ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 08.04.2024
Просмотров: 54
Скачиваний: 0
Современные подходы к исследованию системы гемостаза
Гильманов Александр Жанович
Кафедра лабораторной диагностики ИПО Башкирского медицинского университета
г. Уфа
СИСТЕМА ГЕМОСТАЗА (функции)
В неповрежденных сосудах - поддержание теку-щей крови в жидком состоянии.
При повреждении сосуда:
остановка кровотечения (образование тромба),
участие в регенерации сосудистой стенки.
Основные компоненты системы гемостаза:
1.Сосудистая стенка.
2.Тромбоциты.
3.Плазменные белки систем свертывания и противосвертывания.
МЕХАНИЗМЫ (ЭТАПЫ) ГЕМОСТАЗА
1.Сосудисто-тромбоцитарный (микроциркуляторный) гемостаз.
2.Коагуляционный (плазменный, макроциркуляторный) гемостаз.
3.Фибринолиз, регенерация тканей
ТРОМБОЦИТАРНЫЙ ГЕМОСТАЗ
Адгезия |
Высвобождение |
(коллаген – vWF – ТЦ) |
ADP |
|
~ 3 сек
Агрегация
~ 10 сек
Белый ТЦ тромб
с фибрином
~ 5 мин
Пути активации плазменного гемостаза
Общий путь
X
+V
Образование тромбина - ключевая реакция гемостаза
II
Образование фибрина
I
|
|
|
|
|
|
Т К А Н И |
|
КАСКАДНЫЙ МЕХАНИЗМ СВЕРТЫВАНИЯ |
|
|
|||||
контактная поверхность: |
(-) заряд, коллаген, … |
|
тканевой фактор |
||||
|
|
|
|
|
|
||
XII |
XIIa |
|
|
|
(TF) |
|
|
HMWK |
PK |
|
|
VIII |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
тромбин |
X |
|
|
|
XI |
|
XIа |
|
|
|
|
|
Ca2+ |
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
Ca2+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
IX |
|
IXa·VIIIa·Ca2+ |
|
VIIa·TF·Ca2+ |
VII |
|
|
Ca2+ |
|
|
|||
|
|
на поверхности ТЦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
XIII |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Ca2+ |
|
|
ретракция |
|
|
|
|
||||
сгустка |
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
XIIIa |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
фибрин |
|
|
|
|
фибрин- |
|
||
нераств. |
|
|
|
|
полимер |
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Xa · Va · Ca2+ |
|
|
|
|
||
V |
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
Xa |
|||||
|
|
Протромбиназа |
|
||||||
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
на поверхности ТЦ |
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
IIa |
|
II |
||||
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
тромбин |
протромбин |
фибрин- Фибриноген ( ф.I ) мономер
ОБРАЗОВАНИЕ ФИБРИНА
|
Фибриноген (A -B - )2 |
тромбин |
|
Фибрин-мономер ( - - )2 |
|||
D |
E |
D |
D |
E |
D |
||
|
ФП А |
ФП B |
|
«липкие» |
ФП А, B |
участки |
D E D D E D D D E D D E D D E D
DE-связи (самопроизвольно)
Фибрин-полимер растворимый
D D E D D E D D E D E D D E D D E D D
Фибрин-полимер нераств. |
(ф.XIIIa) |
|
DD-связи ( - -кросс-связи) |
||
|
ПРОТИВОСВЕРТЫВАЮЩАЯ СИСТЕМА
Антикоагулянты - ограничивают скорость свертывания, предотвращают образование сгустка.
АТ - гепарин , ПрС+ПрS, TFPI, 1-AT, 2-МГ, 2-АП…
Система фибринолиза – способствует растворению образовавшегося фибринового сгустка.
Плазминоген -> плазмин (t-PA, PAI-1)
Система фибринолиза
ЭНДОТЕЛИЙ МЦ, МКЦ Фибрин
PAI-1 |
|
|
Внешняя |
|
tPA |
активация |
|
|
- |
||
|
|
||
|
|
|
uPA
Плазминоген Плазмин
печень |
XIIa, XIa, |
- |
|
ПДФ |
|||
|
кинины |
||
почки |
|
||
|
|
||
|
Внутренняя |
|
|
|
активация |
|
|
|
|
клетки |
|
Активный ПрС |
Инактиваторы РЭС |
||
|
2-АП, 2-МГ, |
||
ингибирует PAI-1 |
|
||
=> стимул. фибринолиз |
1-АТ, AT-III |
активация
кининов
активация
С1,С3, С8-9 ,
лизис Эр,Тц
разрушение
V, VIII, IX, XI
разрушение СТГ, АКТГ, инсулина…
Последовательность процессов
в системе гемостаза
РЕНАМ
ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕМОСТАЗА
I этап (клинический) - тщательный сбор жалоб и анамнеза
II этап (лабораторный):
а) скрининговые исследования (коагуляционное и тромбоцитарное звенья гемостаза)
б) уточняющие тесты (в зависимости от клиники и результатов лабораторного скрининга)
ПРЕАНАЛИТИЧЕСКИЙ ЭТАП
Адекватное назначение анализов, подбор информативных методик
Подготовка пациента к исследованию:
Учет проведенных лечебно-диагностических процедур
Учет полученных лекарственных препаратов, влияющих на гемостаз (особенно инфузий и трансфузий).
Взятие крови, транспортировка в лабораторию, хранение образцов / проб.
Влияние внутривенных инфузий и трансфузий на результаты анализов
Препараты |
Аналиты |
Изменения |
Комментарии |
|
|
|
|
|
|
|
Тромбиновое время, АЧТВ |
|
Замедл. на 5-10 с |
|
|
|
|
|
|
Декстраны |
Мочевина |
|
Разведение |
|
|
|
|
||
Общий белок (биур.метод) |
Ложное |
Хлопья, муть |
||
|
||||
|
|
|
|
|
|
Группа крови |
Псевдоагглютинация |
||
|
|
|
||
-глобулин |
Серол. реакции (IgM, IgG) |
Ложно(+) результаты |
||
|
|
|
|
|
Электролиты |
Na, K, Mg, Ca, … |
|
Введенные в-ва |
|
|
|
|
|
|
|
Глюкоза |
|
Введенные в-ва |
|
|
|
|
|
|
Глюкоза |
Фосфат, калий |
|
Выброс инсулина |
|
|
|
|
|
|
|
Амилаза, билирубин |
до 15% |
Особ. у новорожд. |
|
|
|
|
|
|
|
рН крови (метаб.ацидоз), калий , ЛДГ , своб.Hb (гемолиз) |
|||
Плазма, |
|
|
|
|
|
|
Связывание Са, |
||
ЭР-масса |
|
|
||
Коагуляционные тесты |
восполнение |
|||
|
|
|
факторов |
|
|
|
|
|
|
Гепарин |
Коагуляционные тесты |
|
Замедление |
|
свертывания |
||||
|
|
|
||
|
|
|
|
Взятие крови из вены
Утром, натощак, широкой иглой (21G, >0,7 мм)
«Щадящая» венепункция, наложение жгута - ≤ 1 мин (иначе фибринолиз), отбрасывание первых 2-3 мл крови (или использование ее для получ-я сыворотки).
Пластиковая или силиконированная (хуже) пробирка, вакуумные системы.
Соотношение кровь : АК = 9:1.
При HCT = 35-50% - 0,5 мл цитрата + кровь до 5 мл.
При HCT <35% или >50% - расчет по формуле Ингрема:
V цитрата (мл) V пробирки (мл) 100 HCT (%) 595 HCT (%)
Цитрат – 3,8 г Na3С6Н3О7 5,5Н2О или 3,2 г Na3С6Н3О7
2Н2О в 100 мл воды, устойчив при +4оС ≤ 1 нед
Получение плазмы
Тщательное, но осторожное перемешивание крови с цитратом.
Центрифугирование для получения богатой ТЦ плазмы - 150 g / 5 мин при комнатной to. Сразу после ЦФ - перенос плазмы в пластиковые пробирки пипеткой с пластиковым наконечником.
Замораживание не допускается.
Центрифугирование для получения бедной ТЦ плаз-
мы (БТП) – 1700-1900 g / 15 мин при комнатной to.
Для исследования ВА – двукратное ЦФ.
Отделение плазмы от осадка – в течение 1 ч после взятия крови, перенос плазмы в пластиковые или силиконированные пробирки пипеткой с пластиковым наконечником.
Вакуумные пробирки для коагулологии
Наполнитель |
Р-р цитрата натрия |
Принцип действия |
Антикоагулянт, |
|
связывающий Ca2+ |
Цвет крышки |
Голубой |
Концентрация 0.105 моль/л - 3.13% 0.109 моль/л - 3.20% 0.129 моль/л - 3.80%
Наполнение кровью - до отметки (1:9)
Размеры пробирок |
10x64; 13x75; 13x100; 16x100 мм |
Объемы пробирок |
1.8, 2.7, 4.5, 6, 7, 10 мл |
ПРОБИРКИ НАПОЛНЯТЬ ДО ОБОЗНАЧЕННОГО ОБЪЕМА !!!