ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 08.09.2021
Просмотров: 7182
Скачиваний: 267
Бактериоскопическое исследование. См. раздел "Микробиологическая диагностика кишечных инфекций, вызванных бактериями рода Vibrio".
Бактериологическое исследование. Посев материала на щелочную пептонную воду, кровяной агар (гемолиз нехарактерен) и селективную среду — агар с добавлением инозитола, желчных кислот и бриллиантового зеленого. Идентификацию чистой культуры производят на основании культуральных, биохимических признаков, серотипирования по О- и Н-антигенам (необходимо помнить, что P.shigelloides имеет перекрестные антигены с S.sonnei и может давать положительную РА с соответствующими диагностическими сыворотками). Используют также молекулярно-биологические методы идентификации (риботипирование и др.).
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохимические и молекулярно-биологические исследования. Биохимические и молекулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить предварительный диагноз.
• ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ, ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ И ЛЕЧЕБНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
Стафилококковые бактериофаги (международный набор). Применяют для фаготипирования стафилококков с целью эпидемиологического анализа пищевой интоксикации.
Противоботулинические сыворотки. Получены из крови лошадей, гипериммунизированных ботулиническими анатоксинами. Очищены и концентрированы методом диаферм-3. Для лечебно-профилактических целей готовят Противоботулинические сыворотки четырех типов: А, В, Е, F. Моновалентные сыворотки перечисленных типов используют в диагностических целях для определения серотипа токсина в исследуемом материале.
Ботулинический трианатоксин адсорбированный очищенный.
Экзотоксины C.botulinum (серотипы А, В и Е) обезвреживают формалином при нагревании, а затем очищают от балластных веществ, концентрируют и адсорбируют на гидрате оксида алюминия. Применяют для проведения плановой активной иммунизации против ботулизма юношей допризывного возраста (16 лет).
Противохолерная агглютинирующая О-сыворотка, типовые сыворотки Огава и Инаба. Получены из крови кроликов, иммунизированных холерными вибрионами. Применяют для серологической идентификации и типирования холерных вибрионов в реакции агглютинации.
Холерные фаги. Типовые холерные фаги применяют для идентификации и типирования холерных вибрионов. Поливалентный холерный бактериофаг используют для лечебно-профилактических целей.
Холерная вакцина. Взвесь убитых холерных вибрионов применяют для активной иммунизации против холеры. Готовится из чистых культур V.cholerae O1 биоваров El-tor и asiatici cepo-типов Инаба и Огава.
Холероген-анатоксин. Обезвреженный холерный токсин. Применяют для специфической профилактики холеры (создание активного специфического антитоксического иммунитета).
Антибиотики. Могут быть использованы все препараты, действующие на соответствующие бактерии. Вместе с тем надо учитывать, что среди возбудителей достаточно широко распространены устойчивые варианты. Для большинства грамотрица-тельных возбудителей кишечных инфекций широко используют тетрациклины, ампициллин, цефалоспорины 2—4-го поколений, хлорамфеникол, фторхинолоны.
Глава 14
ВОЗБУДИТЕЛИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ И ДРУГИХ ВОЗДУШНО-КАПЕЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ
Возбудители инфекций, передающихся воздушно-капельным путем, перечисленные в табл. 14.1, относятся к разным семействам, родам и видам, которые существенно отличаются друг от друга по морфологии, культуральным и биохимическим свойствам, антигенной структуре. Респираторные инфекции разной этиологии клинически диагностируются как острые респираторные заболевания (ОРЗ) или пневмонии. Их возбудители могут быть идентифицированы только с помощью мик-
|
Микроорганизмы Заболевание (или синдром) Haemophilus influenzae (— ) А Пневмония, бронхит Klebsiella pneumoniae ( — ) А подвид pneumoniae Пневмония подвид ozaenae Озена (зловонный насморк) подвид rhinoscleromatis Риносклерома Escherichia coli (—) А Пневмония (аспирационная) Enterobacter spp. (—) А То же Proteus spp. (— ) А » » Providentia spp. (— ) А » » Serratia spp. (— ) A » » Legionella pneumophila (— )A Легионеллез Moraxella catarrhalis (~)A Бронхопневмония Mycoplasma pneumoniae А Пневмония Streptococcus pneumoniae (+)A To же Staphylococcus aureus (+)A » » Streptococcus pyogenes (+)A » » Bacteroides spp. (— )Ан Пневмония, абсцесс легких Peptococcus spp. (+)Ан То же Prevotella spp. (— )Ан » » Veillonella spp. (— )Ан Пневмония, синусит, отит Chlamydophila psittaci Орнитоз (пневмония) Chlamydophila pneumoniae Пневмония Coxiella burnetii Q-лихорадка (пневмония) Bordetella pertussis (— )A Коклюш Bordetella parapertussis (— )A Паракоклюш Corynebacterium diphtheriae (+)A Дифтерия Neisseria meningitidis (— )A Менингококковая инфекция Семейство Mycobacteriacea (к/у)А Комплекс М. tuberculosis (МТС): Туберкулез легких М. tuberculosis M.bovis M.africanum Комплекс M.avium (MAC): Микобактериоз (преимущест-M.avium венно легочная инфекция) М. intracellulare Mycobacterium kansasii Микобактериозы |
|
Микроорганизмы Заболевание (или синдром) Mycobacterium chelonae Микобактериозы Mycobacterium ulcerans Mycobacterium leprae Проказа Actinomyces israelii (+)Ан Актиномикоз (легких) Actinomyces bovis Actinomyces naeslundii (viscosus) Nocardia asteroides (+)A Нокардиоз (легких) |
Большое значение в диагностике бактериальных пневмоний приобретают современные экспресс-методы: иммунохи-мические и молекулярно-биологические, которые дают возможность поставить предварительный диагноз в течение 1-х суток от начала болезни. Ведущим методом диагностики является бактериологический, позволяющий идентифицировать возбудителя и определить индивидуальную чувствительность к антибиотикам. Поскольку большинство бактерий, вызывающих пневмонии, относятся к условно-патогенным, присутствующим в составе нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей, требуется проводить количественное исследование. В диагностике атипичных пневмоний ведущую роль играют экспресс-методы. Выявление нарастания титра антител к возбудителю (методом парных сывороток) применяют с целью ретроспективной диагностики.
а План
а Программа
Биологические свойства возбудителей пневмоний и ОРЗ, их патогенность, экология, особенности инфекции и эпидемиология вызываемых заболеваний.
Микробиологическая диагностика.
Диагностические, профилактические и лечебные препараты.
а Демонстрация
Мазки из патологического материала и чистых культур Streptococcus pneumoniae и Klebsiella pneumoniae.
Колонии S.pneumoniae на кровяном агаре и К. pneumoniae на питательном агаре.
РСК с антигенами Coxiella burnetii, Chlamydophila psittaci и Mycoplasma pneumoniae.
Диагностические, профилактические и лечебные препараты.
Задание студентам
Микроскопировать окрашенные мазки из исследуемого материала. Сделать заключение и наметить план дальнейшего исследования.
Сделать заключение о возможном возбудителе респираторной инфекции на основании данных бактериоскопического и бактериологического исследований, полученных из лаборатории (студенты получают заполненные бланки с результатами соответствующих анализов).
Серодиагностика атипичных пневмоний. Отметить результаты серологических реакций (агглютинации, РСК) с антигенами C.bumetii, C.psittaci, M.pnewnoniae и L. pneumophila.
4. Дать краткую характеристику диагностическим, профилактическим и лечебным препаратам.
а Методические указания
• Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных Streptococcus pneumoniae
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: мокрота, аспират из трахеи и бронхов, промывные воды бронхов, экссудат из плевральной полости, кровь, спинномозговая жидкость при менингите, отделяемое зева и носа при ОРЗ.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Бактериоскопическое исследование. Мазки для первичной бактериоскопии готовят из патологического материала, за исключением крови, и окрашивают по методу Грама. Наличие в них грамположительных диплококков несколько удлиненных, имеющих ланцетовидную форму (0,5—1,25 мкм), окруженных капсулой (рис. 14.1.1; на вклейке), позволяет поставить предварительный диагноз.
Бактериологическое исследование. Материал засевают на кровяной агар и/или на сахарный бульон с добавлением сыворотки крови. После инкубации при 37 "С через 24 ч на агаре образуются мелкие нежные колонии, окруженные небольшой зеленоватой зоной гемолиза. Из колоний делают мазки для изучения морфологии и тинкториальных свойств, а затем пересевают на скошенный кровяной агар или сывороточный бульон для выделения чистой культуры.
Для дифференциации S.pnewnoniae от S.pyogenes проверяют чувствительность выделенной культуры к желчи и оптохину и ферментацию инулина.
Серотипирование осуществляют в реакции агглютинации с типоспецифическими сыворотками (из более 80 известных вариантов в патологии человека ведущую роль играют 23 основных серовара). Экспресс-методом серотипирования S.pneumoniae является реакция Нейфельда, которая основана на феномене набухания капсулы стрептококка в присутствии типоспе-цифической сыворотки.
Биопроба. Для выделения чистой культуры S.pneumoniae в некоторых случаях материал вводят внутрибрюшинно белым мышам, которые являются высокочувствительными к данному микроорганизму. Культуру стрептококка выделяют из крови и органов погибшего или забитого животного, а также проводят бактериоскопию мазков-отпечатке в, сделанных из его органов. В настоящее время метод практически не применяют.
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохимические и молекулярно-биологические исследования. Иммунс-химические исследования. Для обнаружения специфического антигена S.pneumoniae в спинномозговой жидкости пациентов при менингите используют реакции непрямой латекс-агглютинации, РИГА и др.
Биохимические и молекулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить предварительный диагноз.
• Микробиологическая диагностика респираторных инфекций, вызванных Klebsietta pneumoniae
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: мокрота, промывные воды бронхов, экссудат из плевральной полости, кровь, спинномозговая жидкость при менингите, отделяемое зева и носа при ОРЗ; слизь и соскобы из носа при склероме.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Бактериоскопическое исследование. Мазки для первичной бактериоскопии готовят из патологического материала, окрашивают по методу Грама и Бурри—Гинса. Наличие в мазках грамотрицательных капсульных бактерий (см. рис. 2.2.5) позволяет сделать предварительное заключение. В случае склеромы при гистологическом исследовании гранулематознои ткани, взятой из носа, обнаруживаются своеобразные гигантские клетки Микулича, в которых содержатся клебсиеллы.
Бактериологическое исследование. Материал засевают на чашки Петри с питательным агаром, содержащим пенициллин для подавления роста сопутствующей микрофлоры, или на дифференциально-диагностические среды с лактозой и бром-тимоловым синим. На питательном агаре клебсиеллы образуют блестящие выпуклые слизистые колонии. На дифференциальной бромтимоловой среде колонии K.pneumoniae подвида rhi-noscleromatis и K.pneumoniae подвида ozaenae, не расщепляющие лактозу, окрашены в цвет среды (голубой), а на бромкрезоло-вой — в фиолетовый. Лактозоположительные K.pneumoniae подвида pneumoniae образуют колонии желтого цвета. На 2-й день из подозрительных колоний делают мазки, окрашивают их по методу Грама, Бурри—Гинса и пересевают на скошенный агар или среду Ресселя (см. тему 13.1) для получения чистой культуры. На 3-й день учитывают рост на агаре и среде Ресселя. Лактозоотрицательные бактерии окрашивают только столбик среды в красный цвет, а Лактозоположительные — всю среду и часто разрывают среду в результате газообразования при ферментации глюкозы. Идентификацию выделенной культуры проводят по наличию капсулы, отсутствию подвижности и другим признакам. Для установления серовара выделенной культуры проводят реакцию агглютинации или иммунофлюо-ресценции с типоспецифическими противокапсульными сыворотками.