ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 16.04.2021
Просмотров: 14249
Скачиваний: 135
20 мкг (60 ME) в 1 мл (раствор А).
15 мл раствора А переносят в колбу для гидрирования вместимостью 50 мл, прибавляют около
0,2 г палладиевого катализатора, перемешивают и гидрируют в течение 15 мин в приборе,
изображенном на рис. 5. <*>
--------------------------------
<*> Рис. 5. Прибор для гидрирования.
а - газометр с водородом; б - бюретка, снабженная тройным краном; в - колба для гидрирования;
г - магнитная мешалка. (Рисунок не приводится).
При проведении гидрирования водород из газометра а забирают в бюретку б, снабженную
тройным краном и заполненную водой. Сначала тройной кран поворачивают так, чтобы провести
забор водорода из газометра, после чего кран газометра закрывают, а тройной кран бюретки
поворачивают так, чтобы водород из бюретки поступал в колбу для гидрирования, снабженную
небольшой вводной трубкой. Перемешивание раствора при гидрировании проводят с помощью
магнитной мешалки.
Для вытеснения воздуха из колбы через всю систему 3 раза пропускают водород. После
заполнения системы водородом колбу закрывают пробкой, включают магнитную мешалку и ведут
гидрирование при комнатной температуре. Расход водорода на гидрирование наблюдают по
уменьшению объема водорода в бюретке.
Примечание. Проба на полноту гидрирования: 1 мл фильтрата помещают в фарфоровую чашку и
удаляют растворитель упариванием на закрытой водяной бане. Остаток растворяют в 1 мл
хлороформа, прибавляют 5 мл раствора сурьмы хлорида; не должно появляться синего окрашивания.
В случае появления окраски гидрирование продолжают в течение более длительного времени,
прибавляя катализатор.
По окончании гидрирования в колбу прибавляют 0,3 г силикагеля марки КСМ или ШСМ,
перемешивают и фильтруют; 3 мл фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят
объем раствора пропанолом - 2 до метки и перемешивают (раствор Б).
3 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора
пропанолом - 2 до метки и перемешивают (раствор В).
Измеряют оптическую плотность раствора В на спектрофотометре при длинах волн 300, 310,
325, 334 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
В качестве раствора сравнения используют раствор Б.
Содержание витамина А в ME в одной таблетке или драже вычисляют, как описано выше, введя
в формулу расчета разведение в пропаноле - 2.
Примечания. 1. При анализе таблеток, покрытых оболочкой, средняя масса таблетки в формуле
не учитывается.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.
2. При анализе препаратов, не содержащих аскорбиновую кислоту, перед омылением
прибавляют к испытуемой навеске 0,1 г аскорбиновой кислоты.
3. 1 г 100% ретинола ацетата соответствует 2907000 ME. 1 г 100% ретинола пальмитата
соответствует 1817000 ME.
4. Пропанол-2 (изопропиловый спирт) (х. ч.) при измерении поглощения должен иметь
величину оптической плотности, не превышающую 0,01 в области от 320 до 350 нм и 0,05 - от 280 до
300 нм по сравнению с водой в кювете с толщиной слоя 10 мм.
5. Очистка азота: азот газообразный (ос. ч.) пропускают последовательно через поглотители со
щелочным раствором пирогаллола А [5 г пирогаллола А (ч. д. а.) на 100 мл 20% раствора едкого
кали], концентрированной серной кислотой, стеклянной ватой и плавленым кальция хлоридом.
6. Приготовление палладиевого катализатора: в трехгорлую колбу вместимостью 1,5-2 л с
мешалкой помещают 840 мл воды, 100 мл концентрированного раствора аммиака и 210 г аммония
карбоната (х. ч. или ч. д. а.).
При непрерывном перемешивании реакционную массу нагревают до температуры 50 град. С и в
течение 30 мин прибавляют раствор, полученный растворением 52,5 г кальция карбоната (ч. д. а.) в
смеси 130 мл концентрированной кислоты хлористоводородной с 130 мл воды. Температуру
реакционной массы поддерживают от 50 до 80 град. С. Выделившийся белый осадок
отфильтровывают и тщательно промывают водой до исчезновения запаха аммиака. После этого
осадок отжимают. В колбу с суспензией свежеосажденного кальция карбоната в 400 мл воды
прибавляют при интенсивном перемешивании горячий раствор, полученный растворением 5 г
палладия хлорида (ч. д. а. или ч.) в смеси 12 мл концентрированной хлористоводородной кислоты с
30 мл воды. Смесь перемешивают 10 мин, затем нагревают от 80 до 85 град. С и при этой
температуре перемешивают в течение 15 мин. Горячую смесь насыщают водородом (марки А) в
течение 6 ч. Приготовленный катализатор промывают водой до отсутствия ионов хлора. Получают
около 43 г палладированного кальция карбоната, который сушат при температуре от 100 до 105 град.
С до постоянной массы. Хранят в банке оранжевого стекла при комнатной температуре. Годен в
течение 3 мес.
2. Определение содержания витамина А
в жирах рыб и морских млекопитающих
Около 1,5 г жира (точная навеска) помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 0,1 г
аскорбиновой кислоты, 30 мл свежеприготовленного 10% спиртового раствора едкого кали и
нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин при температуре кипения
смеси. Содержимое колбы тотчас охлаждают, прибавляют 50 мл воды, переносят в делительную
воронку вместимостью 250 мл и трижды извлекают эфиром для наркоза: первый раз 50 мл, второй и
третий раз по 30 мл. Объединенные эфирные извлечения промывают сначала 30 мл воды, затем 50
мл 4% раствора едкого кали и снова водой от 30 до 40 мл до исчезновения щелочной реакции
промывных вод (проба с фенолфталеином). Промытые эфирные извлечения медленно фильтруют
через бумажный фильтр с 8 г безводного натрия сульфата в колбу для отгона. Фильтр с натрия
сульфатом 3 раза промывают эфиром по 10 мл, который фильтруют в ту же колбу. Эфир отгоняют в
токе азота на водяной бане при температуре не выше 40 град. С. Остаток растворяют в небольшом
объеме хлороформа для наркоза и разбавляют тем же хлороформом так, чтобы в 1 мл раствора
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.
содержалось около 30 ME витамина А; 0,4 мл полученного раствора переносят в кювету
фотоэлектроколориметра с толщиной слоя 10 мм и быстро прибавляют 4 мл хлороформного раствора
сурьмы хлорида, содержащего 2% уксусного ангидрида. Измеряют оптическую плотность раствора на
фотоэлектроколориметре при длине волны около 620 нм. Показание прибора отмечают не позднее
чем через 5 с после прибавления в кювету хлороформного раствора сурьмы хлорида.
По калибровочному графику находят содержание витамина А в международных единицах в 1 мл
испытуемого раствора.
Содержание витамина А в 1 г жира в международных единицах (МЕ) (X) вычисляют по
формуле:
CV
Х = ----,
а
где С - содержание витамина А в 1 мл раствора, найденное по калибровочному графику, в
международных единицах (МЕ); V - разведение в миллилитрах; а - навеска в граммах.
Примечания. 1. Построение калибровочного графика: около 0,1 г (точная навеска) раствора
ретинола ацетата в масле активностью 100000 ME в 1 мл для инъекций с учетом фактического
содержания витамина А разводят в хлороформе для наркоза таким образом, чтобы получить раствор,
содержащий 100 ME витамина А в 1 мл. Затем из него готовят последовательные разведения с
содержанием витамина А от 5 до 50 ME в 1 мл с интервалом 5 ME. Из каждого разведения отбирают
по 0,4 мл раствора и проводят колориметрическую реакцию так же, как при анализе испытуемого
раствора. Для построения калибровочного графика откладывают по оси ординат найденные значения
оптической плотности, а по оси абсцисс - соответствующие им количества витамина А в 1 мл
раствора в международных единицах.
При смене реактивов (особенно раствора сурьмы хлорида) калибровочный график проверяют,
используя для этого свежеприготовленные хлороформные растворы препарата витамина А,
применяемого в качестве эталонного раствора.
2. Приготовление хлороформного раствора сурьмы хлорида, содержащего 2% уксусного
ангидрида: 230 г сурьмы треххлорной помещают в колбу и растворяют в 1 л хлороформа для наркоза
при нагревании на водяной бане при температуре около 40 град. С. Колбу закрывают притертой
пробкой и оставляют на ночь. Прозрачную часть раствора сливают в мерный цилиндр вместимостью
1 л, прибавляют 2% (по объему) уксусного ангидрида, переносят в банку оранжевого стекла,
перемешивают и закрывают притертой пробкой. Раствор годен для анализа через сутки после
приготовления в течение 42 сут.
3. Определение содержания тиамина хлорида
и тиамина бромида (витамина B1)
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.
Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых
оболочкой, растертых в порошок, указанное в соответствующих частных статьях, количественно
переносят 30 миллилитрами раствора хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л) в мерную колбу
вместимостью 100 мл, взбалтывают, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и
фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного раствора готовят с использованием раствора
хлористоводородной кислоты (0,01 моль/л) раствор второго разведения так, чтобы содержание в нем
витамина B1 (в пересчете на тиамина хлорид) было около 0,001 мг в 1 мл.
1 мл полученного раствора помещают в делительную воронку с притертой пробкой
вместимостью 50 мл, во вторую делительную воронку помещают 1 мл раствора стандартного образца
тиамина хлорида. В обе делительные воронки прибавляют по 4 мл подкисленного раствора калия
хлорида и по 3 мл окислительной смеси; воронки одновременно встряхивают и оставляют стоять в
течение 1 мин, затем прибавляют по 15 мл изобутилового или изоамилового спирта, или бутанола-1,
одновременно энергично встряхивают в течение 2 мин и дают разделиться слоям. Водный слой
удаляют, спиртовой фильтруют через бумажный фильтр с 1 г безводного натрия сульфата.
Полученные фильтраты переносят в кювету флуориметра и измеряют флюоресценцию растворов при
длине волны около 436 нм. Установку прибора проводят по раствору рабочего стандартного образца
тиамина хлорида.
Содержание витамина B1 в пересчете на тиамина хлорид (C12H17ClN4OS х HCl) в одном драже
или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:
А1 х 0,001 х 100 х V3 х б А1 х V3 х б
Х = --------------------------- = ---------------------
A2 х а х V2 х 1000 А2 х а х V2 х 10000
где А1 - показание флуориметра испытуемого раствора; А2 - показание флуориметра раствора
рабочего стандартного образца тиамина хлорида; 0,001 - содержание тиамина хлорида в 1 мл
раствора рабочего стандартного образца в миллиграммах; 100, V2, V3 - разведения в миллилитрах; а -
навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного
драже или одной таблетки, г; 1000 - пересчет в граммы.
Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного образца тиамина хлорида:
0,1000 г тиамина хлорида, предварительно высушенного при температуре от 100 до 105 град. С в
течение 2 ч, растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л, прибавляют 10 капель
концентрированной хлористоводородной кислоты и доводят объем раствора водой до метки
(основной раствор). Раствор годен в течение 1 мес при хранении в банке оранжевого стекла с
притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.
1 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем
раствора водой до метки.
1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,001 мг тиамина хлорида.
Раствор годен в день приготовления.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.
2. Окислительная смесь: 0,01 г калия феррицианида растворяют в 1 мл воды и доводят объем
раствора 15% раствором едкого натра до 25 мл. Раствор готовят непосредственно перед
употреблением.
3. Изобутиловый спирт (ч. д. а.) или изоамиловый спирт (ч. д. а.), или бутанол-1 (ч. д. а.)
проверяют на отсутствие флюоресценции. В случае наличия флюоресценции спирт перед
употреблением подвергают очистке следующим образом: к 1 л спирта прибавляют от 15 до 20 г
активированного угля, энергично встряхивают в течение 30 мин, оставляют на сутки и отгоняют.
4. Приготовление подкисленного раствора калия хлорида: 125 г калия хлорида растворяют в 400
мл воды в мерной колбе вместимостью 500 мл, прибавляют 4,5 мл концентрированной
хлористоводородной кислоты и доводят объем раствора водой до метки.
5. Коэффициент пересчета тиамина хлорида на тиамина бромид-1,29.
4. Определение содержания рибофлавина (витамина В2)
Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых
оболочкой, растертых в порошок, указанных в соответствующих частных статьях, взбалтывают в
горячей воде при подогревании на водяной бане, количественно переносят в мерную колбу
вместимостью 500 мл, охлаждают, доводят объем раствора водой до метки и фильтруют; первые 10
мл отбрасывают. Из полученного раствора готовят раствор второго разведения с таким расчетом,
чтобы содержание в нем рибофлавина было около 0,0004 мг в 1 мл. В кюветы флуориметра
помещают: в одну - 10 мл испытуемого раствора, в другую - 10 мл раствора рабочего стандартного
образца рибофлавина и измеряют флюоресценцию при длине волны около 440 нм. Параллельно в
другие кюветы помещают: в одну - 10 мл испытуемого раствора и в другую - 10 мл раствора рабочего
стандартного образца рибофлавина, в каждую прибавляют по 0,1 г натрия гидрокарбоната и натрия
гидросульфита, перемешивают и измеряют флюоресценцию растворов.
Установку проводят по раствору рабочего стандартного образца рибофлавина.
Содержание C17H2ON4O6 (рибофлавина) в одном драже или одной таблетке в граммах (X)
вычисляют по формуле:
(А - А1) х 0,0004 х 500 х V3 х б
Х = -------------------------------- =
(В - В1) х а х V2 х 1000
(А - A1) х V3 х б
= --------------------------
(В - В1) х а х V2 х 5000
где А - показание флуориметра испытуемого раствора; А1 - то же после гашения флюоресценции; В -
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья –
Постоянно действующий третейский суд.