ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 06.11.2019
Просмотров: 951
Скачиваний: 6
Расчет индексов красной крови: цветовой показатель и среднее содержание гемоглобина в одном эритроците.
Под индексами красной крови понимают среднее содержание гемоглобина в одном эритроците и цветовой показатель.
Определение среднего содержания гемоглобина в одном эритроците производят делением концентрации гемоглобина на число эритроцитов в одинаковом объеме крови. В норме 1 эритроцит содержит 33 пг гемоглобина (допустимые колебания 27-33.4 пг).
Величину 33 пг условно принимают за единицу (норма содержания гемоглобина в одном эритроците) и обозначают как цветовой показатель.
Цветовой показатель отражает насыщение эритроцита гемоглобином.
Вычисление цветового показателя (ЦП) производят по формуле:
ГЕМОГЛОБИН (в г/л) х 3
ЦП = -------------------------------------------------------------------;
три первые цифры числа эритроцитов (в миллионах)
ГЕМОГЛОБИН (в г/%)
ЦП = -------------------------------------------------------------------;
две первые цифры числа эритроцитов (в миллионах)
ГЕМОГЛОБИН (в условных единицах)
ЦП = -------------------------------------------------------------------
две первые цифры числа эритроцитов (в миллионах)
В норме цветовой показатель равен 0,85 – 1,05.
Индексы красной крови важны для суждения о нормо-, гипер-, гипохромии эритроцитов.
Гиперхромия – увеличение среднего содержания гемоглобина в 1 эритроците, дающее цветовой показатель выше 1.05, зависит исключительно от увеличения объема эритроцитов, а не от повышенного насыщения их гемоглобином, так как нормальный эритроцит насыщен гемоглобином до предела. Гиперхромия характерна для мегалобластных анемий, обусловленных дефицитом витамина В12 и фолиевой кислоты.
Гипохромия – уменьшение среднего содержания гемоглобина в 1 эритроците, дающее ЦП ниже 0.85, может быть так же следствием уменьшения объема эритроцитов. Гипохромия служит истинным показателем или дефицита железа в организме, или железорефрактерности. Гипохромия наблюдается при хронических кровопотерях, железодефицитных и железорефрактерных анемиях, свинцовой интоксикации и др.
Нормохромия – это нормальное содержание гемоглобина в эритроците (ЦП -0,85-1,05). Нормохромные анемии развиваются при равномерном уменьшении содержания эритроцитов и количества гемоглобина и наблюдается в случаях острых кровопотерь, при гипопластической анемии, при гемолизе, сепсисе.
Гематокрит (гематокритное число) – дает представление о соотношении между объемом плазмы и объемом форменных элементов крови. Определяется с помощью следующих методов.
-
Метод центрифугирования в гематокритной трубке.
-
Электронно-автоматический метод (с помощью аппаратов «Целлоскоп» и «Культер»).
Нормальные величины гематокрита:
- у женщин 36-42%;
- у мужчин 40-48%.
Гематокритное число учитывается при диагностике полицитемических и олигоцитемических состояний.
Ретикулоциты – это молодые эритроциты, содержащие базофильную субстанцию в виде сеточки, представленную агрегированными рибосомами и митохондриями. Сеточка обнаруживается при прижизненной окраске мазков крови 1% раствором бриллианткрезил синего. Подсчет производится под иммерсионным объективом по отношению к 1000 эритроцитов.
В норме содержание ретикулоцитов в периферической крови составляет 2-10º/○○ (0,2-1,2%). Ретикулоцитоз отображает степень регенераторной способности костного мозга. При гемолизе, кровопотерях эритропоэз в нормальном костном мозге активизируется, и число ретикулоцитов в нем и в периферической крови возрастает. Отсутствие роста числа ретикулоцитов в выше указанных ситуациях свидетельствуют о пониженной функции костного мозга.
Ретикулоцитоз при отсутствии анемии говорит о скрытых, но хорошо компенсированных потерях крови. Высокий ретикулоцитоз наблюдается при адекватном лечении витамин-В12-дефицитной анемии.
3. Методика определения осмотической резистентности эритроцитов и диаметра эритроцитов. Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Диагностическое значение.
Резистентность – свойство эритроцитов противостоять разрушительным воздействиям: тепловым, осмотическим, механическим и др. В клинике наибольшее значение приобрело определение осмотической резистентности.
Принцип метода состоит в том, что эритроциты в гипертонических солевых растворах сморщиваются, а в гипотонических – набухают. При значительном набухании наступает гемолиз.
В пробирках готовят растворы хлорида натрия различной концентрации (от 0.70 до 0.22%), затем вносят в них один и тот же объем крови (0.02 мл) и оставляют на час при комнатной температуре. Через час пробирки центрифугируют и определяют начало гемолиза по легкому порозовению раствора и полный гемолиз – по интенсивной красно-лаковой окраске раствора.
В норме минимальная резистентность у взрослых людей колеблется между 0,48% и 0,46% хлорида натрия, максимальная – между 0,34% и 0,32% хлорида натрия.
Снижение осмотической резистентности эритроцитов наблюдается при наследственном микросфероцитозе (болезнь Минковского-Шоффара), аутоиммунных гемолитических анемиях. Повышение осмотической резистентности эритроцитов встречается при наследственных гемолитических анемиях, связанных с дефицитом глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, при некоторых гемоглобинопатиях (талассемия).
Измерение диаметра эритроцитов и графическую регистрацию распределения эритроцитов по величине (эритроцитометрическая кривая Прайс-Джонса) производят с помощью прямых микроскопических и электронно-автоматических методов.
Прямой микроскопический метод – это измерение диаметра эритроцитов в фиксированном и окрашенном мазке крови с использованием окуляр – микрометра и объектив-микрометра. Измеряют диаметр 200-500 различных эритроцитов, результаты распределяют по группам в зависимости от величины диаметра и устанавливают в процентах (%) относительную численность каждой группы.
Нормы: содержание нормоцитов (диаметр 6.9-8.0 мкм) составляет приблизительно 68%, микроцитов (диаметр менее 6.9 мкм) – 15%, макроцитов (диаметр более 8.0 мкм) – 17%.
Прямой микроскопический метод чрезвычайно трудоемок, отнимает много времени и поэтому уступает электронно-автоматическому методу.
Электронно-автоматический метод – это подсчет эритроцитов различного диаметра с помощью счетчиков «Культер» и «Целлоскоп».
Эритроцитометрическая кривая Прайс-Джонса в норме имеет правильную форму с вершиной на 7.2 мкм и довольно узким основанием в пределах 6-9 мкм.
Увеличение диаметра эритроцитов (макроцитоз) со сдвигом кривой Прайс – Джонса вправо наблюдается при мегалоцитарных анемиях (витамин-В12-фолиеводефицитные), при заболеваниях печени, при алкоголизме.
Уменьшение диаметра эритроцитов (микроцитоз) со сдвигом эритроцитометрической кривой влево встречается при наследственном микросфероцитозе, железодефицитной анемии, интоксикации свинцом.
Нормальные эритроциты имеют форму диска с вдавлением в центре. В патологических случаях могут появляться эритроциты с измененной формой. Изменение формы эритроцитов называется пойкилоцитозом. Встречаются следующие формы эритроцитов.
Сфероциты - эритроциты, имеющие округлый или шарообразный вид, утратившие двояковогнутую форму. Микросфероциты имеют иногда обычные размеры. Сфероцитоз бывает наследственным и приобретенным. Наблюдается при наследственном микросфероцитозе (болезнь Минковского-Шоффара), гемолитических анемиях, сепсисе, искусственных клапанах сердца.
Овалоциты (эллиптоциты) - эритроциты овальной формы. Встречаются при талассемии, наследственном овалоцитозе, тяжелых железодефицитных анемиях, анемиях при лейкозах.
Мишеневидные эритроциты (таргентные клетки, лептоциты) - плоские, бледные, с центральным скоплением гемоглобина в виде мишеней. Бывают при талассемии, тяжелых железодефицитных анемиях, после спленэктомии, при различных видах желтух, алкоголизме. Стоматоциты — центральное просветление у таких эритроцитов изогнуто, напоминает форму рта. Встречаются при наследственных стоматоцитозах (относятся к гемолитическим анемиям), после переливания крови, при опухолях и циррозе печени, остром алкогольном отравлении.
Акантоциты - эритроциты зазубренной формы, имеющие выпячивания различной величины. Обнаруживаются при наследственных акантоцитозах, тяжелых заболеваниях печени (токсических гепатитах, циррозах), гипотиреозе, терапии гепарином, хроническом алкоголизме, после спленэктомии.
Эхиноциты - эритроциты с несколькими выростами, как бы покрытые шипами, колючками. Такие формы наблюдаются при тромбоцитопенической пурпуре, раке желудка, уремии. Если в мазке все эритроциты имеют такую форму, это говорит о неправильной фиксации мазка.
Каплевидные эритроциты имеют форму капель. Встречаются при миелофиброзе и токсических гепатитах.
Анулоциты - эритроциты в виде пустых колец. Наблюдаются в периферической крови при тяжелых формах железодефицитных анемий.
Серповидные эритроциты (дрепаноциты) имеют форму серпов, полулуний, овсяных зерен. Образуются в крови при серповидно-клеточной анемии.
В отличии от анизоцитоза, пойкилоцитоз является более поздним признаком анемии и отмечается при более тяжелом течении.
В норме зрелые эритроциты периферической крови не содержат никаких включений. И только в ретикулоцитах при суправитальной окраске красителем бриллиант-крезил-блау выявляется зернистосетчатая субстанция.
При различных патологических состояниях в периферической крови обнаруживаются эритроциты с различными включениями: базофильная пунктация — мелкая, синего цвета, равномерно расположенная в цитоплазме зернистость, встречается при отравлении свинцом, ртутью и нередко при некоторых анемиях (мегалобластные, талассемия и др.); крапчатость Шуффнера - мелкая красного цвета зернистость, отмечается при трехдневной малярии; пятнистость Маурера - небольшие сиреневого или красного цвета пятнышки, встречаются при тропической малярии; тельца Гейнтца-Эрлиха - круглые резко очерченные включения по периферии эритроцита, появляются при отравлении гемолитическими ядами типа нитробензола, анилина, фенилгидразина, при лучевой болезни; тельца Жолли - круглые, сине-фиолетового цвета образования; кольца Кебота - нежные петельки красного цвета. Они имеют вид колечка, восьмерки или скрипичного ключа. Тельца Жолли представляют собой остатки ядерной субстанции нормобластов, а кольца Кебота - остатки ядерной оболочки и встречаются главным образом при витамин-В12- и фолиеводефицитной анемии, тяжелых отравлениях гемолитическими ядами.
Помимо телец Жолли и колец Кебота при витамин-В12- и фолиеводефицитной анемии в периферической крови можно увидеть клеточные элементы мегалобластического типа кроветворения, который в норме отмечается только в эмбриональном периоде.
При мегалобластическом кроветворении в кроветворной ткани вместо эритробластов образуются мегалобласты, которые способны к ранней гемоглобинизации при сохранившейся еще структуре ядра. По сродству к щелочным или кислым красителям они подразделяются на базофильные, оксифильные и полихроматофильные. Большая их часть распадается в костном мозге, а меньшая - созревает до мегалоцитов, которые и поступают в периферическую кровь. При резком обострении заболевания в периферическую кровь попадают не только мегалоциты, но и мегалобласты. Мегалобласт представляет собой крупную клетку (диаметром более 15 мкм) с эксцентрично расположенным круглым или овальным ядром. Мегалоциты - это безъядерные клетки размером от 12 до 15 мкм, значительно насыщенные гемоглобином. Поэтому цветной показатель, как правило, при В12- и фолиево-дефицитной анемии больше 1,0 (эту разновидность анемии относят к гиперхромным).
Оседание эритроцитов – это свойство клеток крови осаждаться (седементировать) за пределами кровеносного русла (на дне сосуда при сохранении крови в несвертывающемся состоянии), оставляя сверху слой плазмы. Этот феномен лежит в основе определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ), которая выражается в миллиметрах плазмы, отстаивающейся в течение часа.
Наиболее распространен микрометод определения СОЭ в модификации Панченкова.
Принцип метода: при стоянии крови, стабилизированной цитратом натрия, эритроциты оседают с различной скоростью в зависимости от физико-химических свойств крови. Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) выражается в мм/ч.
Оборудование и реактивы:
-
аппарат Панченкова, состоящий из штатива с капиллярами шириной 1 мм, на стенке которых нанесены деления от 0 (сверху) до 100 (снизу). На уровне 0 мм имеется буква К (кровь), а на середине капилляра, около метки 50 мм - буква Р (реактив);
-
агглютационные (видалевские пробирки);
-
5% свежеприготовленный раствор натрия цитрата;
4) вата;
-
раствор антисептика;
-
копья-скарификаторы.
Ход исследования. В капилляр Панченкова набирают 5% раствор натрия цитрата до метки «Р» - 50 мм и выдувают его в видалевскую пробирку. Затем этим же капилляром, держа его горизонтально, из уколотого пальца набирают два раза кровь до метки «К» - 0 мм и выпускают ее в пробирку с натрия цитратом. Хорошо перемешивают. Этим же капилляром набирают цитратную кровь до метки «К» и ставят строго вертикально в штатив. Полученное соотношение объемов крови и натрия цитрата равно 1:4. Через 1 ч отмечают по делениям на капилляре число миллиметров освободившегося от эритроцитов столбика плазмы.
Интерпретация полученных данных. Нормальные показатели СОЭ:
-
у мужчин - СОЭ 1-10 мм/ч;
-
у женщин - СОЭ 2-15 мм/ч
Дети имеют более низкую СОЭ (1-8 мм/ч), чем взрослые, а лица среднего возраста меньше, чем старики.
Изменение СОЭ при патологии.
-
Значительное увеличение – опухолевые заболевания, диффузные болезни соединительной ткани, тяжелые инфекции, болезни почек, протекающие с нефротическим синдромом, выраженная витамин-В12-фолиеводефицитная анемия.
-
Умеренное увеличение – острые и хронические инфекционные заболевания, локализированные гнойные процессы, инфаркт миокарда, гипертиреоз, тяжелый сахарный диабет, внутренние кровотечения, интоксикации ртутью и мышьяком.
-
Снижение – эритремия, вторичные симптоматические эритроцитозы, ацидоз, тяжелая сердечная недостаточность.
4. Методика определения количества лейкоцитов.
Подсчет количества лейкоцитов крови может быть произведен в счетной камере Бюркера с сеткой Горяева или в электронно-автоматических анализаторах («Целлоскоп», «Культер», «Техникан»).
Методика подсчета в камере Бюркера с сеткой Горяева
Принцип метода: аналогичен таковому подсчету эритроцитов, суть его состоит в точном отмеривании крови и ее разведении в определенном объеме жидкости с последующим подсчетом клеточных элементов в счетной камере и пересчете полученного результата на 1 крови.