Файл: immunologia_N3-4_2010_block_210x297.pdf

S.typhimurium. Таким образом, бифидо- и лактобактерии, характерные для раннего детского возраста, в меньшей степени способны к продукции провоспалительных цитокинов, чем бифидо- и лактобактерии, характерные для людей старшего возраста. Вероятно, это обусловлено тем, что одной из важнейших функций нормальной микрофлоры детей раннего возраста является формирование механизмов иммунологической толерантности.

В этой связи представлялось крайне важным изучение возможного изменения показателя фонового уровня IL-12 у студентов, ежедневно принимающих пробиотический продукт Актимель.

Полученные результаты представлены на Рисунке 5.

Рис. 5. Показатели фонового уровня IL-12 в периферической крови у студентов

до и после приема пробиотического продукта Актимель.

Как видно из рисунка 5, показатели концентрации IL-12 в сыворотке у студентов до приема пробиотического продукта Актимель находились в пределах (87,9±6,1 пкг/мл). К окончанию приема пробиотического продукта концентрация IL-12 в периферической крови достоверно увеличивалась и достигала показателей в 103,6±13,1 пкг/мл.

Резюме

Ежедневный прием пробиотического продукта Актимель достоверно повышает уровень IL-12 в периферической крови у студентов находящихся в условиях интенсивного учебного процесса.

3.2. Оценка изменения показателя фонового уровня IL-15 и IL-18 в периферической крови у студентов принимающих пробиотический продукт Актимель

Особое внимание заслуживает серия сообщений о важной роли IL-12 и IL-18 в формировании и функционировании иммунной системы. Изучение и получение новых данных о разных механизмах действия IL-18 in vitro и in vivo в

экспериментах на лабораторных животных позволяет судить о ведущей роли этого цитокина в формировании аллергического воспаления. Было отмечено, что уровень IL-18 коррилирует с уровнем эозинофилии и концентрацией растворимого рецептора IL-2 (sIL-2R) в сыворотке крови.

Особенный интерес к IL-18 связан с сообщением о том, что этот цитокин обладает способностью в содружестве из IL-12 индуцировать синтез IFN- . Установлено также, что IL-12 способствует дифференцированию Т-лимфоцитов из Тh0 в Тh1, стимулирует продукцию IFN- и усиливает экспрессию рецепторов к IL-18 на Т-лимфоцитах, В-лимфоцитах и натуральных киллерах (NK). Однако, IL-18 в содружестве из sIL-2R, может также способствовать синтезу Тh2 цитокинов и увеличению продукции IgЕ. Аналогичная взаимосвязь наблюдается при синергизме IL-12 и IL-15.

Кроме этого, стало известно, что IL-15 может индуцировать продукцию IFN- и уменьшать IL-4-индуцированную продукцию IgЕ. В то же время IL-15 способен индуцировать продукцию IL-10, что вместе с IL-12 снижает синтез INF- .

В этой связи представляется интересным изучение изменения показателя фонового уровня цитокинов (IL-15 и IL-18) у студентов принимающих пробиотический продукт Актимель и находящихся в условиях напряженного учебного процесса.

Полученные результаты фонового уровня IL15 представлены на Рисунке 6.

Рис. 6. Показатели фонового уровня IL-15 в периферической крови у студентов

до и после приема пробиотического продукта Актимель.

Как видно из рисунка 6, показатели концентрации IL-15 в сыворотке у студентов до приема пробиотического продукта Актимель находились в пределах (288,8±12,0 пкг/мл). К окончанию приема пробиотического продукта концентрация IL-12 в периферической крови достоверно увеличивалась и достигала показателей в 323,1±14,3 пкг/мл.

Рис. 7. Показатели фонового уровня IL-18

в периферической крови у студентов до и после приема пробиотического продукта Актимель.

Как видно из рисунка 7, показатели концентрации IL-18 в сыворотке у студентов до приема пробиотического продукта Актимель

находились в пределах (294,5±15,6 пкг/мл). К окончанию приема пробиотического продукта Актимель концентрация IL-18 в периферической крови достоверно не отличалась (302,9±15,5) пкг/мл.

Резюме

Ежедневный прием пробиотического продукта Актимель достоверно повышает уровень IL-15 в периферической крови у студентов находящихся в условиях интенсивного учебного процесса. Достоверного изменения концентрации IL-18 не наблюдалось.

4. Изучение показателей системного иммунитета у студентов до и после употребления продукта Актимель.

Определение исходного уровня иммунного статуса производили каждому студенту после набора в исследуемую группу, перед началом приема продукта Актимель и по окончании приема через 6 недель. Данные основных показателей иммунологического статуса до и после приема пробиотического продукта приведены в таблице 2.

Таблица 2.

Из приведенных в таблице данных становится очевидным, что у студентов до приема пробиотического продукта изменения иммунологических показателей имеют разнообразный характер.

По сравнению с предлагаемыми референс показателями студенты исследуемой группы

в среднем характеризовались нормальными параметрами абсолютного и относительного уровня лимфоцитов периферической крови. При этом показатели количества Т-лимфоцитов (CD3+) в исследуемой группе студентов были несколько выше предлагаемых для сравнения референс показателей.

Как видно из таблицы 2, практически в пределах нормы находились количественные показатели Т-хелперов (CD4+) и В-лимфоцитов (CD19+).

Необходимо отметить, что исследуемой группе студентов до приема пробиотического продукта отмечалась тенденция к увеличению уровня цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+).

Однако, все эти изменения не приводили к снижению иммунорегуляторного индекса CD4+/ CD8+ по сравнению с референс-показателями , что не может свидетельствовать о наличии иммуносупрессии.

У студентов также не было отмечено достоверного изменения уровня концентрации sIgА и IgE, относительно аналогичных референс показателей.

Повторное иммунологическое исследование проводилось студентам по завершении лечебного курса (через 6 недель от начала приема пробиотического продукта) для выявления динамики иммунологических показателей.

Как видно из таблицы 2 после приема продукта Актимель у студентов сохранялись высокие показатели CD3+Т-лимфоцитов. Однако необходимо отметить, что разницы в количественных показателях CD3+Т-лимфоцитов до и после приема продукта Актимель не наблюдалось. Отсутствовали также достоверные отличия в количественных показателях CD4+ и CD8+лимфоцитов. Соответственно не претерпел достоверных изменений показатель соотношения CD4+/ CD8+. Уровень CD19 нормализовался.

Однако необходимо отметить, что у студентов, принимающих пробиотический продукт Актимель, наблюдалось незначительное снижение концентрации sIgA и отмечалось достоверное повышение уровня кортизола в крови. Достоверных изменений в уровнях концентрации IgЕ до и после приема Актимель не обнаружено.

Резюме

1.У студентов, находящихся в условиях интенсивного учебного процесса до приема пробиотического продукта Актимель наблюдается увеличение количества CD3+Т-лимфоцитов при отсутствии достоверных изменений в количественных показателях CD4+, CD8+, CD19+лимфоцитов, соотношения CD4+/ CD8+ и показателей уровня sIgA и IgЕ.

2.После приема продукта Актимель у студентов сохранялись высокие показатели CD3+Т-лимфоцитов. Отсутствовали также достоверные отличия в количественных показателях CD4+, CD8+, CD19+лимфоцитов и индекса соотношения CD4+/CD8+. Отмечалось незначительное снижение концентрации sIgA и повышение уровня кортизола.

ВЫВОДЫ

1.Анализ данных позволяет заключить, что по окончанию приема пробиотического продукта Актимель происходит достоверное усиление продукции NO клетками и показателей НСТ-теста у студентов исследуемой группы, превышающее продукцию аналогичные показатели до приема пробиотического продукта, что косвенно подтверждает усиление фагоцитарной активности.

2.Шестинедельный курс приема пробитического продукта Актимель не приводил к достоверному увеличению в периферической крови общей численности CD16+CD56+ NK клеток и количества CD56+ NK клеток экспрессирующих Перфорин у студентов находящихся в условиях интенсивного учебного процесса.

3.Ежедневный прием пробиотического продукта Актимель на протяжении 6 недель достоверно повышает уровень IL-12 и IL-15 в периферической крови у студентов находящихся в условиях интенсивного учебного процесса. Достоверного изменения концентрации IL-18 не наблюдалось.

4.У студентов, находящихся в условиях интенсивного учебного процесса до приема пробиотического продукта Актимель наблюдается увеличение количества CD3+Т- лимфоцитов при отсутствии достоверных изменений в количественных показателях CD4+, CD8+, CD19+лимфоцитов, соотношения CD4+/ CD8+ и показателей уровня sIgA и IgЕ. После приема продукта Актимель у студентов сохранялись высокие показатели CD3+Т-лимфоцитов при отсутствии достоверных отличий в количественных показателях CD4+, CD8+, CD19+лимфоцитов и индекса соотношения CD4+/CD8+ на фоне незначительного снижения концентрации sIgA и повышения уровня кортизола.

5.Т.о., проведенное исследование подтвердило литературные научные данные о положительном влиянии приема пробиотического кисломолочного продукта питания Актимель на функционирование врожденного иммунитета. Это позволяет рекомендовать его людям, пребывающим в условиях стрессовых воздействий, в том числе и в течение эпидемиологически неблагоприятного периода года.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1.1.Neish Andrew S. Microbes in gastrointestinal health and disease. Gastroenterology 2009;136:65-80.

2.Marchesi Julian, Shanahan Fergus. The normal intestinal microbiota. Curr Opin Infect Dis 2007;20:508-13.

3.Round June L, Mazmanian Sarkis K. The gut microbiota shapes intestinal immune responses during health and disease. Nat Rev Immunology 2009;9.

4.Zuccotti GV, Meneghin F, Raimondi C, Dilillo D, Agostoni C, Riva E, Giovannini M. Probiotics in clinical practise: an overview. J Int Med Res 2008;36(Suppl. 1).

5.Yazdanbakhsh, M., Kremsner, P. G., & van Ree, R. Allergy, parasites, and the hygiene hypothesis. Science 2002, 296, 490–494.

6.Foligne, B. et al. Correlation between in vitro and in vivo immunomodulatory properties of lactic acid bacteria. World J.Gastroenterol. 2007; 13, 236–243

7.Hart, A. L., Lammers, K., Brigidi, P., Vitali, B., Rizzello, F., Gionchetti, P., et al. Modulation of human dendritic cell phenotype and function by probiotic bacteria. Gut 2004; 53, 1602–1609.

8.Takeda, K. et al.Interleukin-12 is involved in the enhancement of human natural killer cell activity by Lactobacillus casei Shirota.Clin. Exp. Immunol. 2006; 146, 109–115

9.Takeda K, Suzuki T, Shimada SI, Shida K, Nanno M, Okumura K. Interleukin-12 is involved in the enhancement of human natural killer cell activity by Lactobacillus casei Shirota. Clin Exp Immunol 2006;146(1):109-15.

10.Пастушенков В.Л., 1989.

11.Green L.C., Wagner D.A., Gladowski G., Skipper P.I.Analisis of nitrat and nitrit and N15-nitrat in biological fluidis. Analytical biocham. – 1982. – Vol. 126. – p. 131-138.

12.Houli Joang, Balazy Michael. Detection of 3-Nitrosine in human platelets exposed to peroxynitrite by a new gas chromatography\ mass spectrometry assay. Nitric oxide: Biology and Chemistry. – 1998. – Vol. 2, №5. – р. 350359.

Состояние здоровья тканей и органов полости рта: губ, зубов, языка и пародонта определяют уровень здоровья человека в рамках интегративной концепции. В этой связи привлекает идея И.И.Мечникова о ведущей роли микрофлоры полости рта в поддержании здоровья человека с современных мировоззренческих позиций.

Микрофлоре полости рта принадлежит особая роль в поддержании стабильного состояния здоровья человека. Хронические гингивиты и пародонтиты разрушают соединительную ткань пародонта, связки периодонта и альвеолярные отростки челюстей, перманентно поставляя в пищеварительную и дыхательные системы организма патогенную микрофлору и продукты ее жизнедеятельности.

Основным субстратом патогенеза, запускающим воспалительный процесс в пародонте, является микробиота зубного налета, локализующегося в специфичных локусах: на поверхностях коронковых частей зубов, ямках и фиссурах, а также на апроксимальных поверхностях: от клинических шеек зубов до контактных пунктов. Кроме того, много зубного налета откладывается в областях зубо-десневых соединений sulcus gingivae (SG).

Микрофлора полости рта представляет собой высокочувствительную индикаторную систему микробиоты, реагирующую как качественными, так и количественными сдвигами в ответ на патологические изменения в органах и системах организма человека.

Клиническая картина воспаления в тканях пародонта характеризуется гиперемией, отеком

икровоточивостью. На молекулярном и клеточном уровнях воспалительный процесс проявляется возникновением клеточных инфильтратов

ивысвобождением цитокинов, ведущих факторов воспаления, сочетающихся с факторами комплемента. Продукты воспаления - молекулы липополисахаридов, запускают цепные иммунологические реакции местного и общего уровня,, в свою очередь, проявляющиеся деструктивными процессами в тканях пародонта, образуя классический circulus vitiosus [5].

Кроме того, патологические процессы в полости рта негативно информационноэнергетически влияют на органы через посред-

ство системы гомо-гетероэнергетических связей организма.

Входе эволюции при постоянных взаимодействиях организма человека и многочисленных популяций микроорганизмов окружающей среды, происходила адаптация, сопровождавшаяся совершенствованием симбиоза организма человека, а также селекция микроорганизмов, способных к адгезии и колонизации биотопа полости рта микробиотой. Образовались стойкие симбиотические ассоциации микроорганизмов, а также своеобразные экологические ниши микробиоты в фиссурах и естественных углублениях коронковых частей зубов, зубодесневых бороздках, на спинке языке etc.

Полость рта среда обитания, биотоп микробных ассоциаций, здесь, в процессе филогенеза, сформировались стабильные симбиотические ассоциации, запустившие процесс образования микробиоты макроорганизма хозяина.

Микробиота организма человека стала своеобразным органом, состоящим из микробных клеток, количество которых от 10 до 30 раз превышает клеточные структуры макроорганизма. Согласно литературным данным общая площадь кожного покрова и слизистых оболочек человека достигает 500 м2.

Из этой площади поверхности 80 5 приходится на поверхность толстого и тонкого кишечника, 16 % на слизистую оболочку легких, 0,5% (2,5 м2 ) на поверхность кожного покрова и лиш 0,01% (0,03-0,05 м2 ) на полость рта.

Полость рта - открытый биотоп, обладающий свойствами своеобразного биологического термостата-инкубатора. Постоянная температура, влажность, благоприятные показатели рН, аэрация, наличие измельчённой пищи, пункты ретенции, создают благоприятные условия для колонизации, размножения и снабжения не только микробными ассоциациями, но и продуктами их жизнедеятельности.

Вполости рта человека в процессе онтогенеза постоянно формируется и совершенствуется микроэкологическая система защитной биопленки в пищеварительной и дыхательной системах. Биологическая пленка полости рта представлена ротовой жидкостью, в которую имплантированы многочисленные колонии индигенной микрофлоры. Защитная биопленка

содержит продукты метаболизма макроорганизма и его микрофлоры, ферменты, иммуноглобулины, иммунные клетки, полисахариды.

Плод человека имеет стерильные биотопы полости рта и носоглотки. Проходя через родовые пути матери при рождении, новорожденный, заселяет полость рта и носоглотку микробными ассоциациями биоценоза вагины запуская развитие индивидуального биоценоза, задающего, в свою очередь, алгоритм развития микробиоты организма и иммунитета. Поэтому строгое ограничение половых контактов роженицы, деконтаноминационнозаместительная терапия при необходимости, являются гарантией нормального естественного становления микробной экосистемы и иммунитета человека.

В естественных условиях микробиота защитной биопленки полости рта, в первую очередь, выполняет функцию противомикробного фильтра, предотвращающего колонизацию биотопа патогенными микроорганизмами, транслокацию и проникновение токсинов во внутреннюю среду организма, прежде всего в дыхательную и пищеварительную системы.

Посредством микробиоты биопленки организм человека регулирует иммунные ответы местного и системного уровней. Защитная биопленка – это активный сорбент, выводящий из организма токсины. Она поддерживает энергетический и трофический обмен веществ, выполняет роль специфического регулятора, поддерживающего гармонию взаимоотношений организма с собственной, индигенной микрофлорой биотопа полости рта, а также с транслоцировавшимися в биотоп во время приема пищи и дыхания микроорганизмами.

Из клинических наблюдений известно, что зубной налёт (dental plaqne), образованный микробиотой, наиболее часто локализуется на оральных поверхностях шеек нижних центральных резцов. Один грамм зубного налета, по данным разных авторов, содержит от 59 до 811 микробных тел. Зубной налет, «сползая» по поверхности эмали зубов в sulcus gingivae (SG), раздражает, вызывая воспалительный процесс, увеличивающий объем истекающего периодонтального ликвора в десятки раз. Установлено, что определяющим значением для здоровья человека обладают не только состав, но и локализация зубного налета, относительно поверхности эпителиального слоя слизистой оболочки полости рта.

В ходе развития пародонтита, микробиота зубного налёта пенетрирует дно SG, проникая под эпителий в строму соединительной ткани, вызывая в ней воспалительный процесс. Воспаление, в свою очередь, увеличивает объем истекающего ликвора, и таким способом улуч-

шает объем питательной среды микробиоты зубо-десневых карманов. Кроме того, воспалительный процесс дна SG стимулирует присущий эпителию SG, вызывает дефект эпителиального покрова дна SG, отсекает связки периодонта. Погружной рост эпителия ограничивают пределы компактной пластинки периодонтальной щели. Периодонт замещает грануляционная ткань, таким образом, значительно увеличивая площадь поверхности тканей, инфильтрируемых микробиотой зубного налета.

Таким образом, как можно постулировать, что основным патогенетическим звеном, гранью преобразующей микробиоту зубного налета, образованного индигенной микробиотой полости рта, является, во-первых, преодоление эпителиального покрова, во-вторых, возникновение и распространение воспалительного инфильтрата, в соединительную ткань пародонта за зубодесневое соединение SG и проникновение в системный кровоток.

Площадь поверхностей периодонта зубов составляет 75 см2. Таким образом, если у пациента наблюдается атрофия половины (1/2) кости альвеолярного отростка челюсти, то инфицированная микробиотой зубного налета раневая поверхность составит от 30 до 40 см2. Такая площадь инфицированной раны значительно увеличивает риск транслокации представителей микробиоты зубного налета в системный кровоток. При этом если при генерализованных пародонтитах патологические десневые карманы достигают глубины 4-5 мм, то в совокупности они представляют собой хронически инфицированную рану площадью от 10 до 20 см2. Учитывая данные распространенности заболеваний пародонта и клинические наблюдения о том, что большинство пациентов обращаются за стоматологической помощью несвоевременно. Воспалительный процесс в полости рта может приводить к длительной выраженной бактериемии, существенно снижающей показатели иммунитета и истощению иммунной системы [10].

Микроорганизмы биотопа полости рота на фоне пародонтитов оказывают влияние на системное здоровье человека четырьмя путями: бактериемией, системной диссеминацией, локально образующимися медиаторами воспаления, провоцирующие аутоиммунные ответа, при аспирации бактериального содержимого и его попадание в органы дыхания и систему пищеварения [11].

Современные модели функционирования микробиоты биотопа полости рта, пищеварительной, дыхательных систем и кожного покрова, свидетельствуют о том, что местные антигены микробиоты, продуцируемые бактериальным налетом на внешних оболочках, обеспечивают не только местную толерантность, не