Файл: РУКОВОДСТВО ПО ПСИХИАТРИИ 2 ТОМА.pdf

ная

 Тестируемые лимфоциты вносят в культуру К-562, инкубируют в

присутствии РНКазы, а затем оценивают уровень радиоактивного уридина, высво-

бодившегося из лизированных клеток-мишеней.

Для выявления

 используют рутинные серологические реакции,

среди которых особое место занимает реакция связывания комплемента. Она отно-

сится к сложным серологическим реакциям, в которых, кроме антигена и антитела,

участвует гемолитическая система, с помощью которой выявляется результат реак-

ции. Реакция протекает в две фазы: первая — взаимодействие антигена и антитела

с участием комплемента; вторая — выявление степени связывания комплемента, что

достигается добавлением гемолитической системы (эритроциты+гемолитическая сы-

воротка).

Антитимоцитарные (цитотоксические) антитела определяются с помощью ци-

тотоксического теста по методу Gorer и

 в модификации Б.Д.Брондза

(1964).

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ПСИХИЧЕСКИХ БОЛЕЗНЕЙ

Шизофрения. В

 годы иммунология шизофрении представляла собой

прежде всего инфекционную иммунологию. В эти годы разрабатывались в

основном инфекционные теории шизофрении [Рыбас

 Стащук М.Д., 1958;

Троян Г.А., Шильман P.M., 1958; Маллис Г.Ю., 1959; Чистович А.С., 1962;

 N., 1941; Rosenow E., 1948;

 V., 1958;

 W., Fi-

cischhacker H., 1958;]. Но они не подтвердились не только в прямых имму-

нологических экспериментах, но и в клинике.

На смену инфекционным гипотезам пришли представления о вирусной

этиологии шизофрении. Вирусная гипотеза шизофрении впервые была

сформулирована K.Menninger (1928) и E.Goodall (1932) после пандемии

гриппа и эпидемии летаргического энцефалита в 1918 г., когда было заре-

гистрировано большое количество шизофреноподобных психозов, связан-

ных с этими инфекциями. На основании данных тех лет было сделано

предположение, что шизофрения возникает в результате необычной реакции

заболевшего на известный вирус (что наблюдали во время упомянутой

эпидемии) или она вызывается еще не идентифицированным нейротропным

вирусом.

В последние годы появились исследования, в которых в качестве фак-

торов риска для шизофрении рассматривалась возможность контакта с ви-

русной инфекцией (в связи с эпидемией, инфекционными заболеваниями

братьев и сестер, рождением в зимнее время, скученностью проживания

семьи) в пренатальном периоде или в раннем детском возрасте

 R.H.,

 E.F., 1995]. Результаты таких исследований оказались неубедитель-

ными и весьма противоречивыми. В некоторых из них

 T. et

1998] предположение о том, что возникновение шизофрении может быть

связано с указанным контактом в пренатальном периоде не подтверждается

более определенно.

В рамках же собственно

 гипотезы разрабатывалось несколько

направлений. Согласно одному из них, вирус индуцирует изменение имму-

нологической реактивности больных шизофренией. Это соответствует нали-

чию в сыворотке крови больных антител к различным вирусам [Васильева

О.А., 1988; Libikova H., 1983]. Другое направление исследований предпола-

гало поиски доказательств присутствия вируса в ткани мозга больных ши-

199

зофренией [Морозов М.А., 1954; Морозов В.М., 1954, 1957; Востриков В.М.,

Ойфа

 1987]. В рамках третьего направления исследований изучался

цитотоксический эффект сыворотки крови и цереброспинальной жидкости

больных шизофренией (предположительно связанный с присутствием в ор-

ганизме больного вирусов) на различные тест-объекты в условиях in vivo и

in vitro [Вартанян М.Е., 1968; Baker H.F. et al., 1983]. Наконец, нельзя не

упомянуть об исследованиях, в основе которых лежит изучение взаимодей-

ствия "ген — вирусный агент", роль которого доказана при развитии полио-

миелита [Crow Т., 1987]. Результаты многих заслуживающих внимания в

этой области работ не получили подтверждения и пока прямых доказа-

тельств роли вирусов в этиологии и патогенезе шизофрении нет. Тем не

менее этот вопрос не снят полностью с повестки дня, особенно в свете

данных о медленных вирусах

 D.C., 1978].

В

 годах ряд работ был посвящен неспецифическому иммуни-

тету. Они были направлены в основном на проверку распространенного

мнения о том, что реактивность у больных шизофренией, в том числе

иммунологическая, снижена. Но полученные данные оказались крайне про-

тиворечивыми [Эберт

 Шапиро

 1934; Плессо

 1941; Керби-

ков

 1956, 1958, 1960; Гуревич

 1967; Константинова Т.П., 1968, и

др.]. Оказалось, что иммунологическая реактивность может быть повышена

при одних формах психоза и снижена при других. Это зависит от стадии

болезни, ее формы, лечения и индивидуальных особенностей пациента, но

не определяет клинические и биологические особенности шизофрении как

болезни в целом.

Более ценной в научном отношении оказалась появившаяся в 60-е годы

аутоиммунная гипотеза шизофрении. Основой для формулирования этой

гипотезы послужили данные отечественных и американских исследователей

о наличии в крови больных шизофренией антител к компонентам мозга —

противомозговых антител.

Первые исследования процессов аутоиммунизации к антигенам нервной

ткани относятся к началу XX в. Мысль о возможной роли явлений аутоим-

мунитета при психических заболеваниях принадлежит В.К.Хорошко (1912).

На основе изучения антигенных свойств нервной ткани он предположил,

что при некоторых условиях (травма, инфекция) компоненты мозговой

ткани человека могут стать аутоантигенами и вызвать образование аутоан-

тител, которые он называл "нейроцитотоксинами". Предположения о роли

аутоиммунизации в развитии психических болезней высказывали также

Е.К.Краснушкин (1920) и П.Е.Снесарев (1934). Однако методический уро-

вень исследований тех лет не позволял развить эти идеи.

Лишь в

 годы XX в. были получены факты, подтверждающие

существенную роль аутоиммунных процессов в патогенезе шизофрении.

Главный из этих фактов — появление в крови мозговых антигенов и антител

к мозговой ткани [Кузнецова

 Семенов С.Ф., 1961; Вартанян М.Е.,

1968; Коляскина

 Кушнер С.Г., 1969, 1972; Попова Н.Н., 1969;

 H., 1937, 1939; Koizumi S. et al., 1956, 1958; Jezkova Z., Scalickova

1961; Fessel W., 1962; Heath R. et al., 1962, 1970]. ЭТИ данные были под-

тверждены по меньшей мере в двух десятках исследований, проведенных в

различных лабораториях. Появились также доказательства, что образование

противомозговых антител не обусловлено присутствием в организме психо-

тропных препаратов и их метаболитов.

В связи с выявлением у больных шизофренией в крови мозговых

антигенов и противомозговых антител возникает вопрос о возможности

200

отнесения шизофрении к аутоиммунным заболеваниям. В классическом

варианте об аутоиммунной природе той или иной болезни следует судить

по ряду критериев: 1) аутоантитела или сенсибилизированные лимфоциты

должны обнаруживаться во всех случаях заболевания, хотя бы на отдельных

стадиях его развития (при этом наличие антител или сенсибилизированных

лимфоцитов должно быть доказано в разных реакциях с установлением

иммуноглобулиновой природы антител); 2) должен быть обнаружен и оха-

рактеризован аутоантиген (или аутоантигены), вызывающий аутоиммунную

реакцию; 3) болезнь должна быть смоделирована экспериментально с по-

мощью иммунологических методов; 4) должна быть показана возможность

переноса болезни или ведущего патологического синдрома в другой орга-

низм посредством сывороточных антител или лимфоидных клеток, взятых

из пораженного организма.

С этих позиций шизофрению нельзя с уверенностью отнести к аутоим-

мунным заболеваниям, поэтому правильнее говорить о шизофрении как о

болезни, сопровождающейся аутоиммунными реакциями, — об аутоиммун-

ном компоненте ее патогенеза.

К настоящему времени сформировались два главных направления в

иммунологии шизофрении: изучение роли мозгоспецифических белков в

механизмах формирования аутоиммунных реакций и исследование особен-

ностей иммунологически компетентных клеток при этом заболевании.

Изучение мозгоспецифических белков. Наиболее плодотворными при изу-

чении белков мозга оказались методы современной иммунохимии и имму-

ногистохимии, которые позволяют идентифицировать отдельные белки в

различных структурах нервной системы на тканевом, клеточном и субкле-

точном уровнях [Бурбаева Г.Ш., 1970, 1971; Старостина М.В., Свиридов

СМ., 1979]. Выделение таких мозгоспецифических белков и использование

их в соответствующих иммунологических реакциях создают основу для

выявления не только мозговых антигенов, запускающих аутоиммунные ре-

акции, но и для локализации места действия противомозговых аутоантител.

В этих исследованиях большое значение имеет степень очистки антигенных

препаратов [Игнатов С.А. и др., 1977; Чехонин

 1990, 1991].

Ранее в серологических реакциях в качестве антигенов применяли пре-

параты, полученные при низкоскоростном центрифугировании (до 10 000 g)

гомогената мозговой ткани. Такие препараты, естественно, содержали как

мембранные, так и водорастворимые антигены. Затем, используя центрифу-

гирование при 100 000 g, в качестве антигенных препаратов стали исполь-

зовать фракции и цельный экстракт водорастворимых белков мозговой

ткани. Эти антигенные препараты уже не содержали связанных с мембра-

нами антигенных детерминант. Было установлено, что более чистые пре-

параты антигенов способствуют повышению частоты выявления противо-

мозговых антител в сыворотке крови больных. Заслуживает внимания также

тот факт, что при использовании более чистых препаратов мозгоспецифи-

ческих антигенов можно выявить иммунологические различия между от-

дельными заболеваниями, например между неврологическими и психичес-

кими. Так, при шизофрении противомозговые антитела обнаруживаются

более часто к белкам 10-й фракции, содержащей мозгоспецифические белки

14-3-2, 10-40-4,

 и

 к которой при рассеян-

ном и боковом амиотрофическом склерозе антитела не выявляются или

выявляются очень редко и в низком титре. Наоборот, при обследовании

неврологических больных наиболее активная в иммунологических реакциях

2-я фракция, которая содержит основные белки, оказывается неактивной у

201

больных шизофренией [Коляскина Г.И., Бурбаева

 1979; Игнатов С.А.,

1985].

Некоторые исследователи, используя иммуноферментный метод и моз-

госпецифические белки и ряд гликопротеидов в качестве антигенов, пришли

к выводу, что положительная реакция на эти антигены при тестировании

сыворотки крови больных шизофренией может рассматриваться как маркер

поломки гематоэнцефалического барьера при этом заболевании [Чехонин

 1991].

В последние годы внимание исследователей стали привлекать

 антитела. Открытие общих антигенов в мозге и вилочковой железе

человека и животных [Reif A.,

 1964] послужило толчком для иссле-

дований, связанных с изучением антитимических антител при шизофрении.

Было установлено, что такие антитела обнаруживаются в сыворотке крови

как у больных шизофренией, так и у здоровых людей, но их уровень у

больных оказался значительно выше [Лурия Е.А., Домашнева

 1974;

Мазнина Т.П., 1977; Коляскина

 и др., 1980]. Позднее было выявлено,

что уровень антитимических антител зависит от длительности заболевания:

уровень их и частота выявления повышены при длительности заболевания

до 5 лет; а большим срокам болезни, как правило, соответствуют низкие

уровни антител и низкая частота их обнаружения. Иными словами, чем

меньше длительность шизофренического процесса, тем больше вероятность

выявления высокого уровня антитимических антител. Сопоставление часто-

ты и времени появления противомозговых и антитимических антител в

сыворотке крови больных шизофренией позволило предположить, что в

организме больного сначала появляются антитимические антитела, а затем

противомозговые.

Антитимической активностью обладают IgG,

 и

 при этом в

сыворотке крови больных шизофренией концентрация антител IgG и IgM

повышена по сравнению с таковой у здоровых. Было установлено, что

уровень антител IgG и IgA является весьма вариабельной характеристикой

и зависит главным образом от внешних факторов; уровень генетического

детерминирования в этом случае не превышает 40 %. С этой точки зрения,

повышение концентрации антитимического IgG в сыворотке крови больных

шизофренией следует рассматривать как отражение текущего болезненного

процесса. Но концентрация антитимического IgM детерминируется генети-

ческими факторами, ибо коэффициент наследования в этом случае равен

80 %. В связи с этим есть основания предполагать, что повышение содер-

жания антитимического IgM является компонентом наследственного пред-

расположения к развитию шизофрении и существенным фактором, опреде-

ляющим манифестацию заболевания и особенности его течения.

Исследование иммунологически компетентных клеток (лимфоцитов) боль-

ных. В начале 60-х годов были опубликованы данные о существовании в

периферической крови больных морфологически измененных лимфоцитов

или атипичных лимфоцитов. Речь идет об изменении структуры хроматина

их ядра [Kamp

 1962; Fessel W.J., Hirata-Hibi M., 1963]. В современных

работах во многом повторяются ранее полученные результаты, но отмеча-

ются существенные клинико-иммунологические корреляции [Hirata-Hibi M.

et

 1982, 1987; Takahahi К. et al., 1985]. В частности, в отличие от ранее

полученных данных о появлении атипичных клеток преимущественно у

пациентов, находящихся в остром психотическом состоянии, т.е. в начале

болезни или ее обострении, не обнаружено какой-либо связи между появ-

лением атипичных лимфоцитов и этапом течения шизофрении [DeLisi L.E.

202

et al., 1983]. Причины появления в крови больных шизофренией лимфоци-

тов с измененной морфологией до сих пор не ясны. Существует мнение,

что это связано с аутоиммунным процессом. Эта связь вполне вероятна,

поскольку некоторые авторы находили атипичные лимфоциты при таких

классических аутоиммунных заболеваниях, как ревматоидный артрит, миас-

тения (myasthenia gravis), системная красная волчанка [Hirata-Hibi M. et al.,

1987]. Другие исследователи предполагают, что появление атипичных лим-

фоцитов при шизофрении связано с эффектом психотропных препаратов,

используемых для лечения больных [Fieve R.R.,

 В., Little В., 1966].

 и соавт. (1982) отрицают это предположение, основываясь на

том, что атипичные клетки обнаруживаются не только у леченых больных,

но и у их здоровых родственников.

Важным разделом изучения состояния иммунологически компетентных

клеток при шизофрении явилось исследование количественных соотноше-

ний и функциональных особенностей Т-лимфоцитов и их субпопуляций.

Данные исследований крайне противоречивы. Одной из причин неодно-

значности полученных результатов может быть различие в клинической

выборке обследуемых больных. Следует отметить недостаточно дифферен-

цированный подход к клинической характеристике больных: больные с

хроническим течением и находящиеся в остром психотическом состоянии

иногда анализируются как одна группа, при этом часто не учитывается

клиническое состояние больного на момент обследования (приступ, ремис-

сия). Не принимаются во внимание различные стрессовые ситуации (напри-

мер, госпитализация), которые, как известно, могут оказывать значительное

влияние на функционирование иммунной системы.

Число Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-супрессоров у больных шизофре-

нией в целом не отличается от этих показателей у здоровых. Отличия

выявляются при разделении общей группы больных шизофренией по кли-

ническим формам заболевания. В группе больных параноидной шизофре-

нией были выявлены увеличение числа Т-хелперов и уменьшение числа

Т-супрессоров, в группе больных малопрогредиентной шизофренией обна-

ружено уменьшение общего числа Т-лимфоцитов; число же клеток-киллеров

у больных всех групп не отличалось от такового у здоровых.

При изучении функционального состояния Т-лимфоцитов у больных

шизофренией обнаружено снижение пролиферативной активности Т-лим-

фоцитов в ответ на стимуляцию неспецифическими митогенами [Коляскина

 1974; Фетисова Т.К., 1978; Коляскина

 Бурбаева

 1979]. Более того, активным индуктором сниженной пролиферативной

активности Т-лимфоцитов оказалась сыворотка крови больного и присутст-

вовавшие в ней антитимические антитела [Бабаян

 1977; Пивоварова

 Мазнина Т.П., 1977]. Упомянутые авторы в модельных опытах in vitro

продемонстрировали тормозящее действие сыворотки крови больного ши-

зофренией на лимфоциты периферической крови здорового человека: про-

лиферативная активность этих клеток в ответ на неспецифические митогены

(фитогемагглютинин, конканавалин А) в присутствии сыворотки крови

больного шизофренией оказалась достоверно сниженной по сравнению с

таковой в присутствии аутологичной сыворотки. Это дало основание пред-

положить, что в снижении пролиферативной активности лимфоцитов при

шизофрении определенную роль играют антитимические антитела. Такие

антитела, активно взаимодействуя с антигенами

 могут служить

препятствием для взаимодействия митогена с поверхностными структурами

этих же клеток. Аналогичное действие могут оказывать и противомозговые

203