ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 08.09.2021
Просмотров: 7137
Скачиваний: 267
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Цитологическое исследование (см. главу 18).
Вирусологическое исследование. Для выделения чистой культуры вируса из исследуемого материала применяют клеточные культуры эпителиального происхождения (первичные культуры эмбриональных клеток почки человека, перевиваемые линии HeLa, НЕр-2 и др.). Индикацию вируса производят по ЦПД, которое развивается в среднем через 6 дней и проявляется образованием внутриядерных включений и дегенерацией зараженных клеток. Для идентификации и типирования используют реакции ИФ, ИФА и др., позволяющие обнаружить вирусные антигены в зараженной культуре, а также ПЦР и метод ДНК-зондов. Необходимо помнить, что аденовирусы способны к бессимптомной персистенции в организме, поэтому диагностическое значение имеет присутствие вируса только в материале из пораженного органа.
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку-лярно-биологические исследования. Иммунохимические исследования. Присутствие антигенов вируса в клетках исследуемого материала может быть выявлено методом ИФ. Присутствие вирусных белков (антигенов) в исследуемом материале может быть выявлено с помощью чувствительных серологических реакций: ИФА, РИА и др.
Молекулярно-биологические исследования. Вирусные нуклеиновые кислоты в исследуемом материале обнаруживают с помощью ПЦР или метода ДНК-зондов.
Серодиагностика. Наличие типоспецифических противоаде-новирусных антител в крови определяют с помощью различных серологических реакций, включая РСК, РТГА, РН, ИФА и др. Серодиагностику осуществляют методом парных сывороток и применяют преимущественно для ретроспективного подтверждения диагноза. Диагностическое значение имеет нарастание титра специфических противовирусных антител в поздней сыворотке не менее чем в 4 раза.
• Микробиологическая диагностика парвовирусной инфекции
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, носоглоточные смывы.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку-лярно-биологические исследования. Иммунохимические исследования. Присутствие антигенов вирусных частиц в исследуемом материале может быть выявлено методом ИЭМ (см. главу 11). Присутствие вирусных белков (антигенов) в исследуемом материале может быть выявлено с помощью чувствительных серологических реакций: ИФА, РИА и др.
Молекулярно-биологические исследования. Вирусную ДНК в исследуемом материале обнаруживают с помощью ПЦР или метода ДНК-зондов.
Серодиагностика. Наличие специфических противовирусных IgM, выявляемых методом ИФА, свидетельствует об активной инфекции.
• Микробиологическая
диагностика инфекции, вызванной ви
русом
ВК
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, моча.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Цитологическое исследование. В осадке мочи присутствуют измененные клетки с признаками ЦПД (увеличение клеток, наличие одиночных базофильных внутриядерных включений).
Вирусоскопическое исследование. Зрелые вирусные частицы в моче и в зараженных клетках могут быть обнаружены методом электронной микроскопии.
Вирусологическое исследование. Выделение BKV из крови и мочи осуществляют путем заражения клеточных культур человеческого и животного происхождения.
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку-лярно-биологические исследования .Иммунохимические исследования. Присутствие вирусных белков (антигенов) в исследуемом материале может быть выявлено с помощью чувствительных серологических реакций: ИФА, РИА и др.
Молекулярно-биологические исследования. Вирусные ДНК в зараженных клетках обнаруживают методом ДНК-зондов (ДНК-гибридизации in situ), ПЦР.
Серодиагностика. Обнаружение антител к вирусным белкам является малоинформативным, поскольку антитела присутствуют также у здоровых вирусоносителей.
• Диагностические, профилактические и лечебные препараты
Живая ослабленная паротитная вакцина. Содержит аттенуи-рованный штамм вируса паротита. Применяют для специфической профилактики эпидемического паротита. Вводят парентерально детям в возрасте 12—15 мес.
Живая ослабленная коревая вакцина. Содержит аттенуиро-ванный штамм вируса кори. Применяют для специфической профилактики кори. Вводят парентерально детям в возрасте 12—15 мес.
Иммуноглобулин человеческий противокоревой. Получают из крови серопозитивных здоровых доноров. Применяют для создания пассивного иммунитета с целью экстренной профилактики кори при контакте.
Живая ослабленная краснушная вакцина. Содержит аттенуи-рованный штамм вируса краснухи. Применяют для специфической профилактики краснухи. Вводят парентерально детям в возрасте 12—15 мес.
Иммуноглобулин нормальный человеческий. Получают путем фракционирования крови здоровых доноров. Неспецифический препарат, содержащий антитела различной специфичности. Применяют для создания пассивного иммунитета с целью экстренной профилактики паротита, кори, краснухи при контакте.
Вакцина ящура. Применяют для специфической профилактики ящура у сельскохозяйственных животных.
Осповакцина. Содержит вирус осповакцины. Применяют для специфической профилактики натуральной оспы. С 1980 г. обязательная вакцинация отменена.
Живая ослабленная пероральная аденовирусная вакцина. Содержит аттенуированные штаммы аденовирусов серотипов 4 и 7. Применяют в ряде стран для специфической профилактики аденовирусной пневмонии у новобранцев.
Инактивированная культуральная вакцина против вирусов простого герпеса. Применяют для специфической профилактики рецидивов простого герпеса.
Живая ослабленная вакцина против ветряной оспы. Содержит аттенуированный штамм вируса ветряной оспы/опоясывающего лишая. Применяют в ряде стран для специфической профилактики ветряной оспы.
Иммуноглобулин человеческий против ветряной оспы. Получают из крови серопозитивных здоровых доноров. Применяют для создания пассивного иммунитета с целью экстренной профилактики ветряной оспы при контакте.
Противовирусные препараты. Интерферон человеческий лейкоцитарный; интерферон рекомбинантный; неовир и другие индукторы интерферона. Применяют для создания пассивного иммунитета с целью экстренной профилактики рецидивов и лечения герпесвирусных инфекций.
Ацикловир и его производные, цидофовир, аденозин-ара-бинозид, трифлюридин, ганцикловир, тромантадин, фоскар-нет. Применяют для профилактики рецидивов и лечения герпесвирусных инфекций.
Глава 22
ОНКОГЕННЫЕ ВИРУСЫ И ВИРУСЫ ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА (ВИЧ)
Онкогенные вирусы представляют собой группу неродственных вирусов (табл. 22.1), способных вызывать персистирующую инфекцию в клетках организма человека, приводящую к их трансформации (иммортализации). Трансформированные клетки приобретают новые свойства — высокую скорость размножения, способность к бесконтрольному неограниченному делению, утрачивают чувствительность к сигналам, ингибирующим размножение, включая контактное ингибирование. Происходит изменение их морфологии и метаболизма. Появление трансформиро-
\**« A/ Название вируса Вызываемые заболевания СЕМЕЙСТВО Papovaviridae РОД Papillomavirus НРУ-16, ЯРК-18 и др. Доброкачественные папилломы различных локализаций, опухоли кожи и слизистых оболочек верхних дыхательных путей, гениталий (рак шейки матки) РОД Poliomavirus вирус ВК (BKV) Поражения почек (см. также главу 21) вирус JC (JCV) Мультифокальная прогрессирующая лейкоэнцефалопатия (см. также главу 19) СЕМЕЙСТВО Herpesviridae ПОДСЕМЕЙСТВО Gammaherpesvirinae РОД Lymphocryptovims вирус Эпштейна— Барр (EBV) Т-клеточные лейкозы/лимфо-мы, эндемическая лимфома Беркитта, карцинома носоглотк РОД Rhadinovirus герпесвирус человека 8-го типа Саркома Капоши (ЯЯК-8) СЕМЕЙСТВО Hepadnaviridae вирус гепатита В (HBV) Гепатоцеллюлярная карцинома СЕМЕЙСТВО Retroviridae РОД Deltaretrovirus Т-лимфотропные вирусы че- Острый Т-клеточный лимфо-ловека типов 1, 2, 5 (HTLV-1, цитарный лейкоз/лимфома, HTLV-2, HTLV-5) тропический спастический паралич (см. также главу 19) РОД Lentivirus вирусы иммунодефицита че- ВИЧ-инфекция/Синдром при-ловека (ВИЧ) 1-го, 2-го типа обретенного иммунодефицита (Я/К-1, HIV-2) (ВИЧ/СПИД) |
зистых оболочек, преимущественно респираторного и гени-тального тракта. HPVявляются возбудителями доброкачественных разрастаний — папиллом (бородавок) ладоней и ступней (чаще HPVтипов 1, 2, 3, 4), ротовой полости и гортани (чаще HPV6 и 11-го типов), наружных половых органов — candyloma acuminatum (HPV 6, 11, 42—44-го типов). С ЯРК-инфекцией также связывают развитие ряда злокачественных новообразований: плоскоклеточного рака кожи, кератокарциномы, мела-номы — в клетках этих опухолей в некоторых случаях удается обнаружить HPV типов 37, 38, 41 и 48, интраэпителиальные неоплазии генитального тракта (шейки матки, вульвы, полового члена) ассоциированы преимущественно с HPV типов 6, 11, 16 и 18. Наиболее высоко онкогенными являются HPV типов 16 и 18. Эти вирусы в 90—100 % случаев обнаруживаются в опухолевых клетках при карциноме шейки матки и выявляются при раке прямой кишки и карциноме носоглотки и гортани.
Полиомавирусы вызывают опухоли у лабораторных животных. У человека представители этого рода — вирусы ВК (BKV) и JC (JCV) — вызывают пожизненную бессимптомную латентную персистирующую инфекцию. Заболевания развиваются только на фоне иммунодефицита. BKV является возбудителем геморрагического цистита (см. главу 21). JCV вызывает развитие медленной инфекции — мультифокальной лейкоэнцефало-патии (см. главу 19).
Вирус Эпштейна—Барр является возбудителем инфекционного мононуклеоза (см. главу 21) и вызывает пожизненную бессимптомную латентную инфекцию, персистируя в незрелых В-лимфоцитах. Латентная инфекция сопровождается трансформацией В-лимфоцитов. При недостаточном защитном клеточном иммунитете бесконтрольная пролиферация трансформированных В-лимфоцитов может привести к развитию злокачественной опухоли — лимфомы. Специальная лабораторная диагностика не проводится.
Герпесвирус человека 8-го типа (HHV-8) вызывает пожизненную бессимптомную латентную инфекцию. С его реактивацией на фоне иммунодефицита (СПИД, возраст старше 60 лет) связывают развитие сосудистой опухоли — ангиосар-комы Капоши. Специальная лабораторная диагностика не проводится.
Вирус гепатита В является возбудителем вирусного гепатита В (см. главу 20). В случае хронической активной формы заболевания через 10—35 лет может развиться первичный рак печени. Более чем в 80 % случаев в опухолевых клетках обнаруживают дефектные провирусы. Специальная лабораторная диагностика не проводится.
Среди онкогенных ретровирусов связь с опухолями человека установлена только для Т-лимфотропного вируса человека 1-го типа — HTL V-1. Вирус вызывает пожизненную бессимптомную латентную инфекцию, персистируя в Т-лимфоцитах хелперах (CD4+). Заболевания — острый Т-клеточный лимфоцитарный лейкоз/лимфома или тропический спастический паралич — развивается менее чем в 5 % случаев и имеет длительный инкубационный период.
Вирусы иммунодефицита человека 1-го и 2-го типа (ВИЧ-1 и ВИЧ-2) являются возбудителями медленной инфекции с длительным инкубационным (латентным) периодом от 3 до 10 лет и более. Первичная инфекция может протекать бессимптомно или с неспецифическими гриппоподобными проявлениями. После длительного латентного периода у ВИЧ-инфицированных лиц развивается синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), который характеризуется снижением содержания в крови CD4+ Т-лимфоцитов (менее 500/мм3) и разнообразными клиническими проявлениями, включая СПИД-ассоциированные оппортунистические инфекции и опухоли. Для предотвращения распространения и своевременного начала лечения первостепенное значение имеет ранняя диагностика ВИЧ-инфекции. В общей стратегии лабораторного обследования с целью выявления ВИЧ/СПИД существуют следующие направления: обследование больных с клинической картиной СПИД или СПИД-ассоциированных заболеваний (оппортунистических инфекций и опухолей); обследование здоровых лиц, контактировавших с больными (половые контакты, мать—ребенок и др.); обследование беременных, рожениц и лиц при плановой госпитализации; анонимное обследование всех желающих. Строго обязательным является обследование доноров крови, спермы, костного мозга и других с целью выявления потенциальных источников инфекции и предотвращения ят-рогенного заражения.
Тема 22.1. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗВАННЫХ ОНКОГЕННЫМИ ВИРУСАМИ ЧЕЛОВЕКА И ВИРУСАМИ ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА
План
Программа
Биологические свойства онкогенных вирусов. Вирусные и клеточные онкогены и антионкогены. Роль онкогенных вирусов в патогенезе злокачественных но вообразований человека.
Биологические свойства ВИЧ. Экология ВИЧ и эпидемиология ВИЧ-инфекции, группы риска. Патогенез, диагностика, принципы профилактики и лечения ВИЧ/СПИД. СПИД-ассоциированные оппортунисти ческие инфекции.