ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 08.09.2021
Просмотров: 7139
Скачиваний: 267
Список сокращений
БГКП — бактерии группы кишечной палочки
ВИЧ — вирус иммунодефицита человека
ГЖХ — газожидкостная хроматография
ГЗТ — гиперчувствительность замедленного типа
ЖСА — желточно-солевой агар
ИФ — иммунофлюоресценция
ИФА — иммуноферментный анализ
ИЭМ — иммуноэлектронная микроскопия
ИЭФ — иммуноэлектрофорез
КОЕ — колониеобразующие единицы
КС — клеточная стенка
ЛПС — липополисахарид
МКАТ — моноклональные антитела
МПА — мясопептонный агар
МПК — минимальная подавляющая концентрация
НК — нуклеиновая кислота
ООИ — особо опасная инфекция
ОРВИ — острая респираторная вирусная инфекция
ОРЗ — острое респираторное заболевание
ПМ — плазматическая мембрана
ПЦР — полимеразная цепная реакция
РА — реакция агглютинации
РГА — реакция гемагглютинации
РИА — радиоиммунный анализ
РН — реакция нейтрализации
РИГА — реакция непрямой гемагглютинации
PC К — реакция связывания комплемента
РТГА — реакция торможения гемагглютинации
СМЖ — спинномозговая жидкость
СПИД — синдром приобретенного иммунодефицита
ЦПД — цитопатическое действие
ЧК — чистая культура
CTL — цитотоксические лимфоциты
MAC — комплекс Mycobacterium tuberculosis
МТС — комплекс Mycobacterium avium
spp. — виды (species)
Часть I
ОБЩАЯ МЕДИЦИНСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ, ВИРУСОЛОГИЯ И ИММУНОЛОГИЯ
Глава 1
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ЛАБОРАТОРИИИ ИХ ОБОРУДОВАНИЕ
Введение. Все микробиологические, биохимические и моле-кулярно-биологические исследования микроорганизмов проводят в специальных лабораториях, структура и оборудование которых зависят от объектов исследования (бактерий, вирусов, грибов, простейших), а также от их целевой направленности (научные исследования, диагностика заболеваний). Изучение иммунного ответа и серодиагностика заболеваний человека и животных осуществляют в иммунологических и серологических (serum — сыворотка крови) лабораториях.
Бактериологические, вирусологические, микологические и серологические (иммунологические) лаборатории входят в состав санитарно-эпидемиологических станций (СЭС), диагностических центров и крупных больниц. В лабораториях СЭС выполняют бактериологические, вирусологические и серологические анализы материалов, полученных от больных и контактировавших с ними лиц, обследуют бактерионосителей и проводят санитарно-микробиологические исследования воды, воздуха, почвы, пищевых продуктов и т.д.
В бактериологических и серологических лабораториях больниц и диагностических центров проводят исследования с целью диагностики кишечных, гнойных, респираторных и других инфекционных заболеваний, осуществляют микробиологический контроль за стерилизацией и дезинфекцией.
Диагностику особо опасных инфекций (чума, туляремия, сибирская язва и др.) проводят в специальных режимных лабораториях, организация и порядок деятельности которых строго регламентированы.
В вирусологических лабораториях диагностируют заболевания, вызванные вирусами (грипп, гепатит, полиомиелит и др.), некоторыми бактериями — хламидиями (орнитоз и др.) и рик-кетсиями (сыпной тиф, Ку-лихорадка и др.). При организации и оборудовании вирусологических лабораторий учитывают специфику работы с вирусами, культурами клеток и куриными эмбрионами, требующую строжайшей асептики.
В микологических лабораториях проводят диагностику заболеваний, вызываемых патогенными грибами, возбудителями микозов.
Лаборатории обычно размещаются в нескольких помещениях, площадь которых определяется объемом работ и целевым назначением. В каждой лаборатории предусмотрены:
а) боксы для работы с отдельными группами возбудителей;
б) помещения для серологических исследований;
в) помещения для мойки и стерилизации посуды, приготовления питательных сред;
г) виварий с боксами для здоровых и подопытных животных;
д) регистратура для приема и выдачи анализов.
Наряду с этими помещениями в вирусологических лабораториях имеются боксы для специальной обработки исследуемого материала и работы с культурами клеток.
Оборудование микробиологических лабораторий. Лаборатории снабжены рядом обязательных приборов и аппаратов.
Приборы для микроскопии: биологический иммерсионный микроскоп с дополнительными приспособлениями (осветитель, фазово-контрастное устройство, темнопольный конденсор и др.), люминесцентный микроскоп.
Термостаты и холодильники.
Приборы для приготовления питательных сред, растворов и т.д.: аппарат для получения дистиллированной воды (дистиллятор), технические и аналитические весы, рН-метры, аппаратура для фильтрования, водяные бани, центрифуги.
Набор инструментов для манипуляций с микробами: бактериологические петли, шпатели, иглы, пинцеты и др.
Лабораторная
посуда: пробирки, колбы, чашки Петри,
матрацы, флаконы, ампулы, пастеровские
и градуированные пипетки и др., аппарат
для изготовления ватно-марлевых про
бок.
Крупные диагностические комплексы имеют автоматические анализаторы и компьютеризированную систему оценки полученной информации.
В лаборатории выделено место для окраски микроскопических препаратов, где находятся растворы специальных красителей, спирт, кислоты, фильтровальная бумага и др. Каждое рабочее место снабжено газовой горелкой или спиртовкой и емкостью с дезинфицирующим раствором. Для повседневной работы лаборатория должна располагать необходимыми питательными средами, химическими реактивами, диагностическими препаратами и другими материалами.
В крупных лабораториях имеются термостатные комнаты Для массового выращивания микроорганизмов, постановки серологических реакций. Для выращивания, хранения культур, стерилизации лабораторной посуды и других целей используют следующую аппаратуру.
Термостат.
Аппарат, в котором поддерживается
постоянная температура. Оптимальная
температура для размножения большинства
патогенных микроорганизмов 37 °С.
Термостаты
бывают воздушными и
водяными.
Микроанаэростат. Аппарат для выращивания микроорганизмов в анаэробных условиях.
СО2 -инкубатор. Аппарат для создания постоянной температуры и атмосферы определенного газового состава. Предназначен для культивирования микроорганизмов, требовательных к газовому составу атмосферы.
Холодильники. Используют в микробиологических лабораториях для хранения культур микроорганизмов, питательных сред, крови, вакцин, сывороток и прочих биологически активных препаратов при температуре около 4 "С. Для хранения препаратов при температуре ниже О °С применяют низкотемпературные холодильники, в которых поддерживается температура -20 °С или -75 'С.
Центрифуги. Применяют для осаждения микроорганизмов, эритроцитов и других клеток, для разделения неоднородных жидкостей (эмульсии, суспензии). В лабораториях используют центрифуги с различными режимами работы.
Сушилъно-стершшзационный шкаф (печь Пастера). Предназначен для суховоздушной стерилизации стеклянной лабораторной посуды и других жаростойких материалов.
Стерилизатор
паровой (автоклав). Предназначен для
стерилизации перегретым водяным
паром (под давлением). В микробиологических
лабораториях используют автоклавы
разных
моделей (вертикальные,
горизонтальные, стационарные, переносные).
Тема 1.1. БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЕ, ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЕ, МИКОЛОГИЧЕСКИЕ, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ЛАБОРАТОРИИ И ИХ ОБОРУДОВАНИЕ. УСТРОЙСТВО СОВРЕМЕННЫХ МИКРОСКОПОВ. МЕТОДЫ МИКРОСКОПИИ. МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ МОРФОЛОГИИ МИКРООРГАНИЗМОВ
План
Программа
Правила работы и организация микробиологических (бактериологических, вирусологических, микологических) лабораторий.
Основные приборы и оборудование микробиологической лаборатории.
Микроскопы и микроскопическая техника. Правила работы с иммерсионным микроскопом (объективами).
а Демонстрация
Устройство и применение основных приборов и оборудования, используемого в микробиологических лабораториях: термостата, центрифуг, автоклава, сушильного шкафа, инструментария и посуды.
Устройство биологического микроскопа. Различные методы микроскопии: темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная.
Препараты микробов (дрожжей и бактерий) при различных методах микроскопии.
Задание студентам
1. Микроскопировать и зарисовать препараты дрожже-подобных грибов рода Candida, используя различные виды микроскопии.
Методические указания
Правила работы в микробиологических лабораториях. Работу в микробиологической лаборатории медицинского учреждения проводят с возбудителями инфекционных заболеваний — патогенными микроорганизмами. Поэтому для предохранения от заражения персонал обязан строго соблюдать правила внутреннего распорядка.
Все сотрудники должны работать в медицинских халатах, шапочках и сменной обуви. Вход в лабораторию без халата категорически воспрещен. В необходимых случаях работающие надевают на лицо маску из марли. Работа с особо опасными микробами регламентируется специальной инструкцией и проводится в режимных лабораториях.
В лаборатории запрещается курить и принимать пищу.
Рабочее место должно содержаться в образцовомпорядке. Личные вещи сотрудников следует хранить в специально отведенном месте.
При случайном попадании инфицированного материала на стол, пол и другие поверхности это место необходимо тщательно обработать дезинфицирующим раствором.
Хранение, наблюдение за культурами микробов и их уничтожение должны производиться согласно специальной инструкции. Культуры патогенных микробов регистрируют в специальном журнале.
По окончании работы руки следует тщательно вымыть, а при необходимости обработать дезинфицирующим раствором.
Микроскопы и методы микроскопии
Для микробиологических исследований используют несколько типов микроскопов (биологический, люминесцент-