ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 03.11.2019

Просмотров: 7156

Скачиваний: 16

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
background image

 

101

теорию

Таким

 

образом

за

 

открытием

 

природы

 

электрических

 

явлений

 

в

 

живых

 

организмах

 

видится

 

многолетний

 

труд

 

ученых

 

разных

 

направлений

 

ботаников

 

– 

измеривших

 

осмотическое

 

давление

 

физиков

 – 

открывших

 

электрические

 

заряды

 

и

 

электрические

 

и

 

газовые

 

законы

 

химиков

 – 

создавших

 

теории

 

растворов

 

и

 

электролитической

 

диссоциации

 

математиков

 

– 

труды

 

которых

 

позволили

 

создать

 

дифференциальное

 

и

 

интегральное

 

исчисление

 

2. 

Мембранно

-

ионная

 

теория

 

генерации

 

биопотенциалов

 

клеткой

 

и

 

основные

 

опыты

её

 

подтверждающие

 

Свою

 

первую

 

статью

 

с

 

изложением

 

взглядов

 

на

 

происхождение

 

электричества

 

в

 

живых

 

организмах

 

Ю

Бернштейн

 

опубликовал

 

только

 

после

 

того

как

 

придумал

 

ряд

 

экспериментов

ее

 

подтверждающих

Ученый

 

провел

 

серию

 

эффектных

 

опытов

 

на

 

неповрежденной

 

мышце

 

лягушки

Он

 

показал

что

если

 

нагреть

 

один

 

конец

 

целой

 

неповрежденной

 

мышцы

от

 

нагретого

 

участка

 

к

 

холодному

 

участку

 

поверхности

 

мышцы

 

потечет

 

ток

Этот

 

результат

 

прямо

 

следовал

 

из

 

формулы

 

Нернста

 – 

в

 

более

 

теплом

 

месте

 

поверхности

 

возникает

 

больший

 

электрический

 

потенциал

чем

 

в

 

холодном

Электрический

 

ток

 

течет

 

по

 

направлению

 

от

 

точек

 

пространства

 

с

 

более

 

высоким

 

потенциалом

 

к

 

месту

 

с

 

более

 

низким

 

значением

 

электрического

 

потенциала

Некоторое

 

время

 

слабым

 

местом

 

в

 

теории

 

Бернштейна

 

было

 

отсутствие

 

данных

 

о

 

том

какой

 

именно

 

ион

 

создает

 

ПП

В

 1905 

г

молодой

 

сотрудник

 

В

Нернста

5

 

Гебер

 

обнаружил

что

 

все

 

соли

содержащие

 

калий

оказывают

 

на

 

мышцу

 

схожее

 

действие

участок

 

мышцы

на

 

который

 

действовал

 

раствор

 

соли

 

калия

приобретал

 

отрицательный

 

потенциал

 

по

 

отношению

 

к

 

другим

 

участкам

 

мышцы

Бернштейн

 

сразу

 

оценил

 

работы

 

Гебера

 

как

 

                                     

5

 

В

Нернст

 

в

 

это

 

время

 

занимал

 

пост

 

директора

 

Института

 

физики

 

в

 

Берлине

.

 


background image

 

102

подтверждение

 

его

 

теории

Все

 

соли

 

калия

 

при

 

диссоциации

 

в

 

воде

 

повышали

 

наружную

 

концентрацию

 

ионов

 

калия

при

 

этом

 

отношение

 

0

i

K

K

 

уменьшается

соответственно

уменьшается

 

и

 

потенциал

 

той

 

области

 

мышцы

на

 

которую

 

действуют

 

соли

 

калия

В

 

результате

 

электрический

 

ток

 

тек

 

по

 

поверхности

 

неповрежденной

 

мышцы

 

по

 

направлению

 

к

 

участку

содержащему

 

повышенную

 

концентрацию

 

ионов

 

калия

Однако

 

эксперименты

 

Бернштейна

 

и

 

Гебера

 

были

 

лишь

 

косвенным

 

подтверждением

 

мембранной

 

гипотезы

 

о

 

происхождении

 

электрических

 

потенциалов

 

в

 

живых

 

организмах

Они

 

не

 

вызвали

 

особого

 

восторга

 

в

 

ученом

 

мире

и

 

это

 

было

 

предсказуемо

 

и

 

закономерно

Так

влияние

 

температуры

 

на

 

величину

 

потенциала

 

можно

 

было

 

объяснить

 

ускорением

 

химических

 

реакций

Влияние

 

калия

 

на

 

величину

 

ПП

 

также

 

могло

 

быть

 

истолковано

 

как

 

результат

 

химического

 

взаимодействия

 

солей

 

калия

 

с

 

веществом

 

клетки

Чтобы

 

подтвердить

 

правильность

 

гипотезы

требовалось

 

доказать

 

следующее

 

клетки

 

имеют

 

мембрану

которая

 

проницаема

 

лишь

 

для

 

одного

 

иона

 (

или

 

нескольких

 

ионов

); 

 

концентрация

 

этого

 

ионов

  (

этих

 

ионов

по

 

обе

 

стороны

 

БМ

 

различная

 

потенциал

 

на

 

мембране

 

возникает

 

только

 

за

 

счет

 

проницаемости

 

мембраны

 

для

 

этого

 

иона

  (

этих

 

ионов

и

 

он

 

равен

 

нернстовскому

 

потенциалу

Из

 

трех

 

китов

на

 

которых

 

покоилась

 

мембранная

 

теория

 

Бернштейна

мембрана

внутриклеточная

 

среда

 

и

 

наружный

 

раствор

, – 

в

 

тот

 

исторический

 

момент

6

 

наиболее

 

изученной

 

была

 

наружная

 

среда

 

клетки

Гораздо

 

сложнее

 

было

 

определить

 

ионный

 

состав

 

внутриклеточной

 

жидкости

Тем

 

более

 

что

 

исследователям

 

требовалось

 

доказать

 

не

 

только

 

существование

 

калия

 

во

 

внутриклеточной

 

жидкости

но

 

и

 

то

что

 

калий

 

                                     

6

 

Здесь

 

будет

 

уместным

 

вспомнить

 

тот

 

факт

что

 

в

 

то

 

далекое

 

время

 

о

 

клеточных

 

мембранах

 

ученые

 

знали

 

слишком

 

мало

 – 

в

 1902 

г

ученый

 

Овертон

 

на

 

основании

 

того

что

 

в

 

клетку

 

легко

 

проникают

 

вещества

растворимые

 

в

 

липидах

предположил

что

 

клеточная

 

мембрана

 

содержит

 

в

 

своем

 

составе

 

липиды

.

 


background image

 

103

находится

 

внутри

 

клетки

 

в

 

состоянии

 

свободных

 

ионов

Решить

 

эту

 

проблему

 

удалось

 

только

 

тогда

когда

 

был

 

освоена

 

технология

 

изготовления

 

стеклянных

 

микроэлектродов

с

 

помощью

 

которых

 

можно

 

было

 

проникнуть

 

внутрь

 

клетки

и

 

когда

 

была

 

обнаружена

 

гигантская

 

клетка

.  

В

 

1936 

г

.

 

англичанин

 

Дж

Юнг

специалист

 

по

 

головоногим

 

моллюскам

обнаружил

 

кальмара

у

 

которого

 

диаметр

 

нервного

 

волокна

 

доходил

 

до

 

миллиметра

Нервное

 

волокно

 – 

это

 

клетка

и

 

по

 

клеточным

 

масштабам

 

аксон

 

кальмара

 

был

 

гигантской

 

клеткой

хотя

 

сам

 

моллюск

 

вовсе

 

не

 

был

 

гигантом

Нервное

 

волокно

 

кальмара

будучи

 

выделенным

 

из

 

организма

 

моллюска

 

и

 

помещенное

 

в

 

морскую

 

воду

не

 

погибало

Впервые

 

ученые

 

получили

 

возможность

 

проводить

 

эксперименты

 

на

 

клеточном

 

уровне

В

 

1939 

г

.

 

английские

 

ученые

 

А

Ходжкин

 

и

 

его

 

ученик

 

А

Хаксли

 

измерили

 

разность

 

потенциалов

 

на

 

аксоне

 

кальмара

Им

 

удалось

 

также

 

доказать

что

 

внутри

 

аксона

 

кальмара

 

имеется

 

много

 

ионов

 

калия

 

и

 

ионы

 

калия

 

образуют

 

своеобразный

 

ионный

 

газ

т

.

е

находятся

 

в

 

свободном

 

состоянии

 

3. 

Потенциал

 

покоя

Уравнение

 

Нернста

Уравнение

 

Гольдмана

-

Ходжкина

-

Катца

 

Потенциал

 

покоя

  (

ПП

мембранный

 

потенциал

 

покоя

). 

ПП

 

называется

 

разность

 

потенциалов

 

между

 

внутренней

 

и

 

наружной

 

сторонами

 

клеточной

 

мембраны

возникающей

 

в

 

состоянии

 

покоя

 

клетки

У

 

живых

 

клеток

 

в

 

покое

 

между

 

внутренним

 

содержимым

 

клетки

 

и

 

наружным

 

раствором

 

существует

 

отрицательная

 

разность

 

потенциалов

  (

ПП

порядка

 60-90

 

мВ

которая

 

локализована

 

на

 

поверхностной

 

мембране

Внутренняя

 

сторона

 

мембраны

 

заряжена

 

электроотрицательно

 

по

 

отношению

 

к

 

наружной

ПП

 

обусловлен

 

избирательной

 

проницаемостью

 

покоящейся

 

мембраны

 

для

 

ионов

 

К

+

 (

Ю

Бернштейн

, 1902, 1912; 

А

Ходжкин

 

и

 

Б

Катц

, 1947).  

Предположим

что

 

клетку

 

с

 

мембраной

проницаемой

 

только

 

для

 

ионов

 

калия

поместили

 

в

 

электролит

где

 

их

 

концентрация

 

меньше

чем

 

внутри

 

клетки

Сразу

 

после

 

соприкосновения

 


background image

 

104

мембраны

 

с

 

раствором

 

ионы

 

калия

 

начнут

 

выходить

 

из

 

клетки

 

наружу

как

 

выходит

 

газ

 

из

 

надутого

 

шара

Но

 

каждый

 

ион

 

несет

 

с

 

собой

 

положительный

 

электрический

 

заряд

и

 

чем

 

больше

 

ионов

 

калия

 

покинет

 

клетку

тем

 

более

 

электроотрицательным

 

станет

 

ее

 

содержимое

Поэтому

 

на

 

каждый

 

ион

 

калия

выходящий

 

из

 

клетки

будет

 

действовать

 

электрическая

 

сила

препятствующая

 

его

 

движению

 

наружу

В

 

конце

 

концов

 

установится

 

равновесие

при

 

котором

 

электрическая

 

сила

действующая

 

на

 

ион

 

калия

 

в

 

канале

 

мембраны

будет

 

равна

 

силе

обусловленной

 

различием

 

концентраций

 

ионов

 

калия

 

внутри

 

и

 

вне

 

клетки

Очевидно

что

 

в

 

результате

 

такого

 

равновесия

 

между

 

внутренним

 

и

 

наружным

 

растворами

 

появится

 

разность

 

потенциалов

При

 

этом

если

 

за

 

нуль

 

потенциала

 

принять

 

потенциал

 

внешнего

 

раствора

то

 

потенциал

 

внутри

 

клетки

 

будет

 

отрицательным

Эта

 

разность

 

потенциалов

 – 

самое

 

простое

 

из

 

наблюдаемых

 

биоэлектрических

 

явлений

 – 

носит

 

название

 

«

потенциал

 

покоя

» 

клетки

В

 

первом

 

приближении

 

величину

 

ПП

 

можно

 

рассчитать

 

с

 

помощью

 

формулы

 

Нернста

0

ln

i

н

K

RT

F

K

 

,  

где

 

i

K

 

 

концентрация

 

ионов

 

калия

 

внутри

 

клетки

0

K

 

 

концентрация

 

ионов

 

калия

 

снаружи

 

клетки

.  

Подставляя

 

численные

 

значения

 

в

 

формулу

 

Нернста

получим

 

значение

 

ПП

 

порядка

 –87 

мВ

что

 

весьма

 

близко

 

к

 

экспериментально

 

измеренному

 

значению

 

ПП

Дальнейшие

 

исследования

 

показали

что

 

вклад

 

в

 

формирование

 

ПП

 

вносят

 

не

 

только

 

ионы

 

калия

но

 

и

 

ионы

 

натрия

 

и

 

хлора

Концентрация

 

К

+

 

в

 

протоплазме

 

примерно

 

в

 50 

раз

 

выше

чем

 

во

 

внеклеточной

 

жидкости

поэтому

диффундируя

 

из

 

клетки

ионы

 

выносят

 

на

 

наружную

 

сторону

 

мембраны

 

положительные

 

заряды

при

 

этом

 

внутренняя

 

сторона

 

мембраны

практически

 

не

 

проницаемой

 

для

 

крупных

 

органических

 

анионов

приобретает

 

отрицательный

 

потенциал

Поскольку

 

проницаемость

 

мембраны

 

в

 

покое

 

для

 Na

+

 

примерно

 

в

 100 

раз

 

ниже

чем

 

для

 

К

+

диффузия

 

натрия

 

из

 

внеклеточной

 

жидкости

  (

где

 

он

 

является

 

основным

 

катионом

в

 

протоплазму

 

мала

 

и

 

лишь

 

незначительно

 

снижает

 


background image

 

105

ПП

обусловленный

 

ионами

 

К

+

.  

В

 

скелетных

 

мышечных

 

волокнах

 

в

 

возникновении

 

потенциала

 

покоя

 

важную

 

роль

 

играют

 

также

 

ионы

 Cl

-

диффундирующие

 

внутрь

 

клетки

Следствием

 

ПП

 

является

 

ток

 

покоя

регистрируемый

 

между

 

поврежденным

 

и

 

интактным

 

участками

 

нерва

 

или

 

мышцы

 

при

 

приложении

 

отводящих

 

электродов

Мембраны

 

нервных

 

и

 

мышечных

 

клеток

  (

волокон

способны

 

изменять

 

ионную

 

проницаемость

 

в

 

ответ

 

на

 

сдвиги

 

мембранного

 

потенциала

При

 

увеличении

 

ПП

 

(

гиперполяризация

 

мембраны

проницаемость

 

поверхностных

 

клеточных

 

мембран

 

для

 Na

+

 

и

 

К

+

 

падает

а

 

при

 

уменьшении

 

ПП

 

(

деполяризация

она

 

возрастает

причём

 

скорость

 

изменений

 

проницаемости

 

для

 Na

+

 

значительно

 

превышает

 

скорость

 

увеличения

 

проницаемости

 

мембраны

 

для

 

К

+

Более

 

точные

 

значения

 

для

 

ПП

 

вычисляются

 

по

 

формуле

 

Гольдмана

-

Ходжкина

-

Катца

 (

ГХК

), 

которая

 

учитывает

 

проницаемость

 

КМ

 

в

 

покое

 

не

 

только

 

для

 

ионов

 

калия

но

 

и

 

для

 

ионов

 

натрия

 

и

 

хлора

0

0

0

ln

K

Na

Cl

i

i

ПП

K

Na

Cl

i

P K

P

Na

P Cl

RT

F

P K

P

Na

P Cl

 

,  

где

 

P

K

, P

Na 

, P

Cl

 – 

проницаемость

 

КМ

 

для

 

ионов

 

калия

натрия

 

и

 

хлора

выражения

 […]

и

 […]

0

 

обозначают

 

концентрации

 

соответствующих

 

молекул

 

внутри

 

и

 

вне

 

клетки

.  

В

 

качестве

 

примера

 

вычислим

 

величину

 

ПП

 

для

 

гигантского

 

аксона

 

кальмара

Концентрации

 

ионов

 

внутри

 

и

 

вне

 

аксона

 

приведены

 

ниже

 (

таблица

 3). 

Таблица

 3. 

Концентрации

 

ионов

 Na

+

, K

+

, Cl

-

 

внутри

 

и

 

снаружи

 

аксона

 

кальмара

 

Ион

 

Концентрация

 (

моль

 

на

 1 

кг

 

воды

Внутри

 (i) 

аксона

 

калльмара

 

Вне

 (0) 

аксона

 

кальмара

 

Na

70 420 

K

360 10 

Cl

160 500 

В

 

состоянии

 

покоя

 

при

 

физиологических

 

условиях

 

соотношение

 

коэффициентов

 

проницаемости

 

равно

:  

Р

к

 : 

Р

Na

 : P

Cl

 = 1 : 0,04 : 0,45. 

Диффузия

 

ионов

 

калия

 

и

 

хлора

 

идет

 

через

 

КМ

 

в

 

обе

 

стороны

Натрий

 

за

 

счет

 

механизма

 

пассивного

 

транспорта

 

проникает