
Паразитологическое исследование является одним из важнейших этапов
изучения состояния популяций животных и биоценозов в целом. Известно, что
экосистемы состоят из структурных элементов, объединяемых в единое целое
потоками вещества и энергии. В этом аспекте характеристика паразитарной си-
стемы, как составной части экосистемы, приобретает особое значение. Поэтому
всестороннее исследование любого вида животных, помимо изучения особен-
ностей его морфологии и физиологии, питания, размножения и развития, био-
топического размещения и географического распространения, в обязательном
порядке должно включать паразитологическую компоненту. При правильном
методологическом подходе и технической организации работы паразитологи-
ческое исследование всегда может дать более или менее ясную картину слож-
ных взаимоотношений между паразитами, хозяевами и внешней средой обита-
ния, позволит уточнить экологическую нишу вида, оценить ущерб, наносимый
популяции хозяина и выработать комплекс мер по борьбе с паразитами.
Паразиты являются не таксономической, а экологической группой. К ним
относятся и мельчайшие, и относительно крупные животные, населяющие ор-
ганизм хозяина внутри и снаружи, которые связаны с ним постоянно или вре-
менно, закономерно или случайно. В соответствие с такой многоликостью па-
разитизма методы паразитологических исследований также разнообразны. Для
методологического удобства условно разделим беспозвоночных паразитов на
три группы: простейшие, гельминты (паразитические черви) и эктопаразиты
(членистоногие).
Изучение паразитических простейших представляет собой значительные
трудности для начинающих. Большинство их имеет очень мелкие размеры, что
требует обеспеченности микроскопической техникой с большим увеличением.
Более того, их очень легко пропустить при осмотре, нарушить локализацию или
случайно удалить во время манипуляций с телом хозяина. Вдобавок к этому
существует множество нюансов при изготовлении мазков, препаратов и срезов
для каждой систематической группы, которые проблематично освоить без ру-
ководства опытного наставника. Еще больше затруднений вызывает сложная
видовая диагностика системы простейших, результаты которой сильно зависят
от качества приготовленных микропрепаратов. Даже при отличном качестве
последних окончательное заключение о видовой принадлежности простейших
немыслимо без консультаций со специалистами. Указанные обстоятельства де-
лают представителей этой группы паразитов неудобными объектами для начи-
нающих исследователей.
Гельминтами называют систематически разнородные группы плоских,
круглых и кольчатых червей, которые обитают внутри (за исключением пиявок
и отчасти – моногеней) организма хозяина. Половозрелые черви хорошо видны
157
при небольшом увеличении бинокуляра или даже невооруженным глазом. Их
личинки обычно мельче, но также могут быть обнаружены при использовании
бинокуляра. Из-за своих размеров гельминты более удобны для манипуляций,
нежели паразитические простейшие. Еще одним удобным преимуществом этой
сводной группы паразитов могут служить более или менее унифицированные
требования, предъявляемые к сбору, фиксации, обработке и изготовлению мик-
ропрепаратов гельминтов из разных классов. Но все же, в виду большого раз-
нообразия их видов, консультации специалистов при видовой диагностике
необходимы.
Эктопаразиты длительно или кратковременно находятся на поверхности
тела хозяина. Их степень взаимодействия с хозяином может быть различной.
Одни используют хозяина исключительно для получения пищи, а в остальное
время с ним не связаны (клещи, клопы, двукрылые насекомые). Другие находят
на хозяине постоянное местообитание (блохи, вши, пухоеды, некоторые рако-
образные). Изучение эктопаразитов несколько сложнее, чем гельминтов по ря-
ду причин. Во-первых, многие из них отличаются подвижностью и не всегда
могут быть собраны полностью, так как легко покидают тело хозяина, либо ме-
няют свою локализацию. Во-вторых, их извлечение без повреждения требует
аккуратности и особых навыков. В-третьих, многие хозяева эктопаразитов
(микромаммалии, птицы) часто являются резервуаром и источником возбуди-
телей различных инфекционных заболеваний, а манипуляции с ними могут
быть опасны для жизни и здоровья исследователя. Наконец, видовая диагно-
стика эктопаразитов по причине их таксономического разнообразия, затруднена
и невозможна без руководства опытного наставника.
Таким образом, начинающим исследователям рекомендуется освоение, в
первую очередь, гельминтологических методов и приемов исследования. При
этом, интерпретируя полученные результаты работы, всегда нужно помнить,
что гельминтофауна – только часть (пусть даже часто весьма значительная)
общей паразитофауны.
7.2. Выбор объекта для гельминтологического изучения
Гельминтологическое исследование животных разных таксономических и
размерных групп имеет свои особенности. Для освоения метода лучше изучать
животных среднего размера. Во-первых, это проще организовать с технической
точки зрения. Во-вторых, у небольших животных (насекомых, моллюсков и
других беспозвоночных) гельминты, как правило, представлены личиночными
формами, имеют небольшие размеры и встречаются спорадически. Наоборот,
крупные животные (млекопитающие), хоть и будут заражены достаточным
числом взрослых гельминтов, но потребуют для полного обследования много
времени и для начинающих исследователей работа с ними затруднительна.
Из животных среднего размера рекомендуется использовать земноводных
или рыб, отловить которых несравненно проще, чем рептилий, млекопитающих
и особенно птиц. Однако, последующее содержание рыб живыми без потери
158
гельминтов технически очень сложно. Напротив, отловленных амфибий можно
длительное время содержать в холодильнике, имитирующем условия зимней
спячки, без затрат на кормление. В совокупности, трудно представить себе бо-
лее удобный объект для начинающего паразитолога, чем земноводные.
Практика показывает, что каждый студент, обладающий усидчивостью,
внимательностью и терпением может освоить гельминтологические методы ис-
следования. С другой стороны, овладевая ими, начинающие исследователи обя-
зательно приобретают указанные выше качества.
7.3. Этапы гельминтологического исследования
Гельминтологическое исследование включает в себя ряд этапов.
I. Подготовительный этап.
Выбор актуальной темы для исследования, постановка цели и задач.
Выбор объекта-хозяина, определение количества и размера выборок, био-
топа и сроков отлова.
Ознакомление (по литературным данным) с анатомо-физиологическими,
биологическими и экологическими особенностями объекта-хозяина, практикой
препарирования и гельминтологического исследования.
Подготовка оборудования, инструментов и материалов, приготовление
реактивов.
Отлов, транспортировка и сохранение объектов-хозяев.
II. Гельминтологическое вскрытие.
Усыпление и препарирование амфибии.
Поиск, сбор и фиксация гельминтов.
Регистрация и этикетирование паразитологического материала.
III. Камеральная обработка гельминтологического материала
.
Подготовка проб (промывка, окраска, дифференцировка, обезвоживание,
просветление) гельминтов к заключению в препарат.
Изготовление постоянных (тотальных) препаратов гельминтов.
IV. Видовая диагностика гельминтов
.
V. Статистическая обработка математических данных.
VI. Интерпретация и публикация данных.
Рассмотрим содержание вышеуказанных этапов и пунктов исследования
более подробно.
7.3.1. Подготовительный этап
Выбор актуальной темы и планирование исследования.
В нашей стране
изучением паразитов земноводных занимается очень ограниченное количество
специалистов, в связи с чем, любая информация о гельминтофауне этой группы
позвоночных хозяев практически из любого региона неизменно оказывается ак-
туальной. На первых порах начинающий исследователь может выбрать одну из
тем, подобных приведенным ниже. Естественно, выбор темы определяет цель,
задачи, вид и сроки отлова амфибий-хозяев, тип биотопа.
159
При определении планируемого объема материала для исследований,
необходимо исходить из следующих положений. Во-первых, в паразитологии
минимальным размером выборки хозяина принято считать 15 экз.
При таком
количестве обследованных животных обычно выявляется большинство (до 90–
95% фауны) видов гельминтов, свойственных данному хозяину в исследуемой
местности. Вероятность находки редких видов паразитов в известной степени
зависит от количества изученных особей хозяина, поэтому рекомендуется не
ограничиваться паразитологическим минимумом или единственной выборкой.
Во-вторых, все особи одной выборки должны быть отловлены в одном биотопе
(водоем, луг, лесной массив, урбоценоз и т.д.) в пределах 1–3 км, в одно время
(месяц, сезон) и быть примерно равного размера. В-третьих, при подготовке ис-
следования необходимо ориентироваться на численность и статус редкости ви-
да-хозяина в биоценозе. Рассмотрим основы планирования исследования на не-
скольких обычных темах.
Начинают исследования обычно с фаунистической тематики, например:
«Гельминтофауна травяной лягушки (любого другого вида или группы видов
земноводных) в г. Саранск (Республике Мордовия, Среднем Поволжье)». Эта
тема особенно актуальна, если исследования проводятся впервые. Цель: полу-
чить данные о составе и структуре гельминтофауны того или иного вида земно-
водных, зараженности их отдельными видами гельминтов в изучаемой местно-
сти. Для достижения данной цели нужно провести гельминтологическое вскры-
тие не менее 2–3 выборок хозяев, отловленных из нескольких биотопов в одной
местности (например, в разных районах города или региона, кварталах лесного
массива, берегах водоема и т.д.).
Более трудоемким вариантом фаунистического исследования служит тема
сравнительного анализа, например, «Гельминтофауна травяной и остромордой
лягушек при их обитании в одном биоценозе» или «Гельминтофауна травяной
лягушки в пойменном лесу и агроценозе». Соответственно, в процессе работы
потребуется исследовать несколько выборок амфибий разного вида из одного
биотопа или, напротив, животных одного вида из разных биотопов.
Гораздо больше усилий потребует от исследователя изучение изменений
гельминтофауны хозяина во времени, к примеру, по теме «Сезонная динамика
гельминтофауны остромордой лягушки». Цель работы: получить сведения о се-
зонной динамике состава и структуры гельминтов, зараженности хозяина их
отдельными видами. Для ее достижения потребуется вскрывать по выборке ам-
фибий раз в месяц в течение всего периода активности с мая (апреля) по сен-
тябрь (октябрь). Логическим продолжением изучения сезонной динамики мо-
жет послужить тема «Многолетняя динамика гельминтофауны остромордой ля-
гушки», для осуществления которой весь объем сезонной работы повторяют
ежегодно в течение 3–5 лет. Исследования по вышеуказанным темам проводят
в биоценозах со стабильно высокой численностью вида-хозяина.
По этому же принципу выполняют исследования, связанные с изучением
зависимости гельминтофауны от биологической (половозрастной) структуры
популяции хозяина, например, «Возрастные изменения гельминтофауны серой