Файл: Дипломная работа По специальности 060301 фармация Пятигорск, 2017 Работа выполнена на кафедрах.docx
Добавлен: 11.12.2023
Просмотров: 105
Скачиваний: 2
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
, диффузию содержимого, обеспечивающих удобство применения. Используют тубы из металла и полимерных материалов вместимостью 10г .
2.2. Изучение кинетики высвобождения доксициклина гидрохлорида из геля и мази.
Одним из фармацевтических факторов, влияющих на скорость и степень высвобождения действующих веществ из гелей, является вид используемой основы.
Исследования по выбору оптимальной основы осуществляли по степени высвобождения доксициклина гидрохлорида методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану. Для этого образцы геля помещали в специальное устройство для диализа, имитирующее проникновение лекарственного вещества в слизистые оболочки тканевого субстрата. Критерием оценки степени и скорости высвобождения служила кинетика высвобождения изучаемого препарата в зависимости от вида основы и времени диализа.
Методика проведения эксперимента
Навески массой 2,0 г наносили на целлофановую мембрану диализной трубки. Диализную трубку опускали в среду для диализа объемом 25 мл так, чтобы трубка была погружена на 3 – 4 мм. Диализная установка в ходе эксперимента термостатировалась при температуре 37°±2°С. Пробы отбирали в количестве 5 мл через 30, 60, 90,120 и 180 мин от начала эксперимента, восполняя объём соответствующей средой. В отобранной пробе определяли содержание доксициклина гидрохлорида методом спектрофотометрии при длинах волн – 277 нм. Были изучены 2 образца геля и мазь.
.
Таблица № 1 - Степень высвобождения доксициклина гидрохлорида из гелей и мази, приготовленных на различных основах
Рисунок 1 - Кинетика высвобождения доксициклина гидрохлорида из I основыX
Рисунок 2 - Кинетика высвобождения доксициклина гидрохлорида из II основыX
Рисунок 3 - Кинетика высвобождения доксициклина гидрохлорида из III основыX
Как следует из таблицы 1 и рисунков (1,2,3), концентрация доксициклина гидрохлорида в диализатах увеличивается с увеличением времени диализа. Оценку результатов эксперимента проводили с помощью коэффициентов диффузии (Kd) и расчёта скорости высвобождения (таблица №1) для испытуемых нами гелей за 15, 30, 45 и 60 минут рассчитанных по формуле:
, где
Ct – концентрация метилурацила или доксициклина гидрохлорида в диализате за время t, мг/мл;
Co – максимально возможная концентрация метилурацила или доксициклина гидрохлорида в диализате, мг/мл;
S – площадь диффузии, см²;
t – время диализа, мин.
Результаты представлены в таблицах 2-4.
Таблица 2 - Значения коэффициентов диффузии для 1 геля
Таблица 3 - Значения коэффициентов диффузии для 2 геля
Таблица 4 - Значения коэффициентов диффузии для 3 геля
Как видно из данных таблиц 2-4 значения коэффициентов диффузии для трех гелей плавно повышались в течение всего времени высвобождения – 90 минут, затем уменьшается.
Антимикробную активность определяли методом диффузии в агар (способ «колодцев»). Данный метод основан на оценке угнетения роста тест-штаммов микроорганизмов под воздействием исследуемых веществ.
В качестве тест-культур были выбраны следующие виды бактерий: Staphylococcus aureus (Type), Escherichia coli 055, Escherichia coli М17, Bacillus cereus – 96, Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris.
Антимикробную активность доксициклиновых мазей на различных основах сравнивали с действием 1% раствора доксициклина, приготовленного на 0,9% хлориде натрия.
Оценку результатов определения антимикробной активности проводили путём измерения диаметра зоны задержи роста тест-культур микроорганизмов вокруг «колодца», включая диаметр самого «колодца» [1].
Критерии оценки:
1) отсутствие зоны задержки роста – испытуемая культура не чувствительна к данной концентрации препарата;
2) диаметр зоны задержки роста 10 мм – умеренная чувствительность культуры к данной концентрации препарата;
3) диаметр зоны задержки роста более 10 мм – высокая чувствительность испытуемой культуры к данной концентрации препарата.
Результаты и обсуждение.
Результаты определения антимикробной активности исследуемых веществ представлены в таблице 1.
Таблица 1 Оценка диаметров зон подавления роста тест-культур микроорганизмов.
1-Staphylococcus aureus (Type),
2- Escherichia coli 055,
3- Escherichia coli М17,
4- Bacillus cereus – 96,
5- Pseudomonas aeruginosa,
6- Proteus vulgaris,
Результаты и обсуждение.
Из данных, приведённых в таблице 1, видно, что препарат сравнения - 1% раствор доксициклина, обладает выраженной антимикробной активностью, поскольку во всех тест-культурах диаметр зон подавления роста оказался больше 10 мм.
При этом действие препарата на основе КМС анвилон было выражено в равной степени и сравнимо с таковым для 1% раствора доксициклина в отношении Proteus vulgaris, но превышало действие препарата сравнения в отношении Escherichia coli 055 и Bacillus cereus – 96. Действие препарата на основе КМС анвилон на Staphylococcus aureus (Type) и Pseudomonas aeruginosa оказалось несколько ниже в сравнении с 1% раствором доксициклина. Антимикробный эффект в тест-культуре Escherichia coli М17 значительно уступал препарату сравнения.
Антимикробное действие препарата на основе ланолин-вазелин несколько превышало антибактериальный эффект 1% раствора доксициклина на Escherichia coli 055 и существенно превышало его в отношении Bacillus cereus – 96. Действие на Staphylococcus aureus (Type) и Escherichia coli М17 было наименее выраженным. Подавление роста Pseudomonas aeruginosa было незначительно снижено в сравнении с 1% раствором доксициклина. Антимикробный эффект отсутствовал на тест-культуру Proteus vulgaris, так как зона подавления роста составила меньше 10 мм.
Антимикробное действие препарата на основе Beneceel TYPE: K4M-PH-CR 1% оказалось максимальным и превысило эффект 1% раствора доксициклина в отношении Bacillus cereus – 96. Зоны подавления роста тест-культур Staphylococcus aureus (Type), Escherichia coli М17 и Pseudomonas aeruginosa оказались значительно меньше в сравнении с 1% раствором доксициклина и сопоставимы с таковым в отношении Escherichia coli 055. Антимикробное действие на Proteus vulgaris отсутствовало.
Таким образом, можно сделать вывод, что наибольшим антимикробным действием из исследуемых лекарственных средств обладает препарат на основе КМС анвилон.
2.5. Выводы по главе
2.2. Изучение кинетики высвобождения доксициклина гидрохлорида из геля и мази.
Одним из фармацевтических факторов, влияющих на скорость и степень высвобождения действующих веществ из гелей, является вид используемой основы.
Исследования по выбору оптимальной основы осуществляли по степени высвобождения доксициклина гидрохлорида методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану. Для этого образцы геля помещали в специальное устройство для диализа, имитирующее проникновение лекарственного вещества в слизистые оболочки тканевого субстрата. Критерием оценки степени и скорости высвобождения служила кинетика высвобождения изучаемого препарата в зависимости от вида основы и времени диализа.
Методика проведения эксперимента
Навески массой 2,0 г наносили на целлофановую мембрану диализной трубки. Диализную трубку опускали в среду для диализа объемом 25 мл так, чтобы трубка была погружена на 3 – 4 мм. Диализная установка в ходе эксперимента термостатировалась при температуре 37°±2°С. Пробы отбирали в количестве 5 мл через 30, 60, 90,120 и 180 мин от начала эксперимента, восполняя объём соответствующей средой. В отобранной пробе определяли содержание доксициклина гидрохлорида методом спектрофотометрии при длинах волн – 277 нм. Были изучены 2 образца геля и мазь.
.
Таблица № 1 - Степень высвобождения доксициклина гидрохлорида из гелей и мази, приготовленных на различных основах
| № | Основа | Наименование | Экспозиция,мин Степень высвобождения,% | ||||
| 30 | 60 | 90 | 120 | 180 | |||
| 1 | КМС аквилон | Доксициклина гидрохлорид | 22,41 | 49,16 | 71,3 | 88,86 | 89,0 |
| 2 | ГЭЦ | 18,3 | 40,4 | 67,9 | 72,8 | 73,2 | |
| 3 | Ланолин и вазелин | 24,05 | 44,94 | 68,3 | 70,6 | 71,2 | |
Рисунок 1 - Кинетика высвобождения доксициклина гидрохлорида из I основыX
Рисунок 2 - Кинетика высвобождения доксициклина гидрохлорида из II основыX
Рисунок 3 - Кинетика высвобождения доксициклина гидрохлорида из III основыX
Как следует из таблицы 1 и рисунков (1,2,3), концентрация доксициклина гидрохлорида в диализатах увеличивается с увеличением времени диализа. Оценку результатов эксперимента проводили с помощью коэффициентов диффузии (Kd) и расчёта скорости высвобождения (таблица №1) для испытуемых нами гелей за 15, 30, 45 и 60 минут рассчитанных по формуле:
, гдеCt – концентрация метилурацила или доксициклина гидрохлорида в диализате за время t, мг/мл;
Co – максимально возможная концентрация метилурацила или доксициклина гидрохлорида в диализате, мг/мл;
S – площадь диффузии, см²;
t – время диализа, мин.
Результаты представлены в таблицах 2-4.
Таблица 2 - Значения коэффициентов диффузии для 1 геля
| Время | С, мг/мл | Коэффициент диффузии доксициклина гидрохлорида |
| 30 | 22,41 | 2,34·10-3 |
| 60 | 49,16 | 2,55·10-3 |
| 90 | 71,3 | 2,48·10-3 |
| 120 | 88,86 | 2,33·10-3 |
| 180 | 89,0 | 1,55·10-3 |
Таблица 3 - Значения коэффициентов диффузии для 2 геля
| Время | С, мг/мл | Коэффициент диффузии доксициклина гидрохлорида |
| 30 | 18,3 | 1,91·10-3 |
| 60 | 40,4 | 2,11·10-3 |
| 90 | 67,9 | 2,37·10-3 |
| 120 | 72,8 | 1,90·10-3 |
| 180 | 73,2 | 1,28·10-3 |
Таблица 4 - Значения коэффициентов диффузии для 3 геля
| Время | С, мг/мл | Коэффициент диффузии доксициклина гидрохлорида |
| 30 | 24,05 | 2,51·10-3 |
| 60 | 44,94 | 2,35·10-3 |
| 90 | 68,3 | 2,38·10-3 |
| 120 | 70,6 | 1,85·10-3 |
| 180 | 71,2 | 1,24·10-3 |
Как видно из данных таблиц 2-4 значения коэффициентов диффузии для трех гелей плавно повышались в течение всего времени высвобождения – 90 минут, затем уменьшается.
2.3. Изучение антимикробного действия гелей и мази .
Антимикробную активность определяли методом диффузии в агар (способ «колодцев»). Данный метод основан на оценке угнетения роста тест-штаммов микроорганизмов под воздействием исследуемых веществ.
В качестве тест-культур были выбраны следующие виды бактерий: Staphylococcus aureus (Type), Escherichia coli 055, Escherichia coli М17, Bacillus cereus – 96, Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris.
Антимикробную активность доксициклиновых мазей на различных основах сравнивали с действием 1% раствора доксициклина, приготовленного на 0,9% хлориде натрия.
Оценку результатов определения антимикробной активности проводили путём измерения диаметра зоны задержи роста тест-культур микроорганизмов вокруг «колодца», включая диаметр самого «колодца» [1].
Критерии оценки:
1) отсутствие зоны задержки роста – испытуемая культура не чувствительна к данной концентрации препарата;
2) диаметр зоны задержки роста 10 мм – умеренная чувствительность культуры к данной концентрации препарата;
3) диаметр зоны задержки роста более 10 мм – высокая чувствительность испытуемой культуры к данной концентрации препарата.
Результаты и обсуждение.
Результаты определения антимикробной активности исследуемых веществ представлены в таблице 1.
Таблица 1 Оценка диаметров зон подавления роста тест-культур микроорганизмов.
| Исследуемые образцы | Диаметр зоны задержки роста тест-культур микроорганизмов, мм | |||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
| 24 | 30 | 30 | 37 | 12 | 6 |
| 28 | 26 | 28 | 36 | 10 | 8 |
| 31 | 30 | 26 | 34 | 11 | 15 |
| 35 | 28 | 44 | 30 | 14 | 15 |
1-Staphylococcus aureus (Type),
2- Escherichia coli 055,
3- Escherichia coli М17,
4- Bacillus cereus – 96,
5- Pseudomonas aeruginosa,
6- Proteus vulgaris,
Результаты и обсуждение.
Из данных, приведённых в таблице 1, видно, что препарат сравнения - 1% раствор доксициклина, обладает выраженной антимикробной активностью, поскольку во всех тест-культурах диаметр зон подавления роста оказался больше 10 мм.
При этом действие препарата на основе КМС анвилон было выражено в равной степени и сравнимо с таковым для 1% раствора доксициклина в отношении Proteus vulgaris, но превышало действие препарата сравнения в отношении Escherichia coli 055 и Bacillus cereus – 96. Действие препарата на основе КМС анвилон на Staphylococcus aureus (Type) и Pseudomonas aeruginosa оказалось несколько ниже в сравнении с 1% раствором доксициклина. Антимикробный эффект в тест-культуре Escherichia coli М17 значительно уступал препарату сравнения.
Антимикробное действие препарата на основе ланолин-вазелин несколько превышало антибактериальный эффект 1% раствора доксициклина на Escherichia coli 055 и существенно превышало его в отношении Bacillus cereus – 96. Действие на Staphylococcus aureus (Type) и Escherichia coli М17 было наименее выраженным. Подавление роста Pseudomonas aeruginosa было незначительно снижено в сравнении с 1% раствором доксициклина. Антимикробный эффект отсутствовал на тест-культуру Proteus vulgaris, так как зона подавления роста составила меньше 10 мм.
Антимикробное действие препарата на основе Beneceel TYPE: K4M-PH-CR 1% оказалось максимальным и превысило эффект 1% раствора доксициклина в отношении Bacillus cereus – 96. Зоны подавления роста тест-культур Staphylococcus aureus (Type), Escherichia coli М17 и Pseudomonas aeruginosa оказались значительно меньше в сравнении с 1% раствором доксициклина и сопоставимы с таковым в отношении Escherichia coli 055. Антимикробное действие на Proteus vulgaris отсутствовало.
Таким образом, можно сделать вывод, что наибольшим антимикробным действием из исследуемых лекарственных средств обладает препарат на основе КМС анвилон.
2.5. Выводы по главе
-
Изучены 4 состава геля и 1 мази. -
Определение скорости и степени высвобождения доксициклина гидрохлорида методом диализа через полунепроницаемую мембрану показало, что наибольший процент высвобождения доксициклина гидрохлорида обеспечивают композиция КМС аквилон и ланолин с вазелином. -
Установлено, что все изученные составы гелей и мази обладают широким спектром антибактериального действия. Выраженность антимикробного действия у гелей и мази аналогично контролю, если судить о размерах зон задержки роста микроорганизмов. -
Хранение гелей в различных условиях позволило избрать в качестве оптимального носителя доксициклина гидрохлорида композицию ГЭЦ, КМЦ аквилон и ланолин с вазелином, что подтверждено методом диализа через полупроницаемую мембрану. -
Разработана технологическая схема получения глазного геля и мази.