ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 09.11.2023
Просмотров: 905
Скачиваний: 1
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Фаготипирование и дифференцировка бактериальных культур.
Эпидемиологические наблюдения – определение количества бактериофагов в водоемах позволяет оценить количество патогенных бактерий.
Применение с терапевтической целью. Применяют дизентерийные, сальмонеллезные, стафилококковые бактериофаги, строго специфическое действие бактериофагов позволяет отказаться от антибиотиков в некоторых случаях, т.е. снизить побочные действия от антибиотикотерапии.Фаги — вирусы бактерий. Профаги.Фаги – вирусы бактерий, обладающие способностью специфически проникать в бактериальные клетки, репродуцироваться в них и вызывать их растворение (лизис).Фаги имеют форму головастика или сперматозоида, некоторые – кубическую и нитевидную. Наиболее изучены крупные фаги, имеющие форму сперматозоида. Они состоят из вытянутой икосаэдрической головки и хвостового отростка.Внутри хвостового отростка имеется полый цилиндрический стержень, сообщающийся отверстием с головкой, снаружи – чехол, способный к сокращению. Хвостовой отросток заканчивается шестиугольной базальной пластинкой с короткими шипами, от которых отходят нитевидные структуры – фибриллы.Фаги состоят из двух основных химических компонентов – нуклеиновой кислоты (РНК или ДНК) и белка. Белки входят в состав капсида и во все структурные элементы хвостового отростка.Фаги более устойчивы к действию химических и физических факторов, чем бактерии.По механизму взаимодействия различают:1. Вирулентные фаги, проникнув в бактериальную клетку, автономно репродуцируются в ней и вызывают лизис бактерий. Процесс взаимодействия вирулентного фага с бактерией протекает в виде нескольких стадий и схож с процессом взаимодействия вирусов человека и животных с клеткой хозяина (адсорбция на клетке, проникновение в клетку, «раздевание» вируса, биосинтез компонентов вируса, формирование (сборка) вируса, выход вируса из клетки)Для фагов, имеющих хвостовой отросток с сокращающимся чехлом, процесс имеет особенности. Фаги адсорбируются при помощи фибрилл хвостового отростка. В результате активации фагового фермента АТФазы происходит сокращение чехла и внедрение стержня в клетку.
ДНК фага, содержащаяся в головке, проходит через полость хвостового стержня и активно впрыскивается в цитоплазму клетки. После биосинтеза фаговых компонентов и их самосборки в клетке происходит разрушение клеточной стенки, выход фагового потомства и лизис бактерии.2. Умеренные фаги лизируют не все клетки в популяции, с частью из них они вступают в симбиоз, в результате чего ДНК фага встраивается в хромосому бактерии. В таком случае геномом фага называют профаг. Профаг, ставший частью хромосомы клетки, при ее размножении реплицируется синхронно с геном бактерии, не вызывая ее лизиса, и передается по наследству от клетки к клетке. Биологическое явление симбиоза микробной клетки с умеренным фагом (профагом) называется лизогенией, а культура бактерий, содержащая профаг, называется лизогенной.Лизогенные культуры по своим основным свойствам не отличаются от исходных, но они невосприимчивы к повторному заражению гомологичным или близкородственным фагом и приобретают дополнительные свойства, которые находятся под контролем генов профага. Изменение свойств микроорганизмов под влиянием профага называется фаговой конверсией.Фаги используют в диагностике инфекционных болезней, применяют для лечения и профилактики инфекционных болезней, используют в генетической инженерии и биотехнологии. Вирусы. Морфология, свойства и состав.Вирусы — это мельчайшие микроорганизмы, относящиеся к царству Vira, не имеющие клеточного строения, белоксинтезирующей системы, содержащие только один тип нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК).
Они отличаются особым разобщенным (дисъюнктивным) способом размножения (репродукции): в клетке отдельно синтезируются нуклеиновые кислоты вирусов и их белки и затем происходит их сборка в вирусные частицы. Вирусы, являясь облигатными внутриклеточными паразитами, размножаются в цитоплазме или ядре клетки. Сформированная вирусная частица называется вирионом.Морфологию и структуру вирусов изучают с помощью электронного микроскопа, так как их размеры малы и сравнимы с толщиной оболочки бактерий.Вирусы имеют различную форму вирионов:
-
палочковидной (вирус табачной мозаики) -
пулевидной (вирус бешенства) -
сферической (вирусы полиомиелита, ВИЧ) -
в виде сперматозоида (многие бактериофаги).
-
просто устроенные (например, вирус полиомиелита) -
сложно устроенные (например, вирусы гриппа, кори) вирусы.
У сложно устроенных вирусов капсид окружен дополнительной липопротеидной оболочкой – суперкапсидом (производное мембранных структур клетки-хозяина), имеющей «шипы».Вирусы различают по типу симметрии капсида:
-
спиральный — обусловлен винтообразной структурой нуклеокапсида -
кубический— обусловлен образованием изометрически полого тела из капсида, содержащего вирусную нуклеиновую кислоту. -
сложный
-
семейство (название оканчивается на viridae) -
подсемейство (название оканчивается на virinae) -
род (название оканчивается на virus).
-
тип нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК), ее структура, количество нитей (одна или две), -
особенности воспроизводства вирусного генома; -
размер и морфология вирионов, количество капсомеров и тип симметрии; -
наличие суперкапсида; -
чувствительность к эфиру и дезоксихолату; -
место размножения в клетке; -
антигенные свойства и пр.
Другими необычными агентами, близкими к вирусам, являются вироиды – небольшие молекулы кольцевой, суперспирализованной РНК, не содержащие белка, вызывающие заболевания у растений.Вирусы взаимодействуют с клеткой по типам:
-
продуктивный тип, завершающийся образованием вирусного потомства; -
абортивный тип, не завершающийся образованием новых вирусных частиц, поскольку инфекционный процесс прерывается на одном из этапов; -
интефативный тип, или вирогения, характеризующийся встраиванием вирусной ДНК в хромосому клетки-хозяина.
-
адсорбция вируса на клетке; -
-проникновение вируса в клетку; -
«раздевание» вируса; -
биосинтез вирусных компонентов в клетке; -
формирование вирусов; -
выход вирусов из клетки.
Взаимодействие вируса с клеткой начинается с процесса адсорбции, т. е. прикрепления вирусов к поверхности клетки. Это высокоспецифический процесс. Вирус адсорбируется на определенных участках клеточной мембраны – так называемых рецепторах. Клеточные рецепторы могут иметь разную химическую природу, представляя собой белки, углеводные компоненты белков и липидов, липиды. Число специфических рецепторов на поверхности одной клетки колеблется от 104 до 105. Следовательно, на клетке могут адсорбироваться десятки и даже сотни вирусных частиц.Поверхностные структуры вируса, «узнающие» специфические клеточные рецепторы и взаимодействующие с ними, называются прикрепительными белками. Обычно эту функцию выполняет один из поверхностных белков капсида или суперкапсида. Пенентрантность клеточных рецепторов вирусным прикрепительным белкам имеет значение для возникновения инфекционного процесса в клетке.Способность вирусов избирательно поражать определенные клетки органов и тканей организма называют тропизмом вирусов (от греч. tropos – направление). Проникновение в клетку.
Существует два способа проникновения вирусов животных в клетку: виропексис и слияние вирусной оболочки с клеточной мембраной. При виропексисе после адсорбции вирусов происходят инвагинация (впячивание) участка клеточной мембраны и образование внутриклеточной вакуоли, которая содержит вирусную частицу. Вакуоль с вирусом может транспортироваться в любом направлении в разные участки цитоплазмы или ядро клетки. Процесс слияния осуществляется одним из поверхностных вирусных белков капсидной или суперкапсидной оболочки. По-видимому, оба механизма проникновения вируса в клетку не исключают, а дополняют друг друга.