ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 08.04.2024

Просмотров: 58

Скачиваний: 0

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.

Хранение плазмы

При комнатной температуре - до 4 ч (АЧТВ и др.), до 24-48 ч (ПВ, МНО).

При гепаринотерапии – не более 1 ч.

Замораживание только БТП, при (-20) – (-70)оС.

Хранение в замороженном виде – до 4 нед при -20оС.

Быстрое размораживание в теплой воде при 37оС.

Тщательное, но осторожное перемешивание.

Исследование – в течение 1 ч после размораживания.

Лабораторное исследование системы гемостаза

«Глобальные» тесты гемостаза (на цельной крови)

Тесты плазменного звена гемостаза

Тесты тромбоцитарного звена гемостаза

Тесты состояния эндотелия и сосудистой стенки

Глобальные тесты гемостаза

ВРЕМЯ СВЕРТЫВАНИЯ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ (по Ли-Уайту):

Кровь

пациента

в стеклянной пробирке при 20-25о С – 6-11 мин

Нестандартизовано, большой разброс результатов…

Методика

Сухарева в капиллярах

Активация

ТЦ

Общий путь

X +V

Образование тромбина

II

Образование фибрина

I


Тест ВСК (интерпретация)

Норма - 6-11 мин (при комнатной температуре).

- Гипокоагуляция:

выраженный дефицит фибриногена и факторов внутреннего пути (расходование или снижение синтеза)

действие ингибиторов (антител, гепарина)

значительная гемодилюция

- МАЛОИНФОРМАТИВНО:

-ошибка при взятии крови – травматичность процедуры.

-гиперактивация плазменных факторов внутреннего пути

(беременность, онкология… ), повышенная вязкость крови и т.д.

Основное применение теста ВСК - экспресс-диагностика грубых сдвигов гемостаза.

Тест может выполняться вне КДЛ, силами нелабораторного персонала (врач, фельдшер, процедурная сестра).

Глобальные тесты гемостаза

ВРЕМЯ СВЕРТЫВАНИЯ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ после контактной активации (ВСКа, АВС, ACT) – при добавлении стандартного активатора (каолина, цеолита).

РОС-тест. Экспресс-анализаторы. Норма – 80-120 сек.

Интраоперационный мониторинг гемостаза

(АИК, введение гепарина и протамин-сульфата)

+ экспрессопределение резистентности к гепарину

Активатор

Венозная / капиллярная

кровь

пациента

+ Активация

ТЦ

Общий путь

X +V

Образование тромбина

II

Образование фибрина

I

Тесты плазменного гемостаза

Лабораторный тест ДОЛЖЕН ИМЕТЬ установленные:

диагностическую

значимость

чувствительность и специфичность

метод калибровки (стандартизации)

систему контроля качества

Тесты «внутреннего» и «внешнего» пути активации гемостаза

Тесты фибринообразования

Количество / активность отдельных факторов гемостаза

Тесты системы фибринолиза

Тесты антикоагулянтной системы


Тесты внутреннего пути активации гемостаза

АЧТВ, АПТВ -

активированное частичное тромбопластиновое время

CaCl2

Фосфолипиды + активатор

Плазма пациента,

бедная ТЦ

Общий путь

X

V

Образование тромбина

II

Образование фибрина

I

ТЕСТ АЧТВ (интерпретация)

Норма АЧТВ - 20-45 сек (зависит от наборов и прибора).

- ГИПОКОАГУЛЯЦИЯ:

дефицит факторов внутреннего пути (врожденное снижение синтеза, ДВС во II–III фазе, болезни печени, лечение АНД... )

действие ингибиторов свертывания (ПДФ, антитела, гепарин)

м.б. избыток цитрата / недостаток крови.

- ОБЫЧНО НЕ ИМЕЕТ КЛИНИЧЕСКОГО ЗНАЧЕНИЯ:

-ошибка взятия крови – недостаток цитрата, попадание тканевого фактора в пробирку.

-возможен избыток или активация факторов внутреннего пути (беременность, онкология…) => нужно исследовать маркеры активации свертывания.

Индекс АЧТВ:

ИАЧТВ = АЧТВ пациента / АЧТВ рефер.плазмы. Норма 0,8-1,2.

Тесты внешнего пути гемостаза

ПВ (ПО, % по Квику)

протромбиновое время (отношение)

Тромбопластин + Са2+

Плазма / кровь пациента

Общий путь

X

V

Образование тромбина

II

Образование фибрина

I

Плазму пациента нельзя охлаждать (холодовая активация ф.VII).

ПВ зависит от:

активности тромбопластина (она нестабильна) => индексы ПВ:

ПТИ = (ПВ донора / ПВ пациента) 100%. Норма = 85-115%.

ПО = ПВ пациента / ПВ донора.

Норма = 0,85-1,15.

чувствительности тромбопластина к нехватке ф.VII, X, V, II.

Для стандартизации исследования ПВ, особенно у пациентов, принимающих непрямые антикоагулянты, используется международное нормализованное отношение:

МНО = (ПО)МИЧ

МИЧ – международный индекс чувствительности (стандартизованный параметр тромбопластина). Желателен МИЧ <1,5.


Зависимость ПВ от % протромбина

(тромбопластины с разным МИЧ)

Н.А.Липатова с соавт. (2006)

Тест ПВ (интерпретация)

ПВ, ПО и МНО ( % по Квику, ПТИ) - ГИПОКОАГУЛЯЦИЯ:

-дефицит факторов внешнего пути (VII, X, V, II, фибриноген):

тяжелые болезни печени, гиповитаминоз К, лечение АНД, поздние стадии ДВС…

-действие антикоагулянтов (гепарин, ПДФ, антитела).

ПВ, ПО, МНО ( % по Квику, ПТИ ) – клинически малозначимо

-ошибка взятия крови - попадание кусочков стенки вены в пробирку

-гиперактивность факторов внешнего пути: повреждение сосудов, травмы,канцероматоз… + беременность и роды.

Упациентов, принимающих непрямые антикоагулянты, целевое значение МНО = 2,0–3,0–4,0.

ПВ капиллярной крови

Тромбопластин + Са2+ 50 мкл

Капиллярная кровь с цитратом, 75 мкл

Консервант на основе цитрата + капиллярная кровь

Время хранения пробы до анализа – до 8 ч.

Меньшая точность и воспроизводимость анализа.

Калибратор – лиофилизированнаяя РНП.

Необходим учет гематокрита.

Предпочтительно выполнение на специальном коагулометре.


Тесты образования фибрина

КОНЦЕНТРАЦИЯ ФИБРИНОГЕНА

Гравиметрический способ (по Рутберг):

1 мл плазмы + тромбопластин + CaCl2,

сгусток извлекают, отжимают на фильтре, подсушивают и взвеши-

вают. (10-20 мг) 0,25 = фибриноген в г/л (в норме 2-4 г/л).

При ДВС, гепаринотерапии – + гепасорб или эхитокс

Тромбопластин + Са2+

Плазма

пациента

Концентрация фибриногена

-Клоттинг-методика (по Клаусу) - время свертывания разведенной плазмы избытком высокоактивного тромбина

(на коагулометре).

-Турбидиметрический метод

-«Кинетический» метод со змеиными ядами (рептилазой)

-ИФА-, ИХЛ-методы

Высоко-

 

 

 

активный

370С

 

тромбин

 

Плазма, разведенная

 

 

Сгусток

 

имидазол. буфером 1:10

 

 

Интерпретация результатов определения фибриногена

- острофазовая реакция (воспаление, инфекции,

травмы, ожоги, послеоперационный период, ОИМ…), болезни соединительной ткани, злокачественные новообразования...

В норме м.б. при беременности и во время месячных.

- гиперпотребление образование микро-

сгустков (ДВС, травмы, ожоги, шок, тяжелый токсикоз), действие фибринолитиков;

- уменьшение синтеза – тяжелые поражения печени.