ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 08.04.2024

Просмотров: 54

Скачиваний: 0

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.

Современные подходы к исследованию системы гемостаза

Гильманов Александр Жанович

Кафедра лабораторной диагностики ИПО Башкирского медицинского университета

г. Уфа

СИСТЕМА ГЕМОСТАЗА (функции)

В неповрежденных сосудах - поддержание теку-щей крови в жидком состоянии.

При повреждении сосуда:

остановка кровотечения (образование тромба),

участие в регенерации сосудистой стенки.

Основные компоненты системы гемостаза:

1.Сосудистая стенка.

2.Тромбоциты.

3.Плазменные белки систем свертывания и противосвертывания.

МЕХАНИЗМЫ (ЭТАПЫ) ГЕМОСТАЗА

1.Сосудисто-тромбоцитарный (микроциркуляторный) гемостаз.

2.Коагуляционный (плазменный, макроциркуляторный) гемостаз.

3.Фибринолиз, регенерация тканей

ТРОМБОЦИТАРНЫЙ ГЕМОСТАЗ

Адгезия

Высвобождение

(коллаген – vWF – ТЦ)

ADP

 

~ 3 сек

Агрегация

~ 10 сек

Белый ТЦ тромб

с фибрином

~ 5 мин

Пути активации плазменного гемостаза

Общий путь

X

+V

Образование тромбина - ключевая реакция гемостаза

II

Образование фибрина

I

 

 

 

 

 

 

Т К А Н И

 

КАСКАДНЫЙ МЕХАНИЗМ СВЕРТЫВАНИЯ

 

 

контактная поверхность:

(-) заряд, коллаген, …

 

тканевой фактор

 

 

 

 

 

 

XII

XIIa

 

 

 

(TF)

 

HMWK

PK

 

 

VIII

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

тромбин

X

 

 

 

XI

 

XIа

 

 

 

 

Ca2+

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Ca2+

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

IX

 

IXa·VIIIa·Ca2+

 

VIIa·TF·Ca2+

VII

 

 

Ca2+

 

 

 

 

на поверхности ТЦ

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

XIII

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Ca2+

 

 

ретракция

 

 

 

 

сгустка

 

 

 

 

 

 

 

 

 

XIIIa

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

фибрин

 

 

 

 

фибрин-

 

нераств.

 

 

 

 

полимер

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Xa · Va · Ca2+

 

 

 

 

V

 

 

 

 

 

 

 

 

Xa

 

 

Протромбиназа

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

на поверхности ТЦ

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

IIa

 

II

 

 

 

 

 

 

 

 

 

тромбин

протромбин

фибрин- Фибриноген ( ф.I ) мономер


ОБРАЗОВАНИЕ ФИБРИНА

 

Фибриноген (A -B - )2

тромбин

 

Фибрин-мономер ( - - )2

D

E

D

D

E

D

 

ФП А

ФП B

 

«липкие»

ФП А, B

участки

D E D D E D D D E D D E D D E D

DE-связи (самопроизвольно)

Фибрин-полимер растворимый

D D E D D E D D E D E D D E D D E D D

Фибрин-полимер нераств.

(ф.XIIIa)

DD-связи ( - -кросс-связи)

 

ПРОТИВОСВЕРТЫВАЮЩАЯ СИСТЕМА

Антикоагулянты - ограничивают скорость свертывания, предотвращают образование сгустка.

АТ - гепарин , ПрС+ПрS, TFPI, 1-AT, 2-МГ, 2-АП…

Система фибринолиза – способствует растворению образовавшегося фибринового сгустка.

Плазминоген -> плазмин (t-PA, PAI-1)

Система фибринолиза

ЭНДОТЕЛИЙ МЦ, МКЦ Фибрин

PAI-1

 

 

Внешняя

 

tPA

активация

 

-

 

 

 

 

 

uPA

Плазминоген Плазмин

печень

XIIa, XIa,

-

ПДФ

 

кинины

почки

 

 

 

 

Внутренняя

 

 

активация

 

 

 

клетки

Активный ПрС

Инактиваторы РЭС

 

2-АП, 2-МГ,

ингибирует PAI-1

 

=> стимул. фибринолиз

1-АТ, AT-III

активация

кининов

активация

С13, С8-9 ,

лизис Эр,Тц

разрушение

V, VIII, IX, XI

разрушение СТГ, АКТГ, инсулина…



Последовательность процессов

в системе гемостаза

РЕНАМ

ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕМОСТАЗА

I этап (клинический) - тщательный сбор жалоб и анамнеза

II этап (лабораторный):

а) скрининговые исследования (коагуляционное и тромбоцитарное звенья гемостаза)

б) уточняющие тесты (в зависимости от клиники и результатов лабораторного скрининга)

ПРЕАНАЛИТИЧЕСКИЙ ЭТАП

Адекватное назначение анализов, подбор информативных методик

Подготовка пациента к исследованию:

Учет проведенных лечебно-диагностических процедур

Учет полученных лекарственных препаратов, влияющих на гемостаз (особенно инфузий и трансфузий).

Взятие крови, транспортировка в лабораторию, хранение образцов / проб.

Влияние внутривенных инфузий и трансфузий на результаты анализов

Препараты

Аналиты

Изменения

Комментарии

 

 

 

 

 

Тромбиновое время, АЧТВ

 

Замедл. на 5-10 с

 

 

 

 

Декстраны

Мочевина

 

Разведение

 

 

 

Общий белок (биур.метод)

Ложное

Хлопья, муть

 

 

 

 

 

 

Группа крови

Псевдоагглютинация

 

 

 

-глобулин

Серол. реакции (IgM, IgG)

Ложно(+) результаты

 

 

 

 

Электролиты

Na, K, Mg, Ca, …

 

Введенные в-ва

 

 

 

 

 

Глюкоза

 

Введенные в-ва

 

 

 

 

Глюкоза

Фосфат, калий

 

Выброс инсулина

 

 

 

 

 

Амилаза, билирубин

до 15%

Особ. у новорожд.

 

 

 

 

 

рН крови (метаб.ацидоз), калий , ЛДГ , своб.Hb (гемолиз)

Плазма,

 

 

 

 

 

Связывание Са,

ЭР-масса

 

 

Коагуляционные тесты

восполнение

 

 

 

факторов

 

 

 

 

Гепарин

Коагуляционные тесты

 

Замедление

свертывания

 

 

 

 

 

 

 


Взятие крови из вены

Утром, натощак, широкой иглой (21G, >0,7 мм)

«Щадящая» венепункция, наложение жгута - ≤ 1 мин (иначе фибринолиз), отбрасывание первых 2-3 мл крови (или использование ее для получ-я сыворотки).

Пластиковая или силиконированная (хуже) пробирка, вакуумные системы.

Соотношение кровь : АК = 9:1.

При HCT = 35-50% - 0,5 мл цитрата + кровь до 5 мл.

При HCT <35% или >50% - расчет по формуле Ингрема:

V цитрата (мл) V пробирки (мл) 100 HCT (%) 595 HCT (%)

Цитрат – 3,8 г Na3С6Н3О7 5,5Н2О или 3,2 г Na3С6Н3О7

2О в 100 мл воды, устойчив при +4оС ≤ 1 нед

Получение плазмы

Тщательное, но осторожное перемешивание крови с цитратом.

Центрифугирование для получения богатой ТЦ плазмы - 150 g / 5 мин при комнатной to. Сразу после ЦФ - перенос плазмы в пластиковые пробирки пипеткой с пластиковым наконечником.

Замораживание не допускается.

Центрифугирование для получения бедной ТЦ плаз-

мы (БТП) – 1700-1900 g / 15 мин при комнатной to.

Для исследования ВА – двукратное ЦФ.

Отделение плазмы от осадка – в течение 1 ч после взятия крови, перенос плазмы в пластиковые или силиконированные пробирки пипеткой с пластиковым наконечником.

Вакуумные пробирки для коагулологии

Наполнитель

Р-р цитрата натрия

Принцип действия

Антикоагулянт,

 

связывающий Ca2+

Цвет крышки

Голубой

Концентрация 0.105 моль/л - 3.13% 0.109 моль/л - 3.20% 0.129 моль/л - 3.80%

Наполнение кровью - до отметки (1:9)

Размеры пробирок

10x64; 13x75; 13x100; 16x100 мм

Объемы пробирок

1.8, 2.7, 4.5, 6, 7, 10 мл

ПРОБИРКИ НАПОЛНЯТЬ ДО ОБОЗНАЧЕННОГО ОБЪЕМА !!!