ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 08.04.2024
Просмотров: 57
Скачиваний: 0
Тромбиновое время (ТВ)
- для контроля терапии гепарином и фибринолитиками
неразведенная плазма + тромбин --> сгусток фибрина
Норма – 12-16 (10-20) сек на коагулометре или вручную.
- гипофибриногенемия, (дисфибриногенемии) - действие гепарина, ПДФ …
- МАЛОЗНАЧИМО / гиперфибриногенемия
Для исключения влияния гепарина используют змеиные яды (батроксобин, анцистрон, рептилаза) или сорбент.
Тесты активации свертывания
ифибринолиза
1.ПАРАКОАГУЛЯЦИОННЫЕ ПРОБЫ
- |
этаноловая |
слишком низкая |
|
- |
-нафтоловая |
чувствительность |
|
и специфичность; |
|||
|
|
||
- |
протаминсульфатная |
выполнение нецелесообразно. |
Может выполняться о-фенантролиновая проба (РФМК-тест)
в силу доступности и распространенности. Нестандартизована, имеет полуколичественный характер…
РФМК - активация свертывания и фибринолиза:
-тромбофилии, тромбозы, ДВС крови, послеоперационный период …
-ошибка взятия крови (запоздалое и/или плохое перемешивание с антикоагулянтом).
Тесты активации свертывания
ифибринолиза
2.ФИБРИН-МОНОМЕРЫ (FM-test), ФИБРИНОПЕПТИД А, Т-АТ
- активация свертывания (тромбофилии, тромбозы, ДВС крови…)
3. D-ДИМЕР, продукты деградации фибрина (ПДФ, FDP), Р-АР
– активация фибринолиза (тромбозы, ДВС, действие стрептокиназы и др.)
Plasmin |
D-dimer E |
D-Dimer |
|
|
|
X-oligomer |
|
E |
|
|
D-димер
Продукт распада фибрина, но не фибриногена
=> наиболее надежный плазменный маркер тромбообразования
Определяется иммунохимическими
методами с моноклональными АТ
(ИТД, ИФА, ИХЛ, латекс-агглютинация, иммунохроматография)
=> высокая специфичность и чувствительность.
Отсутствие D-димера = отсутствие тромбов
Контингент, подлежащий обследованию на
D-димер
впервую очередь
1.Пациенты с подозрением на тромбоз (клинические проявления ДВС, ТГВ и ТЭЛА), а также с повышенным риском тромботических осложнений (мерцательная аритмия и др.)
2.Больные, которым предстоит обширная операция.
3.Пациенты, которым нужно оценить эффективность антитромботической терапии (в т.ч. при онкологии).
Тесты активности фибринолиза
1. Лизис эуглобулинов – XIIa-калликреин-зависимый фибринолиз (укороченный вариант; N = 4-12 мин)
- снижение уровня плазминогена, и/или
-недостаточная активация фибринолиза (тяжелые болезни печени, передозировка трасилола и др.)
2.Плазминоген (стрептокиназный тест).
N= 80-120% от уровня нормальной плазмы.
- снижение уровня плазминогена:
-гиперпотребление - тромбозы, ДВС крови, действие стрептокиназы и активных протеаз;
-уменьшение синтеза - тяжелые болезни печени...
Тесты антикоагулянтной системы
Антитромбин III (количество) - ИХЛ, ИФА
Антитромбин III (активность) – по инактивации стандартного раствора тромбина при добавлении плазмы пациента:
1.Клотинговый метод (Абильдгаард, 1970) – трудоемок, нестабильные результаты…
2.Метод с хромогенным субстратом (фотометрический) –
точнее, удобнее в работе
Норма: 75-140% от уровня нормальной плазмы.
↓- гиперпотребление АТ III (тромбоз, ДВС, введение гепарина);
- уменьшение синтеза (тяжелые заболевания печени, шоковые состояния, старческий возраст…), действие эстрогенов -
последние месяцы беременности, прием пероральных КА
- МАЛОЗНАЧИМО / дефицит витамина К, прием АНД.
Протеин С
1.Клотинговый метод – трудоемок (по удлинению АЧТВ после активации ПрС в стандартной плазме и в плазме пациента)…
2.Метод с хромогенным субстратом (фотометрический) –
аналогично определению активности ферментов.
3.ИХЛ, ИФА – количество протеина С.
N= 70-130% от уровня нормальной плазмы
- гиперпотребление (тромбозы, тромбофлебиты, ДВС);
-уменьшение синтеза (старческий возраст, болезни печени, действие варфарина, длительный прием пероральных КА)
=> тромбофилия.
Тесты антикоагулянтной системы
Резистентность ф.V к активированному ПрС (РАПС, aPCR) –
по удлинению АЧТВ при активации ПрС в смеси субстратной плазмы, дефицитной по ф.V, с:
плазмой пациента,
нормальной донорской плазмой.
Лейден-мутация (G1691A) – методом ПЦР.
Протеин S (ПрS) – кофактор ПрС; норма – 60-140% от норм. плазмы.
При острофазовой реакции (связывание с С4-BP) возможен недостаток ПрS и снижение активности ПрС.
Маркеры активации плазменного гемостаза
1.Ранние – F1+2, Т-АТ
2.В момент образования сгустка – FM, ФП А
3.Поздние - D-димеры, ПДФ
Маркеры повреждения эндотелия
1.Фактор Виллебранда (кол-во, активность)
2.ТPA, тромбомодулин
3.PAI-1, эндотелин, молекулы адгезии
( ICAM-1, VCAM-1, P- и E-селектины…)
Тесты тромбоцитарного звена
Длительность кровотечения при стандартном проколе кожи - методы Duke, Ivy, Шитиковой
Количество тромбоцитов в крови, ТЦ формула
Агрегация тромбоцитов (спонтанная и индуцированная разными дозами АДФ, коллагеном, адреналином, тромбином, ристомицином)
Проточная цитофлуориметрия – выявление рецепторных глико-
протеинов тромбоцитов (www.biocytex.fr ), Р-селектина…
Время кровотечения по Ivy
Р=40 мм рт.ст.
Референтные пределы: взрослые – 2-9 мин, дети – 3-12 мин.
from: Platelets. Second Edition (A.Michelson). Elseiver, 2007.
ЭКО-МЕД-СМ
Подсчет количества тромбоцитов
В камере Горяева – низкая точность, возможно занижение результатов (сорбция на стекле пипеток, меланжеров, пробирок, камеры). Точность выше при фазово-контрастной микроскопии.
CV = 10-30%.
По Фонио – в мазке крови на 1000 эритроцитов. Низкая точность, но можно одновременно оценить морфологию тромбоцитов.
На гематологическом анализаторе – точно, в стандартных условиях, быстро. Важно предотвратить агрегацию (постоянное перемешивание). CV = 4-10% - важно для оценки динамики.
Показатели активности тромбоцитов
1.Спонтанная и индуцированная агрегация ТЦ (индукторы – АДФ, коллаген, адреналин, тромбин, ристомицин)
2. PF4 – тромбоцитарный фактор 4 |
ИФА-тесты |
|||
3. -TG - -тромбоглобулин |
||||
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ОЦЕНКА ФУНКЦИИ ТРОМБОЦИТОВ
Богатая тромбоцитами плазма (PRP)
+ Индуктор агрегации
Базовое |
Увеличение |
светопропускание |
светопропускания |
|
РЕНАМ |