Файл: Kurs_lektsiy_po_mikrobiologii_GGMU_2012.pdf

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 01.03.2019

Просмотров: 6526

Скачиваний: 2

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
background image

 

31

Профаг  спонтанно  или  под  воздействием  различных  факторов 
(химические  вещества,  облучение  УФ,  рентгеновскими  лучами, 
повышенная  температура)  может  выходить  из  бактериальной 
хромосомы и вызывать продуктивную инфекцию. 

Умеренные и дефектные фаги 

Встраиваясь в бактериальную хромосому, умеренные или дефектные фаги 
вызывают  лизогенизацию  бактерий,  которые  могут  приобретать  новые 
признаки. Изменчивость лизогенных бактерий может быть связана: 

•  с  приобретением  генов,  переносимых  фагами  от  их  предыдущих 

хозяев; 

•  с  экспрессией  «молчащих»  генов  бактерий-реципиентов.  Фаговая 

ДНК,  встраиваясь  вблизи  поврежденного  промотора,  заменяет  его. 
При  этом  синтезируются  определенные  продукты,  например 
протоксины дифтерийных бактерий. 

Благодаря  своему  разрушающему  (литическому)  действию  на  бактерии 
фаги  могут  быть  использованы  с  лечебно-профилактической  целью  при 
различных  заболеваниях  (дизентерия,  холера,  различные  гнойно-
воспалительные  заболевания  и  т.  д.).  Наборы  стандартных  фагов,  в  том 
числе международные используются для фаготипирования возбудителей 
ряда  болезней  (холеры,  брюшного  тифа,  сальмонеллезов,  дифтерии, 
стафилококковых и других заболеваний). 
Практическое использование бактериофагов: 

•  фаготерапия; 

•  фагопрофилактика; 

•  фагодиагностика. 

 

ГЕНЕТИКА

 

―  наука,  изучающая  механизмы  и  закономерности 

наследственности и изменчивости организмов, а также методы управления 
этими процессами. 
Ген  ―  наследственный  фактор,  единица  наследственного  материала  ― 
определенный участок молекулы ДНК у высших организмов (РНК у ряда 
вирусов), ответственный за синтез определенного белка. 
Генотип  ―  совокупность  всех  генов  организма,  его  наследственная 
материальная основа. 
Фенотип  ―  совокупность  всех  признаков  и  свойств  организма, 
сформировавшихся  на  основе  взаимодействия  генотипа  с  условиями 
внешней среды. 


background image

 

32

Генетический  материал  у  бактерий  содержится  в  нуклеоиде 
(бактериальной хромосоме) и во внехромосомных генетических элементах 
— плазмидах и мигрирующих генетических элементах. 
 
Внехромосомные факторы наследственности 
1) автономные – являются репликоном: 

•  плазмиды 

2)  неавтономные  ―  реплицируются  только  в  составе  репликона 
(нуклеоида или плазмиды): 

•  IS-последовательности; 

•  транспозоны; 

•  умеренные и дефектные фаги. 

Внехромосомные молекулы ДНК (инсерционные элементы, плазмиды, 
транспозоны) не являются жизненно важными для бактерий, но придают 
им новые свойства. 
Инсерционные  элементы (IS)  (от  англ. insertion sequence) — 
простейший  тип  генетических  элементов,  мигрирующих  от  одной 
бактериальной  хромосомы  к  другой,  или  между  хромосомой  и 
плазмидой. IS-элементы  несут  только  один  ген,  кодирующий  белок 
транспозазу, с помощью которой IS-элементы встраиваются в различные 
участки  хромосомы.  Содержат  только  гены,  необходимые  для 
собственной  миграции.  Фенотипических  признаков  не  кодируют, 
самостоятельно не реплицируются. 
Свойства IS-последовательностей: 

•  небольшие размеры ― 800−1400 пар нуклеотидов; 
•  в свободном состоянии не существуют; 

•  способны  перемещаться  по  геному,  при  этом  первичный  элемент 

остается на месте, а копия встраивается в мишень. 

Функции IS-элементов: 

•  координация 

взаимодействия 

внехромосомных 

факторов 

наследственности между собой и с бактериальной хромосомой для 
обеспечения их рекомбинации; 

•  регуляторная  (регуляция  транскрипции  генов  путем  их 

«включения/выключения»); 

•  индукция  мутаций  (инверсии,  дупликации  на  протяжении  5−9  пар 

нуклеотидов)  координация  взаимодействия  плазмид,  умеренных 
фагов, транспозонов. 

Транспозоны — нуклеотидные последовательности, способные менять 
место  своей  локализации  в  молекуле  ДНК  и  мигрировать  из  одной 
молекулы ДНК в другую. 


background image

 

33

Свойства транспозонов: 

•  относительно  большие  генетические  элементы,  состоят  из 

2000

−25000 пар нуклеотидов; 

•  могут  находиться  в  свободном  состоянии  в  виде  кольцевой 

молекулы; 

•  могут мигрировать с одного репликона на другой; 

•  окружены  с  обоих  сторон  (фланкированы)  последовательностями 

ДНК, напоминающими IS-последовательности; 

•  могут  нести  информацию  о  синтезе  бактериальных  токсинов  и 

ферментов, модифицирующих антибиотики. 

Плазмиды 

— 

кольцевидные 

молекулы 

ДНК, 

способные  к 

саморепликации. Их возможные состояния: 

•  автономное (в цитоплазме); 

•  интегрированное (в нуклеоиде). 

Конъюгативные  плазмиды  способны  к  самопереносу  из  одной  клетки  в 
другую.  Неконъюгативные  плазмиды  способны  к  переносу  с  помощью 
конътативных плазмид и бактериофагов. 

Функции плазмид: 

•  регуляторная – компенсирует нарушение функции ДНК нуклеоида; 

•  кодирующая – вносит в генотип новую информацию. 

Плазмиды  подразделяются  на  различные  категории  в  зависимости  от 
свойств, которые они кодируют у бактерий. 

F-плазмида, или половой фактор. Контролирует синтез половых ворсинок 
(sex  или F-pili), которые  способствуют  эффективному  спариванию 
бактерий-доноров  с  реципиентными  клетками  при  конъюгации. F-
плазмида  реплицируется  в  независимом  от  хромосомы  состоянии  и 
передается при конъюгации в клетки бактерий-реципиентов. 

Перенос генетического материала (ДНК) детерминируется tra-опероном F-
плазмиды (от англ. transfer — перенос), обеспечивающим конъюгативность. 
F-плазмиды  содержат  только tra-оперон,  в  их  составе  нет  никаких  других 
генов. 
F-плазмида может встраиваться в бактериальную хромосому и находиться 
с ней в интегрированном состоянии. 
Функции tra-оперона: 

•  детерминирует образование конъюгативных пилей; 

•  моблизирует на перенос: 

–  саму конъюгативную плазмиду (F+); 
–  другую, неконъюгативную, плазмиду; 

–  участок нуклеоида. 


background image

 

34

R-плазмиды  (плазмиды  множественной  лекарственной  устойчивости). 
Известно  большое  количество R-плазмид,  определяющих  устойчивость 
бактерий к лекарственным препаратам. Передача R-плазмид привела к их 
широкому  распространению  среди  бактерий  и  значительно  осложнило 
химиотерапию инфекционных заболеваний. 
Состав R-плазмид: 

•  r-оперон(-ы) + tra-оперон; 

•  r-оперон(-ы). 

Пути передачи R-плазмид: 

•  при трансдукции (грамположительные бактерии); 

•  при конъюгации (грамотрицательные бактерии). 

 
Состав r-оперона: 

•  гены, детерминирующие синтез ферментов: 

–  инактивирующие антибиотик; 
–  модифицирующий антибиотик; 
–  снижающие проницаемость клеточной стенки бактериальной 

клетки к антибиотику; 

•  может содержать: 

–  транспозон; 

–  IS-последовательность. 

Бактериоциногенные  плазмиды  (на  примере Col-плазмиды E.coli) ― 
плазмиды,  детерминирующие  синтез  колицинов  (антибиотикоподобных 
веществ). 
Состав Col-плазмид: 

•  гены, детерминирующие синтез колицина; 

•  tra-оперон. 

Особенности Col-плазмид: 

•  редко интегрируют в нуклеоид; 

•  обычно репрессированы; 
•  при их дерепрессии бактериальная клетка синтезирует колицины и 

погибает (потенциально летальная плазмида). 

Свойства бактериоцинов: 

•  представляют собой вещества белковой природы и функционируют 

как антибиотики с узким спектром действия; 

•  вызывают гибель клетки, не нарушая ее целостности; 

•  ингибируют синтез ДНК, РНК и белка; 

•  обладают свойствами эндодезоксирибонуклеаз; 


background image

 

35

•  обладают  летальным  признаком – после  выделения  бактериоцина 

бактериальная клетка может погибнуть; 

•  клетка,  выделяющая  бактериоцины,  устойчива  к  действию 

гомологичных бактериоцинов извне. 

ИЗМЕНЧИВОСТЬ БАКТЕРИЙ 
Может  быть  ненаследуемой  (модификационной)  и  генотипической 
(мутации, рекомбинации). 
Модификации  ―  временные,  наследственно  не  закрепленные  изменения, 
возникающие  как  адаптивные  реакции  бактерий  на  изменения 
окружающей среды. Модификации находятся под контролем генома, но не 
сопровождаются  изменениями  первичной  структуры  ДНК  и  вскоре 
утрачиваются. Модификации проявляются в изменении морфологических, 
биохимических и ряда других признаков. 
Биохимическую  основу  модификации  составляет  индуцибельный  синтез 
ферментов.  Так,  например,  кишечная  палочка  только  в  присутствии 
лактозы синтезирует ферменты, необходимые для ее расщепления. 
Лактозный  оперон  состоит  из  трех  линейно  расположенных  структурных 
генов, деятельность которых контролируется геном-регулятором. 
Структурные  гены  детерминируют  образование  трех  катаболических 
ферментов:  бета-галактозидазы,  трансацетилазы  и  пермеазы.  Работа 
структурных  генов  зависит  от  гена-регулятора  и  наличия  в  среде 
лактозы.  Ген-регулятор  контролирует  образование  белка-репрессора. 
Белок-репрессор  при  отсутствии  лактозы  связывается  с  оператором  и 
блокирует  транскрипцию.  Поступая  в  клетку,  лактоза  связывается  с 
белком-репрессором, в результате освобождается оператор и включается 
синтез катаболических ферментов на структурных генах. 
После  полной  утилизации  лактозы  белок-репрессор  освобождается  и 
вновь связывается с оператором, блокирует процесс синтеза ферментов. 
R-S-диссоциация  бактерий  ―  это  образования  двух  форм  бактериальных 
клеток,  которые  отличаются  друг  от  друга  по  характеру  образуемых  ими 
колоний  на  тплотной  питательной  среде.  Один  тип — R-колонии  (англ. 
rough — неровный) — характеризуется неровными краями и шероховатой 
поверхностью, второй тип — S-колонии (англ. smooth — гладкий) ― имеет 
круглую форму, гладкую поверхность. 
Диссоциацию  большинство  ученых  рассматривают  как  закономерную 
форму модификации, а некоторые относят ее к мутациям. 
Процесс  диссоциации обычно протекает в одном направлении: от S- к R-
форме.  Обратный  переход R- в S-форму  наблюдается  реже.  Для