ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 06.11.2019
Просмотров: 950
Скачиваний: 6
Оборудование и реактивы:
-
смесители или пробирки для подсчета лейкоцитов;
-
3% раствор уксусной кислоты, к которому прибавлено несколько капель метилвиолета или метиленового синего;
-
счетная камера;
-
микроскоп.
Смеситель для лейкоцитов отличается от такового для эритроцитов тем, что имеет более широкий просвет капилляра и меньший по величине резервуар. На смеситель нанесены три метки: 0,5, 1,0 и 11. Это позволяет развести кровь в 10 либо в 20 раз (чаще разводят в 20 раз).
Ход исследования: при взятии крови для подсчета лейкоцитов с кожи предварительно удаляют ватным тампоном остатки крови и, слегка сдавливая палец, выпускают свежую каплю крови. При работе со смесителями кровь набирают до метки 0,5, затем разводят 3 % раствором уксусной кислоты до метки 11. Энергично встряхивают в течение 3 мин, после чего сливают 1-2 капли и заполняют счетную камеру. При работе с пробирками для подсчета лейкоцитов наливают 0,4 мл 3% раствора уксусной кисло ты и в нее выпускают 0,02 мл крови, отмеренной пипеткой от гемометра Сали. Тщательно встряхивают пробирки, затем в жидкость опускают пипетку и, набрав содержимое, заполняют счетную камеру. Так как лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов, то для получения достоверного и точного результата подсчет производят в 100 больших (неразграфленных) квадратах. Обычно в одном большом квадрате находится 1-2 лейкоцита. Число лейкоцитов в 1 мкл крови рассчитывается аналогично расчету числа эритроцитов по формуле
X = (А х 4000 х В)/Б,
где X - количество лейкоцитов в 1 мкл крови; А - количество лейкоцитов, сосчитанных в 1600 малых квадратах; Б - количество сосчитанных малых квадратов (1600); 4000 - величина, умножая на которую, мы получаем количество клеток в 1 мкл.
Интерпретация полученных данных. Нормальное количество лейкоцитов: 4.0 – 9.0 х 109/л. Уменьшение их числа в крови называется лейкопенией, увеличение - лейкоцитозом.
Лейкоцитоз может быть абсолютным (истинным) и относительным (перераспределительным).
Абсолютный лейкоцитоз – наблюдается при острых воспалительных процессах, некрозе тканей, острых бактериальных инфекциях (за исключением брюшного тифа, бруцеллеза, туляремии и др.), аллергических состояниях, злокачественных опухолях (с деструкцией тканей), закрытых травмах черепа и кровоизлияниях в мозг, диабетической и уремической коме, шоке, острой кровопотере, как первичная реакция – при лучевой болезни. Значительное повышение количество лейкоцитов встречается при лейкозах.
Относительный (перераспределительный) является следствием поступления лейкоцитов в ток крови из органов, служащих для нее депо. Это происходит после приема пищи (пищевой лейкоцитоз), горячих и холодных ванн, сильных эмоций (вегетососудистый лейкоцитоз), интенсивной мышечной работы (миогенный лейкоцитоз) и т.д.
Лейкопения. Лейкопения рассматривается как показатель угнетения функциональной способности костного мозга в результате воздействия токсических веществ (мышьяк, бензол и т.п.), некоторых медикаментов (сульфаниламиды, левомицетин, бутадион, иммуран, циклофосфан и т.п.), вирусов (гриппа, вирусного гепатита, кори и т.п.), микробов (брюшного тифа, бруцеллеза и т.п.), ионизирующей радиации, рентгеновского излучения и гиперспленизма (увеличение функции селезенки).
Лейкоцитоз и лейкопения редко характеризуются пропорциональным увеличением (снижением) суммарного числа лейкоцитов всех видов (например лейкоцитоз при сгущении крови); в большинстве случаев имеется увеличение (уменьшение) числа какого-либо одного типа клеток, поэтому применяют термины «нейтрофилез», «нейтропения», «лимфоцитоз», «лимфопения», «эозинофилия», «эозинопения», «моноцитоз», «моноцитопения», «базофилия».
При клинической оценке изменения количества лейкоцитов большое значение придается процентному соотношению отдельных форм лейкоцитов, то есть лейкоцитарной формуле.
Лейкоцитарная формула крови здорового человека:
Относительное количество Абсолютное количество
Базофилы……………………….0-1% 0-0,0650 х 109/л
Эозинофилы…………………….0.5-5% 0,02-0,30 х 109/л
Нейтрофилы: - миелоциты…………0% отсутствуют
- метамиелоциты……0% отсутствуют
- палочкоядерные…...1-6% 0,040-0,300 х 109/л
- сегментоядерные….47-72% 2,0-5,5 х 109/л
Лимфоциты……………………….19-37% 1,2-3,0 х 109/л
Моноциты………………………….3-11% 0,09-0,6 х 109/л
Подсчет лейкоцитарной формулы производят в окрашенных мазках периферической крови. Для правильной интерпрепатации результатов исследования лейкоцитарной формулы рекомендуется производить подсчет в абсолютных количествах, а не в относительных. Наиболее распространены методы окраски мазков по Романовскому-Гимзе, по Паппенгейму. Под иммерсией считают не менее 200 клеток, а затем выводят процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Анализ лейкограммы с учетом других показателей крови и клинической картины является ценным методом обследования, помогает в постановке диагноза и определении прогноза заболевания.
Основные причины нейтрофилеза.
-
Острые бактериальные инфекции – локализированные и генерализованные.
-
Воспаление или некроз ткани.
-
Миелопролиферативные заболевания.
-
Интоксикация.
-
Лекарственные воздействия (кортикостероиды).
-
Острые кровотечения.
Основные причины нейтропении.
-
Инфекции – бактериальные (брюшной тиф, бруцеллез, туляремия, паратифы) и вирусные (инфекционный гепатит, корь, грипп, краснуха и другие).
-
Миелотоксические влияния и супрессия гранулоцитопоэза (ионизирующая радиация; химические агенты – бензол, анилин, ДДТ; лекарственные воздействия – цитостатики и иммунодепрессанты; витамин-В12-фолиеводефицитная анемия, острый алейкемический лейкоз, апластическая анемия).
-
Воздействие антител (иммунные формы) – гиперчувтвительность к медикаментам, аутоиммунные заболевания (СКВ, ревматоидный артрит, хронический лимфолейкоз), изоиммунные проявления (гемолитическая болезнь новорожденных).
-
Перераспределение и депонирование в органах – шоковые состояния, заболевания со спленомегалией и гиперспленизмом.
-
Наследственные формы (семейная доброкачественная хроническая нейтропения).
Основные причины эозинофилии.
-
Аллергические заболевания.
-
Паразитарные инвазии (трихинеллез).
-
Хронические поражения кожи - псориаз, пузырчатка, экзема.
-
Опухоли (эозинофильные варианты лейкоза).
-
Другие заболевания – фибропластический эндокардит Леффлера, скарлатина.
-
В фазе выздоровления при инфекциях и воспалительных заболеваниях (благоприятный прогностический признак).
Причины эозинопении (анэозинофилии).
-
Повышенная адренокортикостероидная активность в организме.
-
Брюшной тиф.
Основные причины базофилии:
-
Хронический миелолейкоз и эритремия.
Основные причины моноцитоза.
-
Подострые и хронические бактериальные инфекции.
-
Паразитарные инфекции – лейшманиоз, малярия.
-
Гемобластозы – моноцитарный лейкоз, лимфогранулематоз, лимфомы.
-
Другие состояния – СКВ, саркоидоз, ревматоидный артрит, инфекционный моноцитоз; в период выздоровления от инфекций, при выходе из агранулоцитоза, после спленэктомии.
Снижение числа моноцитов имеет значение главным образом при оценке лимфоцитарно-моноцитарного соотношения при легочном туберкулезе.
Основные причины лимфоцитоза.
-
Инфекции – острые вирусные (инфекционный мононуклеоз, корь, краснуха, ветряная оспа), хронические бактериальные (туберкулез, сифилис, бруцеллез), протозойные (токсоплазмоз).
-
Гемобластозы (лимфолейкоз, лимфомы).
-
Другие заболевания - гипертиреоз, аддисонова болезнь, витамин-В12-фолиево-дефицитная анемия, гипо- и апластические анемии.
Лимфоцитопения наблюдается при СКВ, лимфогранулематозе, распространенном туберкулезе лимфоузлов, в терминальной стадии почечной недостаточности, острой лучевой болезни, иммунодефицитных состояниях, приеме глюкокортикоидов.
Увеличение или уменьшение числа отдельных видов лейкоцитов в крови может быть относительным или абсолютным. Если изменяется только процентное содержание того или иного вида лейкоцитов, то имеет место относительная нейтрофилия, относительная эозинопения и т.д. Увеличение или уменьшение абсолютного содержания какого-либо вида лейкоцитов, то есть количества данных клеток в единице объема крови, называют абсолютной нейтрофилией, абсолютной эозинопенией и т.д.
Сдвиг формулы влево (увеличение количества молодых форм нейтрофилов) – признак воспаления или некротического процесса в организме.
Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо характерен для лучевой болезни и витамин-В12-фолиеводефицитной анемии.
Отсутствие или значительное снижение числа всех видов зернистых лейкоцитов – гранулоцитов (нейтрофилов, эозинофилов, базофилов) обозначают термином агранулоцитоз. В зависимости от механизма возникновения различают миелотоксический (воздействие ионизирующего излучения, прием цитостатиков) и иммунный (гаптеновый и аутоиммунный агранулоцитоз).
5. Методика определения количество тромбоцитов. Диагностическая трактовка.
Существуют следующие методы определения количества тромбоцитов в единице объема крови:
1) методика Фонио;
2) подсчет в камере Бюркера с сеткой Горяева;
3) использование фазоконтрастной и люминисцентной микроскопии;
4) электронно-автоматический метод (счетчики «Культер», «Целлоскоп»).
Для подсчета тромбоцитов периферической крови чаще всего применяют методику Фонио.
Оборудование и реактивы:
1) 14% раствор магния сульфата.
Ход исследования: для предупреждения склеивания тромбоцитов предварительно на место укола пальца наносят каплю 0,14 % раствора магния сульфата и через нее делают прокол. Выступившую каплю крови смешивают с каплей магния сульфата и делают мазок, который окрашивают по Романовскому—Гимзе. Затем в мазке под микроскопом с иммерсионной системой одновременно подсчитывают 1000 эритроцитов и находящиеся среди них тромбоциты. Последние встречаются в препарате либо в одиночку, либо чаще разбросаны кучками между эритроцитами. По величине тромбоцит занимает приблизительно 1/3-1/4 эритроцита. Тромбоциты не имеют ядра и их цитоплазма окрашена в синеватый цвет с красноватым оттенком в центре. Зная содержание эритроцитов в 1 л крови, легко вычисляют абсолютное количество тромбоцитов.
Нормальное количество тромбоцитов в периферической крови: 180.0 – 320.0 х 109/л. (150-450 х 109/л согласно рекомендациям ВОЗ).
Интерпретация полученных данных.
Причины увеличения числа тромбоцитов (тромбоцитоза).
-
Миелопролиферативные заболевания - хронический миелолейкоз, эритремия, эссенциальная тромбоцитемия.
-
Воспалительные процессы – острая ревматическая лихорадка, ревматоидный артрит и др.
-
Злокачественные опухоли - лимфогранулематоз, рак.
-
Острая кровопотеря и гемолитические анемии.
-
Спленэктомия.
Причины уменьшения количества тромбоцитов (тромбоцитопении).
-
Врожденные (синдром Вискотта-Олдрича и др.) и приобретенные (идиопатическая иммунная тромбоцитопеническая пурпура, СКВ и др.), иммунодефициты.
-
Апластическая, витамин-В12-фолиеводефицитная, тяжелая железодефицитная анемии.
-
ДВС-синдром, гемангиомы.
-
Вирусные инфекции, риккетсиозы, малярия.
-
Гиперспленизм.
-
«Синие» врожденные пороки сердца, застойная сердечная недостаточность.
-
Лучевая болезнь.
-
Лекарственные воздействия (цитостатики).
6. Методика сбора мокроты.
Мокротой называется патологический секрет, выделяемый с кашлем из дыхательных путей. Мокрота собирается в чистую широкогорлую стеклянную посуду с закручивающейся крышкой в утренние часы при кашле, после тщательного полоскания рта и горла, до приема пищи. Собирать мокроту за сутки и больше нецелесообразно, так как длительное стояние ведет к размножению флоры и аутолизу клеточных элементов. При необходимости мокроту сохраняют в прохладном месте (в холодильнике).
Источником наиболее ценной информации является содержимое трахеобронхиального дерева, полученное при бронхоскопии (промывные воды бронхов).
7. Исследование мокроты: макроскопическое, микроскопическое, бактериоскопическое. Понятие о бактериологическом методе исследования мокроты.
При макроскопическом изучении обращают внимание на: характер мокроты, количество, цвет, запах, консистенцию, слоистость, наличие различные включений.
Характер мокроты определяется ее составом.
Слизистая – состоит из слизи (продукта слизистых желез дыхательных путей). Выделяется при острых бронхитах, разрешении приступа бронхиальной астмы.
Слизисто-гнойная – представляет смесь слизи и гноя, причем слизь преобладает, а гной включен в виде комочков или прожилок. Наблюдается при хронических бронхитах, бронхопневмонии.
Гнойно-слизистая – содержит слизь и гной (преобладание гноя, слизь имеет вид тяжей). Характерна для хронических бронхитов, бронхоэктазии, абсцедирующей пневмонии.
Гнойная – не имеет примеси слизи и появляется в случае открытого в бронх абсцесса легкого, при прорыве эмпиемы плевры в бронх.
Слизисто-кровянистая – состоит из слизи с прожилками крови или кровяного пигмента. Отмечается при катарах верхних дыхательных путей, бронхогенном раке, пневмонии.
Слизисто-гнойно-кровянистая – содержит слизь, гной и кровь, чаще равномерно перемешанные между собой. Появляется при бронхоэктазах, туберкулезе, актиномикозе легких, бронхогенном раке.
Кровавое отделяемое (кровохаркание) – встречается при туберкулезе, опухолях бронхов и легкого, ранении легкого, актиномикозе.
Серозное отделяемое – характерно для отека легких, представляет собой пропотевшую в полость бронхов плазму крови.
Количество мокроты (величина отдельных порций и суточные количества) зависят от характера заболевания и от способности больного к отхаркиванию.
Скудное количество мокроты – характерно для воспаления дыхательных путей (трахеит, острый бронхит в начальной стадии, бронхиальная астма, бронхопневмония).
Обильное количество мокроты (от 0.5 до 2 л) выделяется обычно из полостей легочной ткани, бронхов (бронхоэктатическая болезнь, абсцесс легкого, прорыв эмпиемы), при повышенном кровенаполнении легких и пропотевании в легкие и бронхи большого количества плазмы крови (отек легких).
Цвет и прозрачность мокроты зависят от ее характера и от состава вдыхаемых частиц.
Слизистая мокрота – стекловидная, прозрачная; слизисто-гнойная – стекловидная с желтым оттенком; гнойно-слизистая – желто-зеленоватая; гнойная – желто-зеленая; слизисто-кровянистая – стекловидная с кровянистым или ржавым оттенком; слизисто-гнойно-кровянистая – стекловидная с желтыми комочками, прожилками красного цвета или ржавыми оттенками; отделяемое при легочном кровотечении – жидкое, красного цвета, пенистое; при распаде опухоли легкого может наблюдаться мокрота в виде «малинового желе»; отделяемое при отеке легких – жидкое, прозрачно-желтое с опалесценцией, пенистое и клейкое.