Файл: Алгоритм лабораторной диагностики иппп. Рекомендации по описанию мазков мпо.ppt

-Neisseria gonorrhoeae (гонорея),
-Сhlamydia trachomatis (урогенитальный хламидиоз),
-Тrichomonas vaginalis (урогенитальный трихомониаз),
-Treponema pallidum (сифилис),
-Неrpes simplex virus 1-го и 2-го типов (генитальный герпес),
-Ниman papilloma virus неонкогенных типов (генитальные бородавки) и онкогенных типов (рак шейки матки)
- Мycoplasma genitalium? (По классификации МКБ- А63.8 Другие уточненные заболевания, передающиеся преимущественно половым путем. Пути инфицирования у мужчин и женщин: половой контакт)

Обследование населения на сифилис

РМП, и ее модификации (RPR-РПР, TRUST-ТРАСТ, VDRL-ВДРЛ)

Массовый скрининг населения с целью выявления больных с активными формами сифилитической инфекции

Поликлиники, стационары общего профиля за исключением специализированных

Декретированные контингенты

РМП, РПГА (или ИФА суммарные а/т)

Пациенты психоневрологических отделений

Пациенты офтальмологических отделений

Пациенты неврологических отделений

Пациенты кардиологических отделений

Доноры крови, спермы и тканей

Беременные, в том числе направляемые на искусственное прерывание беременности

ВИЧ-инфицированные

Особенности лабораторной диагностики ИППП

Прямые методы
- Микроскопические
- Культуральные (бактериологические)
- Молекулярно-биологические
ИФА, ПИФ – не используется!!!
ВПГ 1,2 тип – ИФА только с целью выявления циркулирующих антител (Ig M, IgG)

Диагностика трихомониаза

Верификация диагноза урогенитального трихомониаза базируется на результатах лабораторных исследований - обнаружении T.vaginalis или генетического материала возбудителя с помощью одного из методов: - микроскопического исследования нативного препарата, или «влажного мазка» (фазовоконтрастная или темнопольная микроскопия). Необходимым условием является проведение исследования немедленно после получения биологического материала. Наибольшая чувствительность и специфичность микроскопического исследования нативного препарата установлена при клинически выраженных формах заболевания

, в особенности у женщин; - молекулярно - биологические исследования, направленные на выявление специфических фрагментов ДНК (методом ПЦР) и/или РНК (методом НАСБА (NASBA)) Т. Vaginalis, с использованием тест-систем, разрешенных к медицинскому применению в Российской Федерации - культурального исследования, показанного при мало- и бессимптомных формах заболевания, а также в случаях, когда предполагаемый диагноз не подтверждается при микроскопическом исследовании. Однако метод отличается большей трудоемкостью и длительностью выполнения по сравнению с молекулярно-биологическими методами, что ограничивает его применение. Микроскопическое исследование окрашенных препаратов не рекомендуется использовать для диагностики урогенитального трихомониаза ввиду субъективизма при интерпретации результатов исследования.
Другие методы лабораторных исследований, в том числе, прямую иммунофлюоресценцию (ПИФ) и иммуноферментный анализ (ИФА) для обнаружения антител к T.vaginalis использовать для диагностики трихомонадной инфекции недопустимо.

Диагностика гонококковой инфекции

Верификация диагноза гонококковой инфекции базируется на результатах лабораторных исследований - обнаружении N. gonorrhoeae или генетического материала возбудителя с помощью одного из методов:
микроскопического исследования препарата, окрашенного 1% раствором метиленового синего и по Грамму.;
культурального исследования с использованием селективных питательных сред и определением ферментативных свойств N. gonorrhoeae (оксидазный тест и тесты ферментации сахаров). Метод позволяет определять чувствительность гонококков к антибактериальным препаратам;
молекулярно-биологических исследований, направленных на обнаружение специфических фрагментов ДНК и/или РНК N. gonorrhoeae, с использованием тест - систем, разрешенных к медицинскому применению в Российской Федерации.
У детей диагноз гонококковой инфекции устанавливается на основании результатов культурального и/или молекулярно-биологических методов исследования.

«Мазки на подтверждение»

Диагностика хламидийной инфекции

Верификация диагноза хламидийной инфекции базируется на результатах лабораторных исследований молекулярно-биологическими методами, направленными на обнаружение специфических фрагментов ДНК и/или РНК C. trachomatis, с использованием тест-систем, разрешенных к медицинскому применению в Российской Федерации.

Чувствительность методов составляет 98-100%, специфичность - 100%.
Метод выделения C. trachomatis в культуре клеток не рекомендуется применять в рутинных исследованиях и для установления этиологии бесплодия.
Другие методы лабораторных исследований, в том числе метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ), иммуноферментный анализ (ИФА) для обнаружения антител к C.trachomatis, микроскопический и морфологический методы недопустимо использовать для диагностики хламидийной инфекции!!!

Диагностика заболеваний, вызванных M.genitalium

Верификация диагноза заболеваний, вызванных M. genitalium, осуществляется с помощью молекулярно-биологических методов, направленных на обнаружение специфических фрагментов ДНК и/или РНК M. genitalium, с использованием тест-систем, разрешенных к медицинскому применению в Российской Федерации.
С целью оценки степени лейкоцитарной реакции и состояния микробиоценоза уретры, влагалища, цервикального канала проводится микроскопическое исследование клинического материала.
Другие методы лабораторных исследований, в том числе метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ), иммуноферментный анализ (ИФА) для обнаружения антител к M. genitalium недопустимо использовать для диагностики заболеваний, вызванных M. Genitalium!

Диагностика генитального герпеса

Диагноз устанавливается на основании клинических проявлений.
Лабораторные методы исследования используются для: - уточнения этиологии заболевания, - при атипичных формах заболевания, - с целью дифференциальной диагностики с другими заболеваниями.
Содержимое везикул, смывы с тканей и органов, мазки-отпечатки, соскобы, биологические жидкости и секреты организма (слизь, моча, секрет предстательной железы) исследуются молекулярно-биологическими методами с использованием тест-систем, разрешенных к медицинскому применению в Российской Федерации.
С целью выявления циркулирующих в сыворотке крови или других биологических жидкостях и секретах организма больного специфических противогерпетических антител (IgM, IgА, IgG,) может использоваться метод иммуноферментного анализа (ИФА).

Диагностика папилломавирусной инфекции

Типы ВПЧ низкого канцерогенного риска (НКР, низкоонкогенные) связаны с остроконечными кондиломами и дисплазиями легкой степени.

Типы ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР, высокоонкогенные) — 16, 18,31,33,35, 39,45, 51, 52, 56, 58,59, 66, 68 — наряду с остроконечными кондиломами и дисплазиями легкой степени, также индуцируют злокачественную трансформацию эпителия, приводящую к инвазивному раку.
Диагноз аногенитальных бородавок устанавливается на основании клинических проявлений. Для верификации диагноза могут использоваться лабораторные исследования:
исследование молекулярно-биологическими методами, позволяющими идентифицировать генотип ВПЧ, определять степень вирусной нагрузки и прогнозировать течение заболевания ;
цитологическое и морфологическое исследования, позволяющие исключить онкологическую патологию .
Лабораторная диагностика папилломавирусной инфекции включает выявление и количественное определение ДНК ВПЧ ВКР, генотипирование ВПЧ ВКР, выявление ДНК ВПЧ НКР.

Протоколы лабораторной диагностики ИППП

Протокол 1
микроскопическое исследование биологического материала (поверхностное клеточное отделяемое слизистых оболочек урогенитального тракта), для оценки воспалительной реакции (ПМЯЛ) и спектра морфотипов микроорганизмов (N. Gonorrhoea, T. Vaginalis, грибов рода Candida и др.) ;
культуральное исследование для выявления и определения чувствительности к антибиотикам N. gonorrhoea (у мужчин – из уретры, у женщин - в биологическом материале из цервикального канала); для выявления T. vaginalis (у мужчин – из уретры, у женщин - из задних боковых сводов влагалища). Материал хранится и транспортируется в специальных условиях, максимально обеспечивающих сохранение жизнеспособности исследуемых микроорганизмов;
молекулярно-биологическое исследование для выявления C. trachomatis, M. genitalium в биологическом материале из уретры, цервикального канала и/или влагалища, ВПГ 1,2 типов, Tr.pallidum в биоматериале с эрозивно-язвенных элементов, ВПЧ - из цервикального канала.

Протокол 2
У 10-15% пациентов возможно сочетание патологических состояний. Комплексное молекулярно-биологическое исследование является наиболее эффективным и информативным способом диагностики как отдельных, так и смешанных форм инфекционной патологии органов репродукции.
микроскопическое исследование биологического материала для оценки воспалительной реакции

, и спектра морфотипов микроорганизмов (N. Gonorrhoea, T. Vaginalis, грибов рода Candida и др.)
молекулярно-биологическое исследование биологического материала для выявления C. trachomatis, M. genitalium, N. Gonorrhoea, T. Vaginalis, а так же условно-патогенных микроорганизмов и вирусных инфекций из разных локализаций.

Алгоритм лабораторной диагностики

Микроскопическое исследование мазков

Микроскопическое исследование мазка включает в себя несколько этапов:
-Взятие мазка
-Лабораторное исследование мазков
-Расшифровка мазка

Для получения достоверных результатов лабораторных исследований у пациентов соблюдать следующие требования:
сроки получения клинического материала с учетом инкубационного периода заболевания и применения антибактериальных препаратов ( до начала лечения или не ранее, чем через 2 дня после окончания антибактериальной терапии), получение образцов клинического материала из уретры производить не ранее чем через 3 часа после последнего мочеиспускания, при наличии обильных гнойных выделений – через 15-20 минут после мочеиспускания;
получение образцов клинического материала из очагов максимальной концентрации возбудителя (с учетом пола, возраста пациента и возможных путей инфицирования);
производить получение клинического материала из цервикального канала перед менструацией или через 1-2 дня после ее окончания, при субъективно бессимптомном течении заболевания – в середине менструального цикла;
получение клинического материала производить на 2 предметных стекла из каждого очага инфекции, предметные стекла сухие, чистые и лишены дефектов (оптимально применять новые стекла для каждого пациента)
при получении клинического материала предотвращать возможную контаминацию резидентной микрофлорой урогенитального тракта, производить своевременную и качественную маркировку полученного материала, включая заполнение бланка направления с указанием : Ф.И.О. пациента, возраста , цели исследования, локализации, даты забора материала, соблюдать условия целостности образцов клинического материала в процессе его транспортирования в лабораторию

Другие условия, оказывающие влияние на результат лабораторного исследования:

1. Клинический материал влагалища для приготовления нативного мазка берут раньше всех других вагинальных проб. Сегмент влагалища, с которого получают пробу, зависит от клинической ситуации: при наличии обильных выделений (возможны трихомонадная или кандидозная инфекции) образец получают из заднего свода; в остальных клинических ситуациях – с боковых сводов влагалища, что позволяет оценить состояние вагинального микробиоценоза.