Файл: Утверждаю заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации А. Н. Плутницкий временные методические рекомендации профилактика, диагностика и лечение новой коронавирусной инфекции (covid19) 3 Версия 16 (18. 08. 2022)оглавление.pdf

181
Версия 16 (18.08.2022)
При проведении исследований образуются отходы, относящиеся к классам А, Б, В и Г,обращение с которыми осуществляется в соответвии с санитарно- эпидемиологическими требованиями
СанПиН
2.1.3684-21
“Санитарно- эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно-противоэпидемических
(профилактических) мероприятий”. , предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения».

182
Версия 16 (18.08.2022)
Приложение 3-2
Инструкция по проведению диагностики COVID-19 с применением
иммунохимических методов
Общие положения
Иммунохимические методы используются для выявления антигенов
SARS-CoV-2 и антител к вирусу и дополняют комплекс клинических, инструментальных и лабораторных методов диагностики COVID-19 новой информацией, имеющей клиническое и эпидемиологическое значение.
К иммунохимическим относятся методы иммуноферментного анализа (ИФА), иммунохемилюминесценции (ИХЛ) и иммунохроматографии. Эффективность иммунохимических методов зависит от стадии инфекционного процесса, состояния иммунной системы пациента, а также от характеристик применяемых диагностических наборов.
Иммунохимические исследования для диагностики COVID-19 могут проводиться во всех лабораториях Российской Федерации вне зависимости от их организационно‑правовой формы, имеющих санитарно‑эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека III – IV патогенности и условия для исследований с применением иммунохимических методов. Для проведения исследования должны применяться зарегистрированные в установленном порядке на территории
Российской Федерации диагностические наборы реагентов (тест-системы) в соответствии с инструкциями по их применению. Перечень зарегистрированных наборов реагентов представлен в
Государственном реестре медицинских изделий
С целью диагностики COVID-19
непрямым методом рекомендуется проведение раздельного тестирования на антитела класса IgM/IgA и IgG, а также мониторинг появления антител в динамике (детекция сероконверсии) — повторное тестирование в неясных случаях через 5-7 дней.
Для минимизации ложноположительных результатов рекомендуется ввести алгоритм последовательного тестирования пациентов, у которых получены первоначальные положительные результаты на антитела классов IgM/IgA или IgG, с использованием другого теста. С этой целью необходимо использовать тест-систему с максимальной чувствительностью и специфичностью, а также с одновременным выявлением антител классов A, M, G, которая будет играть роль референтной
(верифицирующей) тест-системы. В качестве такой тест-системы может использоваться тест-система для выявления рецептор-связывающего домена поверхностного гликопротеина S SARS-CoV-2.
Тестирование на антитела к вирусу SARS-Cov-2 рекомендуется использовать:
− в качестве дополнительного метода диагностики острой инфекции (с учетом сероненгативного периода) или при невозможности исследования мазков МАНК, в том числе при госпитализации в стационар по поводу соматической патологии;
− для установления факта перенесенной ранее инфекции;
- для установления факта имунного ответа на вакцинацию от COVID-19;
− для отбора потенциальных доноров иммунной плазмы.

183
Версия 16 (18.08.2022)
Иммунохимические методы диагностики COVID-19
Выявление антигенов SARS-CoV-2 проводится иммунохроматографическими методами (ИФА, ИХЛ или иммунохроматографии). Экспресс-тесты для определения антигенов (с применением иммунохроматографии) позволяют получить результат за 10-30 минут. Диагностическая чувствительность и специфичность экспресс-тестов на антиген SARS-CoV-2 могут быть ниже, чем у тестов на основе МАНК.
Положительные результаты тестов на антиген SARS-CoV-2 могут ожидаться в тот же период развития заболевания, что и выявление
РНК вируса: за 2 дня до и на протяжении 5-7 дней после появления симптомов. Положительный результат теста может рассматриваться как подтверждение диагноза COVID-19, отрицательный результат не позволяет исключить COVID-19.
Иммуонхроматографические тесты могут применяться для экспресс-диагностики
COVID-19 в ситуациях, когда проведение молекулярно-генетического тестирования
МАНК невозможно, в том числе в удаленных и малонаселенных регионах. Необходимо иметь в виду, что тест на антиген SARS-CoV-2 при малой распространенности заболевания имеет более низкую прогностическую ценность положительного результата.
Выявление антител к SARS-CoV-2 проводится с помощьюметодов ИФА, ИХЛ или иммунохроматографии. Разработанные методы ИФА и ИХЛ позволяют получать качественные, полуколичественные (коэффициент позитивности) и количественные результаты. Для определения уровней иммуноглобулинов к SARS-CoV-2 необходимо использовать наборы реагентов для количественного определения антител, а результаты исследлований представлять с использованием условных единиц измерения BAU/мл (binding antibody units, «единицы связывающих анител»).
Иммунохроматографические методы – быстрые диагностические тесты, рассматриваются как тесты «у постели больного» (время получения результата –
10-30 минут). Иммунохроматографические тесты являются качественными тестами и позволяют определить наличие антител к SARS-CoV-2 (IgM, IgG, суммарные антитела).
С помощью выявления отдельных классов антител к SARS-CoV-2
(IgA/IgM, IgG) возможно определение различных фаз инфекционного процесса:
− серонегативная фаза — антитела могут не выявляться в первичном образце, но выявляются во взятых через несколько дней образцах;
− активная фаза — при определении диагностически значимого уровня IgA и/или IgM в одном образце или значимого нарастания уровня IgG в парных сыворотках, взятых с интервалом в 2-4 недели;
− фаза реконвалесценции — концентрация IgA и IgM, как правило, существенно снижается (падение титра в 2-4 раза) во время выздоровления, при сохраняющихся
IgG через 2 недели после курса лечения и позднее;
− перенесенная инфекция — персистенция IgG без роста его уровня в парных сыворотках и отсутствие IgA и IgM.
Определение IgG к SARS-CoV-2 через 4 недели после вакцинации позволяет подтвердить наличие поствакцинального иммунитета. Длительность периода детектируемого наличия антител не определена, но в настоящее время рассматривается как период не менее 3 месяцев.

184
Версия 16 (18.08.2022)
Сбор, хранение и транспортировка образцов биологического материала
Преаналитический этап. Биоматериалом для проведения иммунохимических исследований может быть капиллярная кровь, сыворотка, плазма, цельная венозная кровь (в зависимости от типа тестирования и согласно инструкциям производителей).
Забор крови проводят в соответствии с ГОСТ Р 53079.4-2008 Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа.
Пробирки с кровью транспортируют в термоконтейнерах с надписью:
«пробы крови для лабораторных исследований». В термоконтейнере должна поддерживаться температура от +4 до +8 °С. Пробы крови от лиц с установленным диагнозом COVID-19 помещают в дополнительный вторичный контейнер, затем – в термоконтейнер с надписью: «пробы с инфицированным материалом».
Образцы крови должны быть доставлены в лабораторию в кратчайшие сроки.
В журнале учета лабораторных исследований регистрируют время доставки проб в лабораторию.
Хранение образцов цельной крови допустимо при температуре 20-25°С не более
2 часов, при температуре 2-8°С — не более 6 ч с момента забора биоматериала.
Сроки хранения проб сыворотки при температуре 2-8°С – не более 4 дней.
Хранение проб сыворотки от 5 дней до 1 года осуществляют в замороженном виде при температуре не выше минус 18 °С. Длительное хранение проб (более года) осуществляется при температуре не выше минус 40 °С.
Аналитический этап проводится в соответствии с инструкцией к набору реагентов, который применяется для исследования.
Постаналитический
этап.
Оценка результатов иммунохимических исследований проводится в соответствии с инструкцией производителя применяемых медицинских изделий
(тест-системы/набора реагентов и оборудования).
Рекомендации по интерпретации результатов исследований приведены в таблице.

185
Версия 16 (18.08.2022)
Интерпретация результатов исследований методами амплификации
нуклеиновых кислот и иммунохимическими методами
Результаты исследования
SARS-CoV-2
Интерпретация*
РНК
Анти
ген
IgM/
IgA
IgG
-
-
-
-
Отсутствие текущей и ранее перенесенной инфекции
COVID-19.
+
+
-
-
Острая фаза инфекции. Серонегативный период.
Результат может предшествовать появлению симптомов COVID-19.
+
+
+
-
Острая фаза инфекции. Начало развития иммунного ответа.
+
+
+
+
Острая фаза инфекции, выраженный иммунный ответ на инфекцию COVID-19.
-
-
+
+
Поздняя фаза заболевания или выздоровление, выраженный иммунный ответ.
-
-
-
+
1) Наличие инфекции COVID-19 в прошлом или период выздоровления 2) Вакцинация от COVID-19
Сформирован иммунитет к SARS-CoV-2.
* - результаты исследований суммарных антител интерпретируются в соответствии с включенным в определение видом антител
Интерпретация результатов иммунохимических исследований должна проводиться с учетом анамнеза и клинических данных, а также результатов других лабораторных и инструментальных исследований. Необходимо также учитывать вероятность получения ложноположительных и ложноотрицательных результатов.
Ложноположительные результаты могут появиться при наличии в крови пациента так называемых «перекрестно-реагирующих» антител, сходных по своим иммунохимическим свойствам со специфическими антителами (других коронавирусов, ревматоидным фактором IgM). Ложноотрицательные результаты могут быть получены при исследовании биологических образцов, взятых на серонегативном этапе развития инфекции или при применении наборов реагентов (тест-систем) с низким уровнем чувствительности. Ложноотрицательные результаты могут быть получены при обследовании пациентов со сниженным иммунитетом.
Ложноположительные и ложноотрицательные результаты могут также появляться при нарушении правил проведения лабораторных исследований на всех этапах.
Дезинфекция, обращение с отходами при проведении диагностики COVID‑19 с примением иммунохимических методов проводятся аналогично требованиям к дезинфекции и обращению с отходами с применением методов амплификации нуклеиновых кислот
(
Приложение 3-1).

186
Версия 16 (18.08.2022)
Приложение 3-3
Алгоритм этиологической диагностики у пациентов с подозрением на COVID-19
1
МАНК – методы амплификации нуклеиновых кислот (раздел 4; приложение 3.1.)
2
Определение антигена SARS-CoV-2 методами иммунохроматографии или другими иммунохимическими методами (раздел 4; приложение 3.2.)

187
Версия 16 (18.08.2022)
Приложение 3-4
Поиск зарегистрированных в Российской Федерации медицинских изделий
(тест-систем/наборов реагентов) для выявления SARS-CoV-2 и антител к нему
Информация о зарегистрированных в Российской Федерации медицинских изделиях для выявления иммуноглобулинов к
SARS-CoV-2 размещена в Государственном реестре медицинских изделий и организаций (индивидуальных предпринимателей), осуществляющих производство и изготовление медицинских изделий (далее – Государственный реестр), опубликованном на официальном сайте
Росздравнадзора www.roszdravnadzor.ru в разделе «Электронные сервисы» https://roszdravnadzor.gov.ru/services/misearch/
Для поиска медицинского изделия возможно воспользоваться поисковой строкой сервиса «Расширенный поиск».
Строка «Расширенный поиск» позволяет осуществлять навигацию по:
- номеру регистрационного удостоверения;
- дате регистрационного удостоверения;
- наименованию и стране производителя;
- виду номенклатурной классификации медицинского изделия и др.
При использовании поисковой строки сервиса «Расширенный поиск» требуется задать необходимые критерии поиска и нажать на кнопку «Вывести результаты».
Виды Номенклатурной классификации медицинских изделий, представляющих
собой диагностические наборы реагентов для выявления РНК SARS-CoV-2
№ п/п
Вид Номенклатурной классификации
Наименование вида Номенклатурной классификации медицинских изделий
1.
142160
SARS Коронавирус нуклеиновая кислота ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот
2.
142190
SARS Коронавирус нуклеиновая кислота ИВД, калибратор
3.
142220
SARS Коронавирус нуклеиновая кислота ИВД, контрольный материал
4.
142240
SARS Коронавирус нуклеиновая кислота ИВД, реагент
5.
194570
Набор реагентов для выявления РНК коронавируса
SARS-CoV-2 тяжелого острого респираторного синдрома
(COVID-19) и вирусов гриппа А, В, субтипа Н1рс1ш09
(пандемического) гриппа А

188
Версия 16 (18.08.2022)
Виды Номенклатурной классификации медицинских изделий, представляющих
собой диагностические наборы реагентов для выявления иммуноглобулинов
к SARS-CoV-2
№ п/п
Вид Номенклатурной классификации
Наименование вида Номенклатурной классификации медицинских изделий
1.
142020
SARS Коронавирус антитела классов иммуноглобулин A
(IgA)/IgG/IgM ИВД, контрольный материал
2.
142030
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин G
(IgG) ИВД, калибратор
3.
142070
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин G
(IgG) ИВД, контрольный материал
4.
142090
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин G
(IgG) ИВД, реагент
5.
142060
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин А
(IgА)/IgG/IgM ИВД, реагент
6.
142100
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин G
(IgG)/IgM ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)
7.
142120
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин G
(IgG)/IgM ИВД, набор, иммунофлуоресцентный анализ
8.
142130
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин M
(IgM) ИВД, набор, иммуноферментный анализ
9.
142150
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин M
(IgM) ИВД, набор, иммунофлуоресцентный анализ
10.
142180
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин M
(IgM) ИВД, калибратор
11.
142200
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин G
(IgG)/IgM ИВД, реагент
12.
142210
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин M
(IgM) ИВД, контрольный материал
13.
142230
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин M
(IgM) ИВД, реагент
14.
142250
SARS Коронавирус антитела иммуноглобулин A
(IgA)/IgG/IgM ИВД, набор, иммунохроматографический анализ, экспресс-анализ
15.
142170
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин G
(IgG)/IgM ИВД, контрольный материал

189
Версия 16 (18.08.2022)
16.
142290
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин A
(IgA)/IgG/IgM ИВД, калибратор
17.
142260
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин G
(IgG) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)
18.
142300
SARS Коронавирус антитела класса иммуноглобулин G
(IgG) ИВД, набор, иммунофлуоресцентный анализ