ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 16.04.2021
Просмотров: 1264
Скачиваний: 1
51
Т акие
метод ы
также
соверш енно
необход имы
при
исслед ов ания х
,
св я з анны х
с
прев ращ ением
лекарств енны х
в ещ еств
в
организ ме
жив отны х
и
человека
,
т
.
е
.
д ля
фармакологии
и
клинической
фармакологии
.
Сложность
состав а
из в лечений
из
растительного
сы рья
,
в ероятно
,
и
я в илась
причиной
того
,
что
именно
природ ны е
объекты
стали
перв ы ми
объектами
,
при
исслед овании
которы х
бы ла
созд ана
колоночная
хроматография
М
.
Ц в ета
,
тонкослойная
хроматография
Н
.
А
.
И з майлова
и
М
.
С
.
Ш райбер
,
распред елительная
хроматография
на
бумаге
Л
.
М артина
и
Синд жа
.
П ричем
послед ние
д в а
хроматографических
метод а
бы ли
созд аны
непосред ств енно
д ля
исслед ования
лекарств енны х
в ещ еств
.
И онны й
обмен
хотя
и
из в естен
с
глубокой
д рев ности
,
но
начал
рассматрив аться
как
основа
ионообменной
хроматографии
и
получил
ш ирокое
раз в итие
в
начале
40-
х
год ов
Х Х
в
.,
в
св я з и
с
появ лением
синтетических
ионообменников
.
Х имико
-
фармацев тическая
промы ш ленность
сраз у
же
оценила
в озможности
ионообменной
хроматографии
.
У же
в
серед ине
40-
х
год ов
сообщ ается
о
промы ш ленном
применении
ионообменны х
установок
д ля
из в лечения
таких
лекарств енны х
в ещ еств
,
как
скополамин
и
хинин
,
из
э кстрактов
растительного
сы рья
.
И онообменная
хроматография
сраз у
же
получила
применение
и
в
произ в од ств е
таких
новы х
д ля
св оего
в ремени
лекарств енны х
в ещ еств
,
как
антибиотики
.
С
появ лением
метод ов
ГЖ Х
и
В Э Ж Х
они
также
прочно
в ош ли
в
арсенал
метод ов
фармацев тического
анализ а
и
стали
использ оваться
д ля
раз д еления
раз личны х
смесей
,
в
том
числе
оптических
из омеров
,
ид ентификации
в ещ еств
,
их
количеств енного
опред еления
.
Раз личны е
в ид ы
хроматографических
метод ов
и
их
мод ификации
использ уются
в
фармации
и
в
химико
-
фармацев тической
промы ш ленности
в
след ующ их
целя х
:
–
д ля
ид ентификации
лекарств енны х
в ещ еств
,
д ля
обнаружения
д опустимы х
примесей
и
оценки
их
количеств
;
–
д ля
характеристики
чистоты
лекарств енны х
в ещ еств
–
субстанций
и
в
особенности
в ещ еств
-
станд артов
;
–
д ля
количеств енной
характеристики
очищ енны х
фотохимических
препаратов
,
я в ля ющ ихся
композицией
нескольких
биологически
актив ны х
в ещ еств
;
–
д ля
количеств енного
опред еления
наиболее
в ажны х
биологически
актив ны х
компонентов
в
растительном
сы рье
,
полупрод уктах
его
переработки
или
в
сложны х
готовы х
формах
;
–
д ля
контроля
технологических
процессов
в
произ в од ств е
синтетических
лекарств енны х
сред ств
;
–
как
чувств ительны й
метод
опред еления
в озможны х
потерь
при
раз работке
количеств енны х
метод ов
,
основанны х
на
э кстракции
,
осажд ении
и
т
.
п
.
Сущ еств енную
роль
хроматографические
метод ы
играют
при
оценке
стабильности
лекарств енны х
форм
и
в ы боре
метод ик
их
оценки
.
52
П убликации
по
практическому
использ ованию
хроматографических
метод ов
в
фармации
появ ля лись
в
такой
послед овательности
:
хроматография
на
бумаге
,
ионообменная
хроматография
,
хроматография
в
тонком
слое
,
газ ожид костная
хроматография
и
,
наконец
,
в ы сокоэффектив ная
жид костная
хроматография
под
д ав лением
.
Т а
же
з акономерность
прослежив ается
,
если
рассматрив ать
послед овательны е
из д ания
официальны х
руковод ств
по
характеристике
св ойств
и
метод ам
исслед ования
лекарств
–
Госуд арств енны е
Ф армакопеи
раз ны х
стран
.
Ц ели
,
которы е
став я тся
перед
хроматографическими
метод ами
,
расш иря ются
и
усложня ются
параллельно
с
раз в итием
самих
метод ов
.
В начале
э то
только
ид ентификация
,
з атем
качеств енная
оценка
степени
чистоты
и
,
наконец
,
количеств енны е
метод ы
,
в
которы х
хроматографическое
раз д еление
больш ей
частью
сочетается
с
какими
-
либо
инструментальны ми
физ ико
-
химическими
метод ами
количеств енного
опред еления
.
В
настоящ ее
в ремя
практически
в се
классы
лекарств енны х
в ещ еств
,
в
каком
бы
поря д ке
их
не
классифицировать
–
по
д ейств ию
или
по
химическому
строению
,
исслед ованы
тем
или
ины м
хроматографическим
метод ом
.
В
качеств е
примеров
использ ования
хроматографических
метод ов
в
практике
фармацев тического
анализ а
и
контроля
произ в од ств а
лекарств енны х
в ещ еств
можно
указ ать
след ующ ие
.
Х роматография
на
бумаге
лежит
в
основе
количеств енного
опред еления
ланатозид а
С
в
препарате
целанид
,
а
также
опред еления
его
в
сы рье
–
трав е
и
листья х
наперстя нки
ш ерстистой
.
М етод
тонкослойной
хроматографии
имеет
огромное
з начение
д ля
ид ентификации
я д овиты х
в ещ еств
и
их
метаболитов
в
из в лечения х
из
объектов
(
Т СХ
-
скрининг
)
и
с
целью
очистки
в ы д еленны х
в ещ еств
от
примесей
э нд огенны х
соед инений
,
э кстрагируемы х
из
биологических
объектов
совместно
с
я д овиты ми
в ещ еств ами
.
К оличеств енное
опред еление
флав аноид ов
в
препаратах
фламин
и
ликв иритон
,
антрахиноновы х
соед инений
в
препаратах
круш ины
ломкой
,
серд ечны х
гликозид ов
в
препарате
коргликон
метод ом
тонкослойной
хроматографии
в ключено
в
техническую
д окументацию
на
произ в од ств о
э тих
препаратов
.
К олоночная
ад сорбционная
хроматография
положена
в
основ у
количеств енного
анализ а
компонентов
липофильной
части
маз ев ы х
основ
.
А д сорбционная
хроматография
на
окиси
алюминия
наш ла
применение
д ля
в ы д еления
таких
серд ечно
-
сосуд исты х
препаратов
,
как
серд ечны е
гликозид ы
(
лантозид
С
и
строфантин
К
,
пастинацин
),
а
также
против ояз в енного
препарата
алантон
,
сод ержащ его
сескв итерпенов ы е
лактоны
.
Х роматография
на
полиамид ном
сорбенте
применя ется
при
получении
ликв иритона
и
ликураз ид а
из
корней
солод ки
,
при
промы ш ленной
переработке
д альнев осточного
ланд ы ш а
д ля
произ в од ств а
препарата
конв афлав ин
,
облад ающ его
желчегонны м
д ейств ием
.
П ри
э том
53
флав аноид ы
,
состав ля ющ ие
конв афлав ин
,
отд еля ются
от
серд ечны х
гликозид ов
ланд ы ш а
,
которы е
з атем
в ы д еля ются
с
использ ованием
хроматографии
на
окиси
алюминия
.
Сополимеры
стирола
с
д ив инилбенз олом
использ уются
в
качеств е
носителей
обращ енной
распред елительной
хроматографии
д ля
раз д еления
смесей
лекарств енны х
в ещ еств
.
Т ехнологические
процессы
,
основанны е
на
ионообменной
хроматографии
,
раз работаны
д ля
в ы д еления
из
э кстрактов
растительного
сы рья
ря д а
алкалоид ов
,
сред и
которы х
морфин
,
гиосциамин
,
скополамин
,
пилокарпин
,
сальсолин
,
лобелин
,
алкалоид ы
барв инка
,
раувольфии
.
В
э тих
процессах
ионообменная
хроматография
применя ется
од нов ременно
и
как
метод
очистки
,
и
как
метод
концентрирования
.
Больш ую
роль
ионообменная
хроматография
играет
в
произ в од ств е
таких
антибиотиков
,
как
стрептомицин
,
неомицин
,
канамицин
,
тетрациклин
.
В
больш инств е
произ в од ств
д ля
сорбции
антибиотиков
использ уют
карбоксильны е
катионообменники
,
а
д ля
д еминерализ ации
э люатов
–
сильносш иты е
сульфокатионообменники
,
поглощ ающ ие
ионы
металлов
,
но
практически
не
сорбирующ ие
крупны е
органические
ионы
антибиотиков
.
В
д ругих
случая х
д ля
очистки
э люатов
использ уют
аниониты
.
Д ля
произ в од ств а
антибиотиков
тетрациклинового
ря д а
использ уют
сорбцию
их
на
сульфокатионообменниках
.
В
произ в од ств е
норсульфаз ола
ионообменная
хроматография
использ уется
д ля
его
из в лечения
из
маточны х
раств оров
.
И онообменная
хроматография
в
послед ние
год ы
применя ется
также
д ля
в ы д еления
и
концентрирования
наркотических
и
од урманив ающ их
в ещ еств
из
в од ны х
раств оров
и
биологических
жид костей
.
Гель
-
хроматография
использ уется
в
химико
-
токсикологическом
анализ е
д ля
очистки
из в лечений
из
трупного
материала
и
при
исслед овании
их
на
барбитураты
.
В
фармакопейном
анализ е
ГЖ Х
использ уют
при
контроле
качеств а
субстанций
и
лекарств енны х
форм
–
чащ е
в сего
д ля
ид ентификации
и
опред еления
остаточны х
летучих
раств орителей
,
след ы
которы х
сохраня ются
в
препаратах
при
их
получении
.
Т ак
,
например
,
опред еля ют
ацетон
и
метанол
в
пилокарпина
и
сотанола
гид рохлорид ах
,
в
спиробромине
,
э танол
–
в
калгеле
и
мелоксикаме
,
из опропанол
–
в
амиод ароне
,
флуконаз оле
,
примеси
в
камфоре
,
бромкамфоре
,
э тиловом
э фире
α
-
бромиз овалериановой
кислоты
,
в
препаратах
в итамина
Е
и
в о
многих
д ругих
лекарств енны х
субстанция х
и
формах
.
М етод ами
в ы сокоэффектив ной
капилля рной
ГЖ Х
опред еля ют
метаболические
профили
биологических
сред
–
крови
,
мочи
,
слюны
.
В Э Ж Х
очень
ш ироко
применя ется
д ля
ид ентификации
,
раз д еления
и
опред еления
самы х
раз личны х
в ещ еств
:
оптически
актив ны х
соед инений
,
белков
,
нуклеинов ы х
и
аминокислот
,
полисахарид ов
,
лекарств енны х
препаратов
,
биологических
сред
и
т
.
д
.
М етод
использ уют
д ля
провед ения
профильного
хроматографического
анализ а
мед ицинско
-
биологических
54
объектах
в
случая х
патологических
отклонений
от
нормы
–
так
наз ы в аемы й
“ метод
распознав ания
образ ов”
.
П ри
технологическом
и
фармакопейном
контроле
качеств а
лекарств енны х
субстанций
и
лекарств енны х
форм
В Э Ж Х
стала
од ним
из
основны х
метод ов
опред еления
как
самих
фармакологически
актив ны х
в ещ еств
,
так
и
в спомогательны х
компонентов
и
посторонних
примесей
.
В
настоящ ее
в ремя
метод ики
на
основе
метод а
В Э Ж Х
раз работаны
д ля
лекарств енны х
в ещ еств
раз личны х
фармакологических
групп
и
число
их
непреры в но
растет
.
Т ак
,
например
,
метод ом
В Э Ж Х
анализ ируют
лекарств енны е
препараты
альд актон
,
амиз ол
,
в альпроат
натрия
,
глиборал
,
д иклофенак
натрия
,
козаар
,
кофеин
,
лид окаина
гид рохлорид
,
мелоксикам
,
месалаз ин
,
парацетамол
,
пилокарпина
гид рохлорид
,
пирацетам
,
соталола
и
цетилпирид ина
гид рохлорид ы
,
флуконаз ол
и
многие
д ругие
.
У станов ление
сроков
год ности
лекарств енны х
в ещ еств
-
субстанций
и
их
готовы х
форм
я в ля ется
в ажной
з ад ачей
в
фармации
.
Д ля
э тих
целей
использ уется
метод
“ ускоренного
старения ”
,
основанны й
на
хранении
объекта
при
пов ы ш енной
температуре
.
Е сли
по
истечении
в ремени
хранения
при
повы ш енной
температуре
,
э кв ив алентного
з начительно
больш ему
отрез ку
в ремени
хранения
при
температуре
20
о
С
,
хроматограммы
испы туемого
препарата
,
хранив ш егося
при
пов ы ш енной
температуре
и
при
20
о
С
,
ид ентичны
,
то
использ ование
метод а
“ ускоренного
старения ”
прав омерно
.
П ровед енны й
краткий
обз ор
показ ы в ает
,
насколько
ш ироко
,
прочно
и
э ффектив но
хроматографические
метод ы
в ош ли
в
практику
фармацев тического
анализ а
,
химико
-
фармацев тической
промы ш ленности
и
фармакологии
и
получают
в
э тих
областя х
св ое
д альнейш ее
соверш енств ование
и
раз в итие
.
ЗА ДАЧИ
ДЛЯ
С АМ О КО НТРО ЛЯ
П ример
1.
Н а
хроматограмме
получены
пики
при
0,84
мин
(
неуд ержив аемы й
компонент
Н
),
при
10,60
мин
(
компонент
Б
)
и
11,08
мин
(
компонент
Г
).
Ш ирина
пиков
компонентов
Б
и
Г
–
0,56
и
0,59
мин
соотв етств енно
.
Д лина
колонки
–
28,3
см
,
объем
стационарной
фаз ы
–
12,3
мл
,
под в ижной
фаз ы
–
17,6
мл
.
Рассчитайте
:
а
)
число
теоретических
тарелок
колонки
;
б
)
в ы соту
,
э кв ив алентную
теоретической
тарелке
,
укажите
,
что
характериз ует
э та
в еличина
;
в
)
коэффициент
уд ержив ания
д ля
компонентов
Б
и
Г
;
г
)
коэффициенты
распред еления
компонентов
Б
и
Г
;
д
)
коэффициент
селектив ности
и
раз реш ение
пиков
компонентов
Б
и
Г
.
Ре ше ни е
.
а
)
Рассчитаем
число
теоретических
тарелок
д ля
компонентов
Б
и
Г
по
формуле
(13):
N
Б
= 16
·
(10,60 / 0,56)
2
= 5,7
·
10
3
; N
Г
= 16
·
(11,08 / 0,59)
2
= 5,6
·
10
3
;
N
cp
= 5,7
·
10
3
.
55
Число
теоретических
тарелок
в сегда
целое
число
и
в еличина
без раз мерная
.
б
)
В ы сота
,
э кв ив алентная
теоретической
тарелке
–
Н
,
в ы числя ется
по
формуле
Н
=L/N:
Н
= 283/ 5681= 0,0496
мм
.
в
)
К оэффициент
уд ержив ания
R
рассчиты в ают
как
отнош ение
в ремени
неуд ержив аемого
компонента
ко
в ремени
уд ержив ания
в ещ еств а
R
Б
= 0,84 /10,60 =0,079; R
Г
= 0,84 / 11,08 = 0,076
г
)
К оэффициент
распред еления
в ещ еств а
можно
рассчитать
,
объед инив
формулы
(5)
и
(9),
−
=
R
R
V
V
D
S
m
1
П од став ля я
численны е
з начения
,
наход им
D
Б
= 16,7
и
D
Г
=17,4
д
)
К оэффициент
селектив ности
опред еля ется
как
α
= D
Г
/ D
Б
= 17,4 / 16,7=1,04
В еличина
раз реш ения
оценив ает
степень
раз д еления
пиков
,
ее
рассчиты в ают
по
формуле
(19).
П од став ля я
численны е
з начения
,
получаем
:
R
s
= 2 (11,08-10,60) 0,59 + 0,56 =0,86
П олученная
в еличина
раз реш ения
показ ы в ает
,
что
пики
компонентов
Б
и
Г
на
хроматограмме
раз д елены
частично
.
П олное
раз д еление
пиков
д остигается
,
если
з начение
R
s
≥
1,5.
П ример
2.
О пред еление
углев од ород ов
провод или
на
хроматографической
колонке
д линой
2
м
,
в арьируя
скорость
потока
.
Д ля
трех
раз личны х
скоростей
потока
мертв ое
в ремя
колонки
состав ля ло
18,2,
8,0
и
5,0
соотв етств енно
.
П ри
э том
в ремя
уд ержив ания
д екана
–
2020, 888
и
558
с
,
а
ш ирина
его
пика
у
основания
–
223, 99
и
68
с
соотв етств енно
.
О пред елите
:
а
)
скорости
потока
газ а
-
носителя
д ля
кажд ого
случая
;
б
)
число
теоретических
тарелок
N
и
в еличину
H;
в
)
константы
А
,
В
и
С
в
урав нении
В ан
-
Д еемтера
.
Ре ше ни е
.
а
)
скорость
потока
рассчиты в аем
по
формуле
v=L/t
m
:
1) 11
см
/c; 2) 25
см
/
с
; 3) 40
см
/
с
.
б
)
П о
формуле
(13)
рассчиты в аем
N
и
получаем
з начения
:
1) 1310; 2) 1286; 3) 1068.
П о
формуле
H=L/N
рассчиты в аем
в еличину
Н
:
1) 1,53
мм
2) 1,56
мм
3) 1,87
мм
.
в
)
состав ля ем
систему
урав нений
:
0,153 =
А
+
В
/11+C
·
11,
0,156 =
А
+
В
/25+C
·
25,
0,187 =
А
+
В
/40+C
·
40.
Реш аем
систему
и
получаем
А
=0,059;
В
=0,699;
С
=2,8
·
10
-3
.
П ример
3. C
танд артны е
отклонения
хроматографического
пика
,
св я з анны е
с
некоторы ми
факторами
раз мы в ания
,
состав ля ют
0,0041;