ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 16.04.2021
Просмотров: 1249
Скачиваний: 1
М И Н И СТ Е РСТ В О
О БРА ЗО В А Н И Я
И
Н А У К И
РО ССИ Й СК О Й
Ф Е Д Е РА Ц И И
В О РО Н Е Ж СК И Й
ГО СУ Д А РСТ В Е Н Н Ы Й
У Н И В Е РСИ Т Е Т
Х рома т огра ф и ч е ски е
ме т оды
в
а на ли зе
ле ка рст ве нны х
и
т окси ч ны х
ве щ е ст в
П р акти кум
д л я
студ ентов
по
спец и ал ь ности
040500
–
Ф ар м ац и я
В оронеж
2004
2
У тв ержд ено
научно
-
метод ическим
советом
фармацев тического
факультета
(
протокол
№
4
от
6.04.2004.
г
.)
Состав ители
:
О
.
Ф
.
Стоянова
,
И
.
В
.
Ш кутина
,
Н
.
Я
.
М окш ина
,
В
.
Ю
.
Х охлов
,
В
.
И
.
В асильев а
,
В
.
Ф
.
Селеменев
П ред лагаемы й
практикум
д ает
пред став ление
об
аналитической
хроматографии
с
использ ованием
ее
раз личны х
в ариантов
как
о
целостной
в ажной
области
курса
“ А налитическая
химия ”
.
В
практикуме
из лагаются
основы
теории
хроматографии
,
критерии
оценки
качеств а
раз д еления
,
описаны
основны е
узлы
хроматографических
приборов
.
П ред став лены
практические
работы
по
количеств енному
опред елению
в ещ еств
в
газ овой
,
жид костной
и
тонкослойной
хроматографии
.
П рив ед ены
примеры
обработки
рез ультатов
из мерений
,
их
метрологические
характеристики
.
П рактикум
пред наз начен
д ля
студ ентов
,
из учающ их
курс
“ А налитическая
химия ”
и
специализ ирующ ихся
в
области
химического
анализ а
.
3
С О ДЕРЖ АНИ Е
I.
ТЕО РЕТИ ЧЕС КИ Е
ПРЕДС ТАВЛЕНИ Я
В
Х РО М А ТО ГРАФ И И
4
К лассификация
метод ов
хроматографии
… … … … … … … … … … … … … …
.5
Способы
получения
хроматограмм
… … … … … … … … … … … … … … … …
..6
В ы бор
в арианта
хроматографического
анализ а
… … … … … … … … … … …
..8
Х роматографические
параметры
… … … … … … … … … … … … … … … …
...10
Т еории
хроматографического
разд еления
… … … … … … … … … … … … …
.13
Селектив ность
и
раз реш ение
… … … … … … … … … … … … … … … … … …
..14
II.
О БРАБО ТКА
Х РО М АТО ГРАФ И ЧЕС КИ Х
ДАННЫ Х … … … … …
..
17
К ачеств енны й
анализ
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
...17
К оличеств енны й
анализ
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
..18
III.
ПРАКТИ ЧЕС КАЯ
ЧАС ТЬ
ГАЗО АДС О РБЦ И О ННАЯ
И
ГАЗО Ж И ДКО С ТНАЯ
Х РО М А ТО ГРАФ И Я
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
...22
Сорбенты
и
аппаратура
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
23
К ачеств енны й
анализ
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
...25
К оличеств енны й
анализ
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
.. 26
Л абораторная
работа
№
1.
О пред еление
сод ержания
спиртов
в
смеси
метод ом
газ ожид костной
хроматографии
… … … … … … … … … … … … …
.27
Л абораторная
работа
№
2.
И д ентификация
углекислоты
в
природ ном
газ е
и
опред еление
ее
количеств а
метод ом
газ овой
хроматографии
… … … … …
31
И О НО О БМ ЕННАЯ
Х РО М АТО ГРАФ И Я
… … … … … … … … … … … …
32
Сорбенты
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
...32
Л абораторная
работа
№
1.
О пред еление
сод ержания
сульфата
натрия
…
..34
Л абораторная
работа
№
2.
Раз д еление
ионов
цинка
и
никеля
на
анионообменнике
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
.36
БУ М А Ж НАЯ
И
ТО НКО С ЛО Й НАЯ
Х РО М АТО ГРАФ И Я
… … … …
39
Н осители
,
раств орители
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
..39
К ачеств енны й
анализ
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
..40
К оличеств енны й
анализ
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
..41
Л абораторная
работа
№
1.
О пред еление
примеси
гид раз ина
в
из ониаз ид е
(
гид раз ид е
кислоты
из оникотиновой
)
метод ом
хроматографии
в
тонком
слое
сорбента
(
Т СХ
)
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
41
Л абораторная
работа
№
2.
О пред еление
концентрации
ионов
никеля
в
раств оре
метод ом
бумажной
хроматографии
… … … … … … … … … … … …
45
Л абораторная
работа
№
3.
К ачеств енное
опред еление
аминокислот
в
белковом
гид ролиз ате
метод ом
бумажной
хроматографии
… … … … … …
.46
Л абораторная
работа
№
4.
К оличеств енное
опред еление
аспарагиновой
,
глутаминовой
кислот
и
в алина
в
белковом
гид ролиз ате
метод ом
бумажной
хроматографии
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
..48
Х РО М А ТО ГРАФ И ЧЕС КИ Е
М ЕТО ДЫ
А НАЛИ ЗА
В
Ф АРМ АЦ И И
И
Х И М И КО
-
Ф АРМ А Ц ЕВТИ ЧЕС КО Й
ПРО М Ы Ш ЛЕННО С ТИ
…
.
…
..50
ЗАДАЧИ
ДЛЯ
С А М О КО НТРО ЛЯ
… … … … … … … … … … … … … … …
.55
ЛИ ТЕРА ТУ РА
… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
59
4
ТЕО РЕТИ ЧЕС КИ Е
ПРЕДС ТА ВЛЕНИ Я
В
Х РО М АТО ГРАФ И И
Х роматография
–
наиболее
часто
использ уемы й
аналитический
метод
.
Н овейш ими
хроматографическими
метод ами
можно
проанализ ировать
газ ообраз ны е
,
жид кие
и
тв ерд ы е
в ещ еств а
с
молекуля рной
массой
от
1
д о
10
6
.
Э то
могут
бы ть
из отопы
в од ород а
,
ионы
металлов
,
полимеры
,
белки
,
нефть
и
д р
.
С
помощ ью
хроматографии
получена
обш ирная
информация
о
строении
и
св ойств ах
многих
классов
органических
соед инений
.
П рименение
хроматографических
метод ов
д ля
раз д еления
белков
оказ ало
огромное
в лия ние
на
раз в итие
современной
биохимии
.
Х роматографию
с
успехом
применя ют
в
исслед овательских
и
клинических
целя х
в
самы х
раз ны х
областя х
биологии
и
мед ицины
,
в
фармацев тике
и
криминалистике
:
д ля
терапев тического
мониторинга
в
св я з и
с
ростом
нелегального
употребления
наркотиков
,
ид ентификации
антибиотиков
и
отнесения
их
к
той
или
иной
группе
антибактериальны х
препаратов
,
д ля
анализ а
отд ельны х
наиболее
в ажны х
классов
пестицид ов
.
Т акие
д остоинств а
,
как
унив ерсальность
,
э кспрессность
и
чувств ительность
д елают
хроматографию
в ажнейш им
аналитическим
метод ом
.
Х роматографический
метод
анализ а
раз работан
русским
ботаником
М
.
С
.
Ц в етом
в
1903
г
.
В
перв ы х
же
работах
с
помощ ью
э того
метод а
М
.
С
.
Ц в ет
установил
,
что
считав ш ийся
од нород ны м
з елены й
пигмент
растений
хлорофилл
на
самом
д еле
состоит
из
нескольких
в ещ еств
.
П ри
пропускании
э кстракта
з еленого
листа
через
колонку
,
з аполненную
порош ком
мела
,
и
промы в ании
петролейны м
э фиром
он
получил
несколько
окраш енны х
з он
,
что
,
несомненно
,
говорило
о
наличии
в
э кстракте
нескольких
в ещ еств
.
В послед ств ии
э то
бы ло
под тв ержд ено
д ругими
исслед ователя ми
.
Э тот
метод
он
наз в ал
х рома т огра ф и е й
(
от
греч
.
“ хроматос”–
цв ет
),
хотя
сам
же
указ ал
на
в озможность
раз д еления
и
бесцв етны х
в ещ еств
.
К омпоненты
анализ ируемой
смеси
(
сорбаты
)
в месте
с
под в ижной
фаз ой
перед в игаются
в д оль
стационарной
фаз ы
.
Е е
обы чно
помещ ают
в
стекля нную
или
металлическую
трубку
,
наз ы в аемую
колонкой
.
В
з ав исимости
от
силы
в з аимод ейств ия
с
поверхностью
сорбента
(
з а
счет
ад сорбции
или
по
какому
-
либо
д ругому
механиз му
)
компоненты
буд ут
перемещ аться
в д оль
колонки
с
раз ной
скоростью
.
О д ни
компоненты
останутся
в
в ерхнем
слое
сорбента
,
д ругие
,
в
меньш ей
степени
в з аимод ейств ующ ие
с
сорбентом
,
окажутся
в
нижней
части
колонки
,
а
некоторы е
и
в овсе
покинут
колонку
в месте
с
под в ижной
фаз ой
, (
такие
компоненты
наз ы в аются
не уде рж и ва е мы ми
,
а
в ремя
их
уд ержив ания
опред еля ет
“ мертв ое
в ремя ”
колонки
).
Т аким
образ ом
,
происход ит
бы строе
раз д еление
сложны х
смесей
компонентов
.
П ри
перемещ ении
в д оль
колонки
под в ижная
фаз а
в стречает
на
св оем
пути
в се
новы е
и
нов ы е
слои
сорбента
,
что
обеспечив ает
многократность
актов
сорбции
-
д есорбции
раз д еля емы х
компонентов
.
Э тим
обусловлена
з начительно
больш ая
5
э ффектив ность
хроматографического
раз д еления
по
срав нению
со
статическими
метод ами
сорбции
и
э кстракции
.
Х рома т огра ф и я
–
э то
физ ико
-
химический
метод
раз д еления
и
опред еления
в ещ еств
,
основанны й
на
распред елении
компонентов
межд у
д в умя
фаз ами
,
непод в ижной
и
под в ижной
.
Н епод в ижной
(
стационарной
)
фаз ой
служит
тв ерд ое
пористое
в ещ еств о
или
пленка
в ы сококипя щ ей
органической
жид кости
,
нанесенная
на
тв ерд ое
в ещ еств о
.
П од в ижная
фаз а
пред став ля ет
собой
жид кость
или
газ
,
протекающ ий
через
непод в ижную
фаз у
.
Х рома т огра ф и я
–
э то
д инамический
процесс
.
М ногократность
актов
сорбции
–
д есорбции
раз д еля емы х
компонентов
обеспечив ает
больш ую
э ффектив ность
хроматографического
раз д еления
по
срав нению
со
статическими
метод ами
сорбции
и
э кстракции
.
Х рома т огра ф и я
–
гибрид ны й
метод
анализ а
,
в
котором
хроматографический
процесс
я в ля ется
частью
общ ей
аналитической
системы
,
сочетающ ей
раз д еление
и
из мерение
.
М етод
позв оля ет
не
только
раз д еля ть
многокомпонентную
смесь
,
но
ид ентифицировать
и
опред еля ть
ее
количеств енны й
состав
.
Кла сси фи ка ц и я
ме т одов
хрома т огра фи и
Раз личны е
метод ы
хроматографии
можно
классифицировать
по
агрегатному
состоянию
фаз
,
способу
их
относительного
перемещ ения
,
аппаратурному
оформлению
процесса
и
т
.
д
.
По
а гре га т ному
сост оя ни ю
фаз
хроматографические
метод ы
обы чно
классифицируют
след ующ им
образом
(
табл
.1):
Т аблица
1
П од в ижная
фаз а
Н епод в ижная
фаз а
Газ ообраз ная
Ж ид кая
Т в ерд ая
Газ о
-
ад сорбционная
хроматография
Ж ид костно
-
ад сорбционная
колоночная
И оннообменная
О сад очная
Ж ид кая
Распред елительная
газ о
-
жид костная
хроматография
Распред елительная
жид кость
-
жид костная
хроматография
По
ме х а ни зму
вза и моде йст ви я
сорбе нт а
и
сорба т а
можно
в ы д елить
несколько
в ид ов
хроматографии
:
–
ад сорбционная
хроматография
основана
на
раз личии
в
ад сорбируемости
в ещ еств
тв ерд ы м
сорбентом
;