ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 16.04.2021
Просмотров: 1258
Скачиваний: 1
41
раз мер
пластин
,
толщ ину
слоя
сорбента
,
объем
пробы
,
д лину
пути
фронта
раств орителя
и
д ругие
факторы
.
П ри
соблюд ении
станд артны х
услов ий
получаются
в оспроиз в од имы е
з начения
R
f
,
которы е
можно
использ овать
в
аналитических
целя х
при
срав нении
с
табличны ми
,
если
они
получены
в
тех
же
условия х
опы та
.
Самы м
над ежны м
я в ля ется
метод
св ид етелей
,
когда
на
стартовую
линию
ря д ом
с
пробой
нанося тся
инд ив ид уальны е
в ещ еств а
,
соотв етств ующ ие
пред полагаемы м
компонентам
смеси
.
В лия ние
раз личны х
факторов
на
в се
в ещ еств а
буд ет
од инаковы м
,
поэтому
совпад ение
R
f
компонента
пробы
и
од ного
из
св ид етелей
д ает
основания
д ля
отожд еств ления
в ещ еств
.
Н есов пад ение
R
f
указ ы в ает
на
отсутств ие
в
пробе
соотв етств ующ его
компонента
.
К ачеств енны й
состав
пробы
в
метод е
бумажной
хроматографии
так
же
,
как
и
в
Т СХ
,
может
бы ть
установлен
или
по
специфической
окраске
отд ельны х
пя тен
на
хроматограмме
,
или
по
числов ому
з начению
R
f
кажд ого
компонента
.
Коли ч е ст ве нны й
а на ли з
К оличеств енны е
опред еления
в
Т СХ
могут
бы ть
сд еланы
или
непосред ств енно
на
пластинке
,
или
после
уд аления
в ещ еств а
с
нее
.
П ри
непосред ств енном
опред елении
на
пластинке
из меря ют
площ ад ь
пя тна
и
по
з аранее
построенному
град уировочному
графику
наход я т
количеств о
в ещ еств а
.
Н аиболее
точны м
считается
метод
,
в
котором
в ещ еств о
после
раз д еления
уд аля ется
с
пластинки
и
анализ ируется
спектрофотометрическим
или
ины м
метод ом
.
У д аление
в ещ еств а
с
пластинки
обы чно
произ в од я т
механическим
путем
или
в ы мы в ают
под ход я щ им
раств орителем
.
К оличеств енны е
опред еления
в
бумажной
хроматографии
также
в ы полня ются
или
по
хроматографическим
характеристикам
(
площ ад ь
пя тна
и
интенсив ность
его
окраски
),
или
по
метод у
в ы мы в ания
.
Н еред ко
хроматограмму
раз рез ают
на
отд ельны е
части
по
числу
пя тен
,
кажд ое
пя тно
обрабаты в ают
соотв етств ующ им
э кстрагентом
и
опред еля ют
количеств о
э кстрагированного
в ещ еств а
любы м
под ход я щ им
метод ом
(
фотометрическим
,
поля рографическим
и
т
.
д
.).
Ла б ора т орна я
ра б от а
№
1.
О п ре де ле ни е
п ри ме си
ги дра зи на
в
и зони а зи де
(
ги дра зи де
ки слот ы
и зони кот и новой
)
ме т одом
хрома т огра фи и
в
т онком
слое
сорб е нт а
(
ТС Х
)
Ц е ль
ра бот ы
:
приобретение
нав ы ков
работы
с
оборуд ованием
д ля
тонкослойной
хроматографии
;
ознакомление
с
приемами
качеств енной
и
42
количеств енной
обработки
хроматограмм
,
полученны х
на
пластине
д ля
Т СХ
.
О борудова ни е
и
ре а кт и вы
:
1.
К амера
д ля
Т СХ
с
притертой
кры ш кой
.
2.
М икрош прицы
на
10
мкл
.
3.
М ерны е
колбы
емкостью
10
мл
.
4.
М ерны й
цилинд р
емкостью
25
мл
.
5.
П ластины
д ля
Т СХ
«
Силуфол
»
.
6.
П ульв ериз атор
.
7.
Т ермостат
в озд уш ны й
(t=105
о
С
).
8.
В есы
аналитические
.
9.
К алька
,
миллиметровая
бумага
,
линейка
,
лупа
с
д еления ми
,
каранд аш
.
10.
И з ониаз ид
,
С
5
Н
4
NCONHNH
2
(
технический
).
11.
Гид раз ина
сульфат
, (N
2
H
6
)SO
4
(
«
хч
»
или
«
чд а
»
).
12.
А цетон
, CH
3
COCH
3
(
«
ч
»
).
13.
п
-
Д иметиламинобенз альд егид
,(
С
H
3
)
2
NC
6
H
4
CHO, 1%-
ны й
раств ор
в
95%-
ном
э тиловом
спирте
.
Вы полне ни е
ра бот ы
П риготовление
э люента
и
под готовка
камеры
д ля
Т СХ
Х роматографирование
провод я т
в
специальны х
камерах
д ля
Т СХ
–
стекля нны х
круглы х
или
пря моугольны х
емкостя х
с
притертой
кры ш кой
.
Н а
д но
камеры
налив ают
под в ижную
фаз у
–
э люент
.
Э люентом
в
д анной
работе
я в ля ется
смесь
ацетон
–
в од а
в
соотнош ении
49:1.
Смесь
готовя т
в
колбе
с
притертой
пробкой
смеш ением
24,5
мл
ацетона
и
0,5
мл
в од ы
(
можно
приготов ить
сраз у
в
камере
и
перемеш ать
).
В ы сота
слоя
э люента
в
камере
д олжна
бы ть
около
0,5
см
.
К амера
с
э люентом
,
плотно
з акры тая
кры ш кой
,
д олжна
некоторое
в ремя
постоять
,
чтобы
пространств о
насы тилось
парами
э люента
д ля
ускорения
процесса
хроматографирования
.
П риготовление
раств орителя
В
качеств е
раств орителя
применя ют
смесь
ацетон
–
в од а
1:1
объемом
30
мл
.
Д ля
э того
в
колбу
с
притертой
пробкой
отмерив ают
цилинд ром
15
мл
ацетона
и
15
мл
вод ы
,
в се
хорош о
перемеш ив ают
.
П риготовление
раств ора
исслед уемого
в ещ еств а
(
из ониаз ид а
)
Н ав еску
из ониаз ид а
массой
1
г
,
в з я тую
с
точностью
д о
0,01
г
в нося т
в
мерную
колбу
емкостью
10
мл
и
д овод я т
д о
метки
приготовленны м
раств орителем
(
смесью
ацетон
-
в од а
).
П олученны й
раств ор
тщ ательно
перемеш ив ают
.
П риготовление
станд артного
раств ора
примеси
Н ав еску
гид раз ина
сульфата
массой
0,05
г
раств оря ют
в
мерной
колбе
емкостью
10
мл
в
смеси
ацетон
-
в од а
1:1.
П олученны й
раств ор
имеет
концентрацию
по
гид раз ину
сульфату
0,5 %.
43
П од готовка
пластины
д ля
Т СХ
П ластину
д ля
Т СХ
марки
“ Силуфол”
,
“ А рмсорб”
или
аналогичную
клад ут
на
стол
и
просты м
каранд аш ом
,
без
нажима
,
легко
провод я т
линию
,
параллельную
нижнему
краю
пластины
на
расстоянии
1,5
см
от
края
.
Э та
линия
наз ы в ается
«
линией
старта
»
.
Н а
линии
старта
каранд аш ом
намечают
4
точки
,
рав но
отстоящ ие
д руг
от
д руга
и
от
краев
пластины
.
Ж елательно
,
чтобы
расстояние
межд у
точками
бы ло
не
менее
1,5
см
.
Раз метку
пластины
провод я т
аккуратно
,
не
наруш ая
слой
силикагеля
.
Н анесение
проб
на
пластину
В
намеченны е
точки
микрош прицем
на
10
мкл
нанося т
приготовленны е
раств оры
в
след ующ ем
поря д ке
:
в о
2
точку
–
2,5
мкл
раств ора
исслед уемого
в ещ еств а
(
из ониаз ид а
);
в
1,3
и
4
точки
–
0,5, 1,
2
мкл
раств ора
примеси
(
гид раз ина
сульфата
),
что
э кв ив алентно
2,5; 5,0
и
10
мкг
гид раз ина
соотв етств енно
.
Н анесение
проб
провод я т
легким
прикосновением
в ы д ав ленной
из
иглы
капли
к
точке
на
пластине
.
Н ужны й
объем
нанося т
не
сраз у
,
а
в
несколько
касаний
так
,
чтобы
д иаметр
получив ш егося
на
пластине
пя тна
бы л
как
можно
меньш е
и
не
прев ы ш ал
0,5
см
.
П осле
кажд ого
касания
пя тно
под суш ив ают
и
только
после
э того
нанося т
след ующ ую
порцию
раств ора
.
К огда
в се
4
пробы
буд ут
нанесены
и
пя тна
под сохнут
,
пластина
готова
д ля
провед ения
хроматографирования
.
П ровед ение
хроматографирования
П ластину
с
нанесенны ми
пробами
помещ ают
в
камеру
д ля
Т СХ
так
,
чтобы
линия
старта
с
нанесенны ми
пя тнами
бы ла
в ы ш е
уровня
э люента
.
К амеру
з акры в ают
кры ш кой
и
жд ут
,
когда
э люент
под нимется
примерно
на
2/3
в ы соты
пластины
.
П ластину
в ы нимают
из
камеры
,
отметив
каранд аш ом
в ы соту
под ъема
фронта
э люента
,
и
суш ат
на
в озд ухе
.
П рояв ление
хроматограммы
Д ля
прояв ления
з он
компонентов
пластину
обрабаты в ают
реагентом
при
помощ и
пульв ериз атора
.
Д етектирующ им
реагентом
д ля
опред еля емы х
в ещ еств
я в ля ется
1%
раств ор
п
-
д иметиламинобенз альд егид а
в
95%-
ном
э тиловом
спирте
.
П осле
обработки
пластину
суш ат
при
температуре
100-105
о
С
в
термостате
в
течение
5
мин
.
Зоны
анализ ируемого
в ещ еств а
и
примесей
прояв ля ются
на
пластине
в
в ид е
пя тен
кирпично
-
красного
цв ета
.
К ачеств енная
обработка
хроматограммы
Н а
хроматограмме
анализ ируемого
в ещ еств а
обнаружив ается
не
менее
д в ух
пя тен
.
О д но
из
них
д олжно
соотв етств овать
основному
в ещ еств у
–
из ониаз ид у
.
В торое
–
примеси
гид раз ина
.
П ровод я т
качеств енны й
анализ
хроматограммы
–
ид ентифицируют
з оны
основного
в ещ еств а
и
примеси
по
в еличине
R
f
. R
f
в сех
прояв ив ш ихся
з он
на
хроматог
рамме
рассчиты в ают
как
отнош ение
в ы соты
под ъема
з оны
компонента
(
расстояние
от
линии
старта
д о
центра
пя тна
)
к
в ы соте
под ъема
фронта
э люента
(
расстояние
от
линии
старта
д о
линии
фронта
).
В ы соты
из меря ют
линейкой
и
в ы ражают
в
од инаковы х
ед иницах
д лины
44
(
см
или
мм
).
Сов пад ение
R
f
од ной
из
з он
анализ ируемого
в ещ еств а
с
R
f
з он
гид раз ина
сульфата
,
нанесенны х
в
качеств е
станд артов
,
позв оля ет
под тв ерд ить
наличие
д анной
примеси
в
образ це
.
К оличеств енная
обработка
хроматограммы
1.
П ровод я т
пред в арительную
в из уальную
оценку
з оны
примеси
на
хроматограмме
основного
в ещ еств а
и
на
хроматограммах
станд артны х
образцов
примеси
.
О ценку
провод я т
по
совокупности
раз меров
пя тен
и
их
интенсив ности
.
Зная
сод ержание
гид раз ина
в
кажд ом
из
трех
пя тен
примесей
,
д елают
в ы в од
о
примерном
сод ержании
гид раз ина
в
исслед уемом
в ещ еств е
.
2.
П ровод я т
полуколичеств енную
оценку
сод ержания
примеси
гид раз ина
в
образ це
,
оценив ая
площ ад и
хроматографических
з он
.
П лощ ад ь
кажд ого
пя тна
рассчиты в ают
как
произ в ед ение
его
поперечной
и
прод ольной
осей
l-h,
прирав нив ая
ее
к
площ ад и
э ллипса
: S = l
·
h (
мм
2
).
Строят
график
з ав исимости
полученны х
площ ад ей
(S)
от
сод ержания
гид раз ина
в
пробе
(g
r
)
д ля
станд артны х
раств оров
гид раз ина
(2,5; 5,0
и
10
мкг
).
Рассчиты в ают
площ ад ь
пя тна
гид раз ина
в
образ це
из ониаз ид а
и
по
графику
оценив ают
его
сод ержание
в
мкг
.
Зная
общ ее
сод ержание
анализ ируемого
в ещ еств а
в
нанесенной
пробе
(g
u
=1
мг
или
1000
мкг
),
рассчиты в ают
сод ержание
в
ней
гид раз ина
в
%
по
формуле
:
,
100
⋅
=
u
r
z
g
g
С
где
g
u
=1000
мкг
,
а
g
r
–
c
од ержание
гид раз ина
в
из ониаз ид е
по
град уировочному
графику
(
мкг
).
О кончательная
формула
расчета
принимает
в ид
:
( )
%
10
r
z
g
С
=
К оличеств енное
опред еление
сод ержания
примеси
гид раз ина
в
образце
метод ом
планиметрии
.
В
основе
метод а
лежит
также
из мерение
площ ад ей
з он
на
хроматограмме
и
построение
град уировочной
з ав исимости
в
коорд инатах
√
s-lg g
r
д ля
станд артны х
образ ов
гид раз ина
.
П лощ ад и
з он
из меря ют
след ующ им
образ ом
.
Н а
хроматограмму
наклад ы в ают
лист
кальки
и
очерчив ают
контур
интересующ их
нас
з он
(
пя тен
гид раз ина
в
станд артны х
и
исслед уемом
образ це
).
П олученное
на
кальке
из ображение
наклад ы в ают
з атем
на
миллиметровую
бумагу
и
под считы в ают
площ ад ь
пя тен
(S)
в
мм
2
.
Строят
график
з ав исимости
√
s
от
lg g
r
(
количеств а
гид раз ина
в
станд артах
).
Зная
площ ад ь
пя тна
гид раз ина
в
опред еля емом
образ це
по
графику
наход я т
lg g
r
и
з атем
g
r
в
нем
,
где
g
r
–
количеств о
гид раз ина
в
пробе
,
мкг
.
Д алее
рассчиты в ают
сод ержание
гид раз ина
в
из ониаз ид е
в
процентах
как
бы ло
описано
в ы ш е
.
И спольз ование
з ав исимости
√
s-l g g
r
позв оля ет
45
получить
д остаточно
точны е
рез ультаты
,
ош ибка
опред еления
состав ля ет
примерно
5 %.
Ла б ора т орна я
ра б от а
№
2.
О п ре де ле ни е
конц е нт ра ц и и
и онов
ни ке ля
в
ра ст воре
ме т одом
б ума ж ной
хрома т огра фи и
Ц е ль
ра бот ы
:
количеств енное
опред еление
ионов
никеля
в
раств оре
метод ом
бумажной
хроматографии
.
При боры
и
ре а кт и вы
:
1.
Х роматографическая
камера
.
2.
Х роматографическая
бумага
(
фильтровальная
бумага
марки
“ синя я
лента”
,
пропитанная
раств ором
д иметилглиоксима
)
3.
М икрош приц
.
4.
Раств оритель
: 12%-
ны й
раств ор
глицерина
.
5.
Раств оры
нитрата
никеля
, Ni(NO
3
)
2
,
с
концентрацией
от
0,05
д о
0,25
мг
-
э кв
/
л
.
Вы полне ни е
ра бот ы
Л ист
фильтровальной
бумаги
марки
«
синя я
лента
»
пропиты в ают
0,1%-
ны м
раств ором
д иметилглиоксима
и
в ы суш ив ают
на
в озд ухе
в
в ертикальном
положении
.
Затем
на
линию
старта
с
помощ ью
ш прица
нанося т
по
1
мкл
станд артны х
раств оров
аз отнокислой
соли
никеля
в
интерв але
концентраций
от
0,05
д о
0,25
мг
-
э кв
/
л
и
раств оры
соли
никеля
неиз в естной
концентрации
.
Бумагу
просуш ив ают
на
в озд ухе
и
помещ ают
в
камеру
д ля
раз в ития
хроматограмм
.
К амера
пред став ля ет
собою
стакан
емкостью
500
мл
,
на
д но
которого
налив ают
под в ижную
фаз у
–
12%-
ны й
раств ор
глицерина
в
в од е
.
П олоску
бумаги
з акрепля ют
в
ш татив е
и
опускают
в
раств ор
глицерина
д о
линии
погружения
.
Раз в итие
хроматограммы
происход ит
в
течение
20-30
мин
.
П од в ижны й
раств оритель
,
под нимая сь
по
капилля рам
бумаги
,
з ахв аты в ает
ионы
никеля
,
в след ств ие
чего
з оны
в ы тя гив аются
и
принимают
форму
пиков
(
рис
. 6).
Через
30
минут
лист
фильтровальной
бумаги
из в лекают
из
стакана
,
под суш ив ают
и
из меря ют
в ы соту
пиков
анализ ируемы х
раств оров
от
центра
основания
д о
в ерш ины
.
Затем
строят
калибровочны й
график
в
коорд инатах
количеств о
в ещ еств а
-
в ы сота
пика
(
рис
. 7),
по
которому
наход я т
неиз в естную
концентрация
анализ ируемого
раств ора
соли
никеля
.