ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 08.04.2024
Просмотров: 58
Скачиваний: 0
Хранение плазмы
При комнатной температуре - до 4 ч (АЧТВ и др.), до 24-48 ч (ПВ, МНО).
При гепаринотерапии – не более 1 ч.
Замораживание – только БТП, при (-20) – (-70)оС.
Хранение в замороженном виде – до 4 нед при -20оС.
Быстрое размораживание в теплой воде при 37оС.
Тщательное, но осторожное перемешивание.
Исследование – в течение 1 ч после размораживания.
Лабораторное исследование системы гемостаза
«Глобальные» тесты гемостаза (на цельной крови)
Тесты плазменного звена гемостаза
Тесты тромбоцитарного звена гемостаза
Тесты состояния эндотелия и сосудистой стенки
Глобальные тесты гемостаза
ВРЕМЯ СВЕРТЫВАНИЯ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ (по Ли-Уайту):
Кровь
пациента
в стеклянной пробирке при 20-25о С – 6-11 мин
Нестандартизовано, большой разброс результатов…
Методика
Сухарева в капиллярах
Активация
ТЦ
Общий путь
X +V
Образование тромбина
II
Образование фибрина
I
Тест ВСК (интерпретация)
Норма - 6-11 мин (при комнатной температуре).
- Гипокоагуляция:
выраженный дефицит фибриногена и факторов внутреннего пути (расходование или снижение синтеза)
действие ингибиторов (антител, гепарина)
значительная гемодилюция
- МАЛОИНФОРМАТИВНО:
-ошибка при взятии крови – травматичность процедуры.
-гиперактивация плазменных факторов внутреннего пути
(беременность, онкология… ), повышенная вязкость крови и т.д.
Основное применение теста ВСК - экспресс-диагностика грубых сдвигов гемостаза.
Тест может выполняться вне КДЛ, силами нелабораторного персонала (врач, фельдшер, процедурная сестра).
Глобальные тесты гемостаза
ВРЕМЯ СВЕРТЫВАНИЯ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ после контактной активации (ВСКа, АВС, ACT) – при добавлении стандартного активатора (каолина, цеолита).
РОС-тест. Экспресс-анализаторы. Норма – 80-120 сек.
Интраоперационный мониторинг гемостаза
(АИК, введение гепарина и протамин-сульфата)
+ экспрессопределение резистентности к гепарину
Активатор
Венозная / капиллярная
кровь
пациента
+ Активация
ТЦ
Общий путь
X +V
Образование тромбина
II
Образование фибрина
I
Тесты плазменного гемостаза
Лабораторный тест ДОЛЖЕН ИМЕТЬ установленные:
•диагностическую
значимость
•чувствительность и специфичность
•метод калибровки (стандартизации)
•систему контроля качества
Тесты «внутреннего» и «внешнего» пути активации гемостаза
Тесты фибринообразования
Количество / активность отдельных факторов гемостаза
Тесты системы фибринолиза
Тесты антикоагулянтной системы
Тесты внутреннего пути активации гемостаза
АЧТВ, АПТВ -
активированное частичное тромбопластиновое время
CaCl2
Фосфолипиды + активатор
Плазма пациента,
бедная ТЦ
Общий путь
X
V
Образование тромбина
II
Образование фибрина
I
ТЕСТ АЧТВ (интерпретация)
Норма АЧТВ - 20-45 сек (зависит от наборов и прибора).
- ГИПОКОАГУЛЯЦИЯ:
дефицит факторов внутреннего пути (врожденное снижение синтеза, ДВС во II–III фазе, болезни печени, лечение АНД... )
действие ингибиторов свертывания (ПДФ, антитела, гепарин)
м.б. избыток цитрата / недостаток крови.
- ОБЫЧНО НЕ ИМЕЕТ КЛИНИЧЕСКОГО ЗНАЧЕНИЯ:
-ошибка взятия крови – недостаток цитрата, попадание тканевого фактора в пробирку.
-возможен избыток или активация факторов внутреннего пути (беременность, онкология…) => нужно исследовать маркеры активации свертывания.
Индекс АЧТВ:
ИАЧТВ = АЧТВ пациента / АЧТВ рефер.плазмы. Норма 0,8-1,2.
Тесты внешнего пути гемостаза
ПВ (ПО, % по Квику) –
протромбиновое время (отношение)
Тромбопластин + Са2+
Плазма / кровь пациента
Общий путь
X
V
Образование тромбина
II
Образование фибрина
I
Плазму пациента нельзя охлаждать (холодовая активация ф.VII).
ПВ зависит от:
активности тромбопластина (она нестабильна) => индексы ПВ:
ПТИ = (ПВ донора / ПВ пациента) 100%. Норма = 85-115%.
ПО = ПВ пациента / ПВ донора. |
Норма = 0,85-1,15. |
чувствительности тромбопластина к нехватке ф.VII, X, V, II.
Для стандартизации исследования ПВ, особенно у пациентов, принимающих непрямые антикоагулянты, используется международное нормализованное отношение:
МНО = (ПО)МИЧ
МИЧ – международный индекс чувствительности (стандартизованный параметр тромбопластина). Желателен МИЧ <1,5.
Зависимость ПВ от % протромбина
(тромбопластины с разным МИЧ)
Н.А.Липатова с соавт. (2006)
Тест ПВ (интерпретация)
ПВ, ПО и МНО ( % по Квику, ПТИ) - ГИПОКОАГУЛЯЦИЯ:
-дефицит факторов внешнего пути (VII, X, V, II, фибриноген):
тяжелые болезни печени, гиповитаминоз К, лечение АНД, поздние стадии ДВС…
-действие антикоагулянтов (гепарин, ПДФ, антитела).
ПВ, ПО, МНО ( % по Квику, ПТИ ) – клинически малозначимо
-ошибка взятия крови - попадание кусочков стенки вены в пробирку
-гиперактивность факторов внешнего пути: повреждение сосудов, травмы,канцероматоз… + беременность и роды.
Упациентов, принимающих непрямые антикоагулянты, целевое значение МНО = 2,0–3,0–4,0.
ПВ капиллярной крови
Тромбопластин + Са2+ 50 мкл
Капиллярная кровь с цитратом, 75 мкл
Консервант на основе цитрата + капиллярная кровь
Время хранения пробы до анализа – до 8 ч.
Меньшая точность и воспроизводимость анализа.
Калибратор – лиофилизированнаяя РНП.
Необходим учет гематокрита.
Предпочтительно выполнение на специальном коагулометре.
Тесты образования фибрина
КОНЦЕНТРАЦИЯ ФИБРИНОГЕНА
Гравиметрический способ (по Рутберг):
1 мл плазмы + тромбопластин + CaCl2,
сгусток извлекают, отжимают на фильтре, подсушивают и взвеши-
вают. (10-20 мг) 0,25 = фибриноген в г/л (в норме 2-4 г/л).
При ДВС, гепаринотерапии – + гепасорб или эхитокс
Тромбопластин + Са2+
Плазма
пациента
Концентрация фибриногена
-Клоттинг-методика (по Клаусу) - время свертывания разведенной плазмы избытком высокоактивного тромбина
(на коагулометре).
-Турбидиметрический метод
-«Кинетический» метод со змеиными ядами (рептилазой)
-ИФА-, ИХЛ-методы
Высоко- |
|
|
|
|
|
активный |
370С |
|
тромбин |
|
|
Плазма, разведенная |
|
|
|
Сгусток |
|
|
имидазол. буфером 1:10 |
|
|
|
Интерпретация результатов определения фибриногена
- острофазовая реакция (воспаление, инфекции,
травмы, ожоги, послеоперационный период, ОИМ…), болезни соединительной ткани, злокачественные новообразования...
В норме м.б. при беременности и во время месячных.
- гиперпотребление – образование микро-
сгустков (ДВС, травмы, ожоги, шок, тяжелый токсикоз), действие фибринолитиков;
- уменьшение синтеза – тяжелые поражения печени.