Файл: Novicka_praktykum_z_biotehnologii_ch1.pdf

81 

Вимоги  до  речовин,  що  захищають  під  час  ліофілізації  вакцинних 

препаратів: 



не токсичність; 



відсутність антигенних властивостей; 



ад’ювантні властивості; 



властивості структурного (опірного) матеріалу; 



пригнічення гідролітичних ферментів у біоматеріалі; 



анти окисна активність. 

 
Усім  перерахованим  вимогам  відповідають  наступні  речовини: 

лактоза, цукроза, манітол, сорбітом, пептон, білкові гідролізати, декстрин, 
желатина, глутамат натрію, амінокислоти, тіосечовина. 

Для  підвищення  захисних  властивостей  середовища  має  значення 

додавання катіонів магнію та кальцію. 

Захисна  дія  кріопротекторів  пояснюється  впливом  на  гідрофобні 

взаємодії субодиниць білкової природи у їх четвертинної структурі. 

 
Підвищенню стабільності препаратів після висушування та у процесі 

зберігання сприяють різні сполуки, які поділяють на три групи: 



Природні  та  синтетичні  високомолекулярні  сполуки  (декстрин, 
декстрин, 

агароза, 

солі 

альгінової 

кислоти, 

желатин, 

полівінілпіролідон). Вони створюють захисні бар‘єри для клітин після 
висушування  та  ефективні  у  концентраціях  1-2%.  У  більш  високих 
концентраціях вони погіршують видалення вологи. 



Друга  група  включає  тіосечовину  та  натрієві  солі  глютамінової, 
лимонної та аскорбінової кислот. Вони легко окислюються, блокують 
вільнорадікальні  та  амоній-карбонільні  реакції  у  сухій  біомасі. 
Використовують у концентрації 1-3%. 



Неорганічні редуктори – сульфіт та тіосульфат, нітріт натрію.мають 
сильні електролітичні властивості, тому не завжди показані. 

 
Усі  моноцукри  володіють  проективними  властивостями  лише  на 

етапі  заморожування  –  висушування  та  не  діють  під  час  зберігання.  Для  
покращення  збереженості  препаратів  доцільно  у  складі  захисних 
середовищ використовувати знежирене молоко. 

Цукрозо-желатинове  захисне  середовище  –  традиційне    під  час 

отримання  вакцинних  препаратів.  Вона    передбачає  жорсткі  умови 

82 

температурного  режиму  сублімації  та  не  є  ефективною    для  збереження 
при доступі  кисню. 

При  повному  заміщенні  культуральної  рідини  на  водний  розчин 

солей чи цукрів у деяких грамнегативних мікроорганізмів спостерігається 
зниження  їх  життєздатності,  яке  залежить  від  ступеня  нестабільності 
суспензії. 

З  біологічних  матеріалів  широко  застосовується  інактивована 

розведена сироватка крові тварин. 

Добрими  захисними  властивостями  володіє  знежирене  молоко,  що 

обумовлено  наявністю  лактози.  Мікроорганізми  під  час  висушування  у 
молоці зберігають свої первинні властивості на протязі двох років. 

Додавання  до  триптичного  середовища  лецитину  яєчного  жовтка 

(0,06-0,12%) збільшує у двічі виживаємість бруцел під час висушування. 

Пептон володіє високими термозахисними властивостями.  
На  практиці  виробництва  сухих  живих  вакцин  широко 

розповсюджені комбіновані середовища, що складаються з двох та більше 
компонентів.  Комбіновані  середовища  забезпечують  захист  вакцинних 
штамів від усього спектру несприйнятливих  факторів. 

Приклад деяких комбінованих середовищ висушування: 



Сахароза (7,5%) + желатина (5%); 



Глюкоза (7,5%) + декстрин (5%)+ бульйон (25%); 



Декстрин (5%) + глютамат натру (5%); 



Молоко + сахароза (10%); 



Сахароза (7,5%) + декстрин (8%) + глютамат натру (2%). 

ОЗНАКИ НЕПРАВИЛЬНОГО ВИСУШУВАННЯ. 



поява на поверхні матеріалу пухирців, як результат наявності у 
замороженої маси деякої кількості рідини; 



велика нерівномірна пористість; 



значне скорочення об‘єму у порівнянні з попереднім; 



нерівномірне зафарбування сухого препарату; 



погане відставання сухої маси від стінок ампули; 



погана розчинність висушеного матеріалу. 

 
ЗАВДАННЯ. 

1.  Оцінити 

якість 

ліофілізації 

готових  імунобіологічних 

препаратів. 

2.  Приготувати  середовище  для  висушування  біологічного 

матеріалу. 

83 

ДОДАТКИ 

Додаток 1. 

ПАСПОРТ 

ТЕСТ-ШТАМУ 

Друкується на бланку організації, якій юридично підпорядкована 

визначена колекція мікроорганізмів 

―_____‖ _____________ 20___ р. 

(повна назва колекції) 

____________________________________________________________ 

1.  Назва штаму__________________________________________ 
2.  № штаму в колекції та інших колекціях__________________ 
3.  Одержано з (ким, коли, від якої тварини)_________________ 
4.  Коротка характеристика тест-штаму  (виробничий або 

музейний)_____________________________________________ 

a.  Морфологічні властивості 
b.  Біохімічні властивості  
c.  культуральні властивості 
d.  серологічні властивості 
e.  біологічні властивості 

5.  Призначення тест-штаму________________________________ 
6.  Умови підтримання тест-штаму__________________________ 
7.  Умови зберігання тест-штаму____________________________ 
8.  Пасаж через тварин відповідного виду____________________ 
9.  Додаткові відомості_____________________________________ 

Директор/керівник організації ____________ _______ ____________ 

                                               (підпис) (прізвище, ім’я, по батькові) 

Керівник (куратор) колекції мікроорганізмів ____________ ____ 

                                   (підпис) (прізвище, ім’я, по батькові) 
 
 
 

84 

Додаток 2. 

ПРАВИЛА ПОВОДЖЕННЯ З НЕБЕЗПЕЧНИМИ ТА ТОКСИЧНИМИ 
СКЛАДНИКАМИ ПОЖИВНИХ СЕРЕДОВИЩ. 

 
НАТРІЮ АЗИД – як правило у складі будь якого середовища його 

концентрація не перевищує 1%, що відповідає низькій токсичності. Тим не 
менш,  деякі  особи  мають  підвищену    чутливість  до  цієї  речовини,  тому 
необхідно  дотримуватися  заходів  попередження  вдиханню  або 
потраплянню порошку азиду натру всередину.  

Ця  речовина  має  властивість  реагувати  з  багатьма  металами, 

особливо  зі  свинцем  та  міддю,  з  утворенням  вибухових  сполук-азидів 
металів.    У  зв‘язку  з  цим  рекомендується  дотримуватися  положень  щодо 
утилізації  азиду  натру.  Для  попередження  тривалого  контакту  з 
металевими  водостоками  та  каналізаційними  трубами  слід  змивати 
залишки  цього  порошку  великою  кількістю  води.  Це  перестороги 
необхідно  дотримуватися  під  час  роботи  з  будь  якими  біологічними 
рідинами, які містять азид натру у якості консерванту. 

 
ЛІТІЮ  ХЛОРИД  –  сіль,  що  є  небезпечною  речовиною,  тому 

необхідно  уникати  контакту  будь  якої  ділянки  тіла  або  вдихання  парів. 
Якщо потрапляння має місце, ділянку  промити великою кількістю води. 

 
ЦИКЛОГЕКСИМИД  –  це  високо  токсична  сполука,  тому  слід 

уникати  потрапляння  на  шкіру,  а  також  утворення  аерозолів  та  вдихання 
їх. 

 
ФУКСИН  ОСНОВНИЙ  –  є  потенційним  канцерогеном,  тому 

необхідна  обачність,  щоб  уникнути  контакту  зі  шкірою  та  вдихання  
порошку. 

НАТРУ  ГІДРОСЕЛЕНИТ  -    це  високо  токсична  сполука  з 

тератогенними та корозійними властивостями, тому під час поводження з 
ним  необхідна  особлива  обачність.  При  потраплянні  на  шкіру 
гідроселениту натру її необхідно промити великою кількістю води. 

85 

Додаток 3. 

СИМВОЛИ НЕБЕЗПЕКИ, 

що зустрічаються на упаковках середовищ та речовин, що 

використовуються в біотехнології.