ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 08.04.2024
Просмотров: 237
Скачиваний: 0
Современные подходы к исследованию системы гемостаза
Гильманов Александр Жанович
Кафедра лабораторной диагностики ИПО Башкирского медицинского университета
г. Уфа
СИСТЕМА ГЕМОСТАЗА (функции)
В неповрежденных сосудах - поддержание теку-щей крови в жидком состоянии.
При повреждении сосуда:
остановка кровотечения (образование тромба),
участие в регенерации сосудистой стенки.
Основные компоненты системы гемостаза:
1.Сосудистая стенка.
2.Тромбоциты.
3.Плазменные белки систем свертывания и противосвертывания.
МЕХАНИЗМЫ (ЭТАПЫ) ГЕМОСТАЗА
1.Сосудисто-тромбоцитарный (микроциркуляторный) гемостаз.
2.Коагуляционный (плазменный, макроциркуляторный) гемостаз.
3.Фибринолиз, регенерация тканей
ТРОМБОЦИТАРНЫЙ ГЕМОСТАЗ
Адгезия |
Высвобождение |
(коллаген – vWF – ТЦ) |
ADP |
~ 3 сек
Агрегация
~ 10 сек
Белый ТЦ тромб
с фибрином
~ 5 мин
Пути активации плазменного гемостаза
Общий путь
X
+V
Образование тромбина - ключевая реакция гемостаза
II
Образование фибрина
I
Т К А Н И |
|||||||
КАСКАДНЫЙ МЕХАНИЗМ СВЕРТЫВАНИЯ |
|||||||
контактная поверхность: |
(-) заряд, коллаген, … |
тканевой фактор |
|||||
XII |
XIIa |
(TF) |
|||||
HMWK |
PK |
VIII |
|||||
тромбин |
X |
||||||
XI |
XIа |
||||||
Ca2+ |
|||||||
Ca2+ |
|||||||
IX |
IXa·VIIIa·Ca2+ |
VIIa·TF·Ca2+ |
VII |
||||
Ca2+ |
|||||||
на поверхности ТЦ |
|||||||
XIII |
||||||||
Ca2+ |
||||||||
ретракция |
||||||||
сгустка |
||||||||
XIIIa |
||||||||
фибрин |
фибрин- |
|||||||
нераств. |
полимер |
|||||||
Xa · Va · Ca2+ |
|||||||||
V |
|||||||||
Xa |
|||||||||
Протромбиназа |
|||||||||
на поверхности ТЦ |
|||||||||
IIa |
II |
||||||||
тромбин |
протромбин |
||||||||
фибрин- Фибриноген ( ф.I ) мономер
ОБРАЗОВАНИЕ ФИБРИНА
Фибриноген (A -B - )2 |
тромбин |
Фибрин-мономер ( - - )2 |
|||||
D |
E |
D |
D |
E |
D |
||
ФП А |
ФП B |
«липкие» |
|
ФП А, B |
участки |
D E D D E D D D E D D E D D E D
DE-связи (самопроизвольно)
Фибрин-полимер растворимый
D D E D D E D D E D E D D E D D E D D
Фибрин-полимер нераств. |
(ф.XIIIa) |
|
DD-связи ( - -кросс-связи) |
||
ПРОТИВОСВЕРТЫВАЮЩАЯ СИСТЕМА
Антикоагулянты - ограничивают скорость свертывания, предотвращают образование сгустка.
АТ - гепарин , ПрС+ПрS, TFPI, 1-AT, 2-МГ, 2-АП…
Система фибринолиза – способствует растворению образовавшегося фибринового сгустка.
Плазминоген -> плазмин (t-PA, PAI-1)
Система фибринолиза
ЭНДОТЕЛИЙ МЦ, МКЦ Фибрин
PAI-1 |
Внешняя |
||
tPA |
активация |
||
- |
|||
uPA
Плазминоген Плазмин
печень |
XIIa, XIa, |
- |
|
ПДФ |
|||
кинины |
|||
почки |
|||
Внутренняя |
|||
активация |
|||
клетки |
|||
Активный ПрС |
Инактиваторы РЭС |
||
2-АП, 2-МГ, |
|||
ингибирует PAI-1 |
|||
=> стимул. фибринолиз |
1-АТ, AT-III |
||
активация
кининов
активация
С1,С3, С8-9 ,
лизис Эр,Тц
разрушение
V, VIII, IX, XI
разрушение СТГ, АКТГ, инсулина…
Последовательность процессов
в системе гемостаза
РЕНАМ
ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕМОСТАЗА
I этап (клинический) - тщательный сбор жалоб и анамнеза
II этап (лабораторный):
а) скрининговые исследования (коагуляционное и тромбоцитарное звенья гемостаза)
б) уточняющие тесты (в зависимости от клиники и результатов лабораторного скрининга)
ПРЕАНАЛИТИЧЕСКИЙ ЭТАП
Адекватное назначение анализов, подбор информативных методик
Подготовка пациента к исследованию:
Учет проведенных лечебно-диагностических процедур
Учет полученных лекарственных препаратов, влияющих на гемостаз (особенно инфузий и трансфузий).
Взятие крови, транспортировка в лабораторию, хранение образцов / проб.
Влияние внутривенных инфузий и трансфузий на результаты анализов
Препараты |
Аналиты |
Изменения |
Комментарии |
|
Тромбиновое время, АЧТВ |
Замедл. на 5-10 с |
|||
Декстраны |
Мочевина |
Разведение |
||
Общий белок (биур.метод) |
Ложное |
Хлопья, муть |
||
Группа крови |
Псевдоагглютинация |
|||
-глобулин |
Серол. реакции (IgM, IgG) |
Ложно(+) результаты |
||
Электролиты |
Na, K, Mg, Ca, … |
Введенные в-ва |
||
Глюкоза |
Введенные в-ва |
|||
Глюкоза |
Фосфат, калий |
Выброс инсулина |
||
Амилаза, билирубин |
до 15% |
Особ. у новорожд. |
||
рН крови (метаб.ацидоз), калий , ЛДГ , своб.Hb (гемолиз) |
||||
Плазма, |
||||
Связывание Са, |
||||
ЭР-масса |
||||
Коагуляционные тесты |
восполнение |
|||
факторов |
||||
Гепарин |
Коагуляционные тесты |
Замедление |
||
свертывания |
||||
Взятие крови из вены
Утром, натощак, широкой иглой (21G, >0,7 мм)
«Щадящая» венепункция, наложение жгута - ≤ 1 мин (иначе фибринолиз), отбрасывание первых 2-3 мл крови (или использование ее для получ-я сыворотки).
Пластиковая или силиконированная (хуже) пробирка, вакуумные системы.
Соотношение кровь : АК = 9:1.
При HCT = 35-50% - 0,5 мл цитрата + кровь до 5 мл.
При HCT <35% или >50% - расчет по формуле Ингрема:
V цитрата (мл) V пробирки (мл) 100 HCT (%) 595 HCT (%)
Цитрат – 3,8 г Na3С6Н3О7 5,5Н2О или 3,2 г Na3С6Н3О7
2Н2О в 100 мл воды, устойчив при +4оС ≤ 1 нед
Получение плазмы
Тщательное, но осторожное перемешивание крови с цитратом.
Центрифугирование для получения богатой ТЦ плазмы - 150 g / 5 мин при комнатной to. Сразу после ЦФ - перенос плазмы в пластиковые пробирки пипеткой с пластиковым наконечником.
Замораживание не допускается.
Центрифугирование для получения бедной ТЦ плаз-
мы (БТП) – 1700-1900 g / 15 мин при комнатной to.
Для исследования ВА – двукратное ЦФ.
Отделение плазмы от осадка – в течение 1 ч после взятия крови, перенос плазмы в пластиковые или силиконированные пробирки пипеткой с пластиковым наконечником.
Вакуумные пробирки для коагулологии
Наполнитель |
Р-р цитрата натрия |
Принцип действия |
Антикоагулянт, |
связывающий Ca2+ |
|
Цвет крышки |
Голубой |
Концентрация 0.105 моль/л - 3.13% 0.109 моль/л - 3.20% 0.129 моль/л - 3.80%
Наполнение кровью - до отметки (1:9)
Размеры пробирок |
10x64; 13x75; 13x100; 16x100 мм |
Объемы пробирок |
1.8, 2.7, 4.5, 6, 7, 10 мл |
ПРОБИРКИ НАПОЛНЯТЬ ДО ОБОЗНАЧЕННОГО ОБЪЕМА !!!