ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 01.03.2019
Просмотров: 6369
Скачиваний: 2
111
(имеет 2 и больше детерминант) используют мышей или крыс. Получают
лимфоциты селезенки. При слиянии нормальных и опухолевых
лимфоцитов разрушают клеточные стенки нормальных лимфоцитов с
помощью полиэтиленгликоля.
Путем
клонирования
гибридом
можно
получить
набор
моноклональных
антител
фактически
против
любых
эпитопов
определенного иммуногена. С по-мощью гибридом можно получить
неограниченное количество антител, которые сохраняют свою высокую
специфичность и чувствительность.
Гибридомы можно создавать на основе Т-лимфоцитов для получения
клонов гибридом, избирательно синтезирующие те или иные лимфокины.
Среди иммуноглобулинов-мономеров по функциональной активности
различают полные и неполные антитела. Полные антитела —
бивалентные антитела (обычно IgG). Неполные антитела —
моновалентные АТ, у которых действует один антигенсвязывающий центр
из-за пространственной блокировки второго центра.
Для выявления неполных антител используют реакцию (тест) Кумбса.
Тест Кумбса используется для выявления антител к резус-фактору у
беременных женщин и определения гемолитической анемии у
новорожденных детей с резус-несовместимостью, влекущей разрушение
эритроцитов. В зависимости от состояния антител (могут быть как в
статичном, так и в свободном состоянии в плазме крови) проводится
прямая или непрямая реакция Кумбса. Неполные AT предварительно
инкубируют
с
корпускулярным
Аг
(эритроциты)
и
вносят
антиглобулиновую сыворотку, содержащую антитела к иммуноглобулинам
человека (непрямая реакция Кумбса). Одна молекула полных AT
взаимодействует с двумя молекулами неполных AT (с Fс-фрагментом),
связавших Аг, в результате происходит видимая агглютинация или
гемагглютинация. Если есть основания для предположения, что антитела
зафиксированы на поверхности эритроцитов, проводится прямой тест
Кумбса. В этом случае тест проходит в один этап — добавляется
антиглобулиновая сыворотка.
Динамика антителообразования и характеристика фаз
При попадании антигенов в организм в первые сутки наблюдается
антигенемия (циркуляция антигенов в крови). Основное количество
антигена исчезает из крови через сутки и накапливается в лимфоузлах. В
случаях бактериемии или вирусемии количество антигена может снова
увеличиваться.
112
Первичный иммунный ответ развивается после латентного периода
(3-5 дней), во время которого происходит распознание Аг и образование
клонов плазматических клеток. Затем наступает логарифмическая фаза,
соответствующая поступлению АТ в кровь. Ее продолжительность 7-15
суток. Постепенно титры АТ достигают пика и наступает стационарная
фаза, продолжительность которой 15-30 суток. Ее сменяет фаза затухания,
характеризующаяся снижением титров АТ, длящаяся 1-6 месяцев.
Первыми синтезируются IgM, а затем IgG (они могут сохраняться в
течение всей жизни). Позже всех и не всегда появляются в небольших
количествах IgA, E, D. Одновременно нарастает количество уровень
иммунных Т-лимфоцитов, образуются комплексы антиген-антитело. В
зависимости от вида антигена преобладают или иммунные Т-лимфоциты,
или антитела.
Особенность первичного иммунного ответа — низкая скорость
антителообразования и появление сравнительно невысоких титров АТ.
Вторичный иммунный ответ. После антигенной стимуляции часть
клеток В- и Т-лимфоцитов циркулирует в виде клеток памяти.
Иммунологическая, или иммунная, память — способность иммунной
системы отвечать на вторичное проникновение Аг быстрым развитием
специфических реакций по типу вторичного иммунного ответа. Иммунная
память проявляется как в отношении выработки антител, так и в
отношении
других
иммунных
реакций
(гиперчувствительности
замедленного типа, трансплантационный иммунитет и др.). Эффект
иммунной памяти составляет основу вакцинопрофилактики многих
инфекционных заболеваний.
Особенности вторичного иммунного ответа:
• латентный период очень непродолжительный — несколько часов;
• за счет клеток памяти стимуляция синтеза антител и иммунных Т-
клеток наступает быстро (через 1-3 дня);
• образование АТ стимулируется значительно меньшими дозами Аг;
• высокая скорость антителообразования;
• титры АТ достигают максимального значение;
• синтезируются сразу антитела, относящиеся к классу IgG;
• образующиеся антитела циркулируют в организме длительное
время.
Клонально-селекционная
теория
антителообразования
и
объяснение
ею
феномена
естественной
иммунологической
толерантности, молекулярно-генетическая теория С. Тонегавы
113
В 1957 г. Макфарлейн Бернет предположил, что основной единицей
отбора антигеном является клетка (лимфоцит), и что одна клетка отвечает за
образование антител только одного типа. Именно она начинает
размножаться и дает клон идентичных клеток, причем все клетки клона
продуцируют антитела одной специфичности. Клонально-селекционная
теория Бернета давала разумные объяснения механизма аутотолерантности.
Если рецептор на поверхности развивающегося незрелого лимфоцита
связывается с собственным антигеном, клетка получает «отрицательный»
сигнал и уничтожается. Только лимфоциты, прошедшие этот селекционный
фильтр (уничтожение запрещенных клонов), достигают зрелости и
приобретают способность связываться с чужеродными антигенами.
Мелвил Кон и Элистэр Каннингем (Cunningham) привели доводы в
пользу того, что иммунная система имеет способность генерировать
соматические мутации генов антител в ответ на внедрение чужеродных
антигенов.
Сузуму Тонегава (Япония) открыл генетической основы образования
вариационного богатства антител. В стрессовой ситуации, которую создает
вторжение
антигена,
включается
механизм
перестройки
генов
иммуноглобулинов: генетическая система по каким-то не вполне еще
понятным правилам режет и сшивает фрагменты генов до тех пор, пока
не найдет приемлемый вариант — тот, что синтезирует антитело, которое
реагирует с вторгшимся антигеном. Найденный вариант клонируется. За
открытие этого механизма иммунолог из Японии Сусуму Тонегава
получил в 1987 г. Нобелевскую премию. Суть открытия в том, что ген
может быть переделан в цитоплазме.
Указанный механизм рекомбинаций поставляет антитела, связывающие
антигены довольно слабо. Для улучшения их «качества», для тонкой
подстройки, осуществляется следующий этап, соматический (т.е. не
связанный с размножением), — гипермутагенез. Гипермутагенез
заключается в том, что при клонировании гены «болванки» (первично
найденного варианта) мутируют с огромной частотой (каждый тысячный
нуклеотид заменяется, тогда как обычно точковый мутагенез в 100
миллионов раз менее интенсивен), а потом с их копий синтезируется масса
чуть отличных друг от друга белковых цепей антител, какое-то из которых
оказывается подогнанным к антигену наилучшим образом. Этот
окончательный вариант снова клонируется и запоминается клетками
иммунной памяти, т.е. наследуется на время жизни особи (возникает
приобретенный иммунитет).
114
Лекция 12
Аллергия (гиперчувствительность). Иммунопрофилактика и
иммунотерапия инфекционных болезней
Аллергия — общее понятие, отличительные особенности
аллергенов, алгоритм развития, классификация аллергенов. Фазы
протекания
аллергических
реакций
и
их
характеристика.
Лекарственная аллергия: закономерности иммунного ответа на
гаптены, особенности иммунного ответа на лекарства-гаптены
Аллергия (греч. аllos — другой, ergon-действие) — состояние
повышенной чувствительности организма (гиперчувствительности) к
антигенам (аллергенам), обусловленное неадекватно сильной реакцией
иммунной системы на повторный контакт с аллергеном.
Аллерген — полноценный антиген или гаптен, индуцирующий
аллергическую реакцию.
Аллергию вызывают многочисленные вещества, но в основном
аллергенами являются низкомолекулярные вещества с молекулярной
массой 5-15 кД (гаптены), легко проникающие через слизистые оболочки и
быстро связывающиеся с белками организма.
Классификация аллергенов по способу проникновения в организм:
Экзоаллергены — поступают извне:
• контактные (через кожу);
• ингаляторные (через дыхательный тракт);
• алиментарные (через ЖКТ);
• парентеральные (через кровь).
Эндоаллергены (аутоаллергены) — возникают в организме под
действием повреждающих факторов, например «аллергия на свет», ожоги,
воспаления.
Основные классы аллергенов:
• пыльцевые;
• аллергены условно патогенных микроорганизмов и грибов
(плесеней);
• эпидермальные;
• ингаляционные;
• пищевые;
• аллергены насекомых;
• промышленные;
• бытовые;
• лекарственные.
115
Алгоритм развития аллергической реакции:
I Стадия сенсибилизации — первичная встреча с аллергеном,
результатом
которой
является
возникновение
сенсибилизации.
Сенсибилизация (лат. sensibilibus — чувствительность) — стадия
аллергической реакции, при которой происходит переход от нормальной
реактивности организма к какому-либо веществу к повышенной.
Начальные этапы развития аллергической реакции соответствуют
формированию иммунного ответа по гуморальному либо клеточному пути.
II Стадия разрешения (собственно аллергическая реакция).
В самой аллергической реакции различают 3 связанные между собой
фазы:
1) иммунологическая фаза. Осуществляется взаимодействие аллергена
с АТ и/или сенсибилизированными к нему Т-лимфоцитами;
2) патохимическая реакция. После взаимодействия аллергена с Ат или
Т-лимфоцитом образуются иммунные комплексы, которые активируют
образование и высвобождение медиаторов аллергии;
3) патофизиологическая фаза. Под влиянием комплексов Аг-АТ,
медиаторов аллергии происходит повреждение тканей — периферические
эффекты. Основными участникам событий при аллергии являются Т- и В-
лимфоциты, макрофаги, гранулоциты, система комплемента и другие
белки плазмы, ламброциты и другие клетки.
III Стадия десесибилизации (гипосенселизации)
Специфическая десенсибилизация основана на использовании того
аллергена, который вызвал сенсибилизацию, и рассчитана на
формирование
толерантности
организма
к
этому
аллергену.
Неспецифическая десенсибилизация основывается на ослаблении основных
механизмов развития аллергических реакций и коррекции их регуляции.
Лекарственная аллергия развивается, как правило, у лиц с
наследственной предрасположенностью. Аллергенами могут быть все
лекарственные вещества. Чаще всего аллергенами являются антибиотики,
содержащие в своей структуре β-лактамное кольцо (пенициллины,
цефалоспорины). Большинство лекарств являются низкомолекулярными
соединениями, т.е. гаптенами. Для образования полноценного антигена
они должны связаться с транспортным белком организма, образовать
комплекс белок—лекарство. Другой особенностью лекарственных
препаратов является наличие у них общих антигенных детерминант, то
есть
участков,
с
которыми
взаимодействуют
антитела
или
сенсибилизированные
лимфоциты.
Этим
объясняется
наличие
перекрестных аллергических реакций между различными соединениями
(например, антибиотиками из группы пенициллинов и цефалоспоринов).
Аллергические реакции на лекарственные препараты обычно:
• непредсказуемы;