Файл: Бактериальной клетки. Основные морфологические формы бактерий и методы их изучения. Принципы классификации бактерий по Берджи.pdf

- повышенная температура, лихорадка, общее недомогание, боли в горле;
- гиперемия миндалин с синюшным налетом;
- увеличение лимфатических желез.
Материал для исследования:
- при дифтерии носоглотки - дифтиретическая пленка или отделяемое пораженной слизистой оболочки зева, носа, глотки.
- от микробоносителей – отделяемое слизистой оболочки носа и зева.
Микробиологическая диагностика
1.Бактериологическое исследование, включающее выделение возбудителя, его идентификацию и проверку токсигенности выделенной культуры.
2. Специфические АТ в сыворотке крови выявляют с помощью РА, РПГА, ИФА.
3.Для обнаружения дифтерийного токсина – РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом,
ИФА.
4.ПЦР – обнаружение нуклеотидных последовательностей, которые кодируют синтез экзотоксина.
Профилактика
.
1.Вакцинопрофилактика - вакцинация АКДС с 3х месяцев жизни (3х кратно с интервалом 30-40 дней. Через 9-12 месяцев ревакцинация. Для ревакцинации в 6, 7, 11, 16 лет – вакцина АДС-М.
2. Вакцина Тетракок – профилактика коклюша, дифтерии, столбняка, полиомиелита.
3. Вакцина Д.Т. Вакс – содержит дифтерийный и столбнячный анатоксины.
4. ДТ- Адьюлт – содержит дифтерийный и столбнячный анатоксины
5.АКДС В – дифтерийный, столбнячный анатоксины, коклюшные и гепатитные компоненты.
Ревакцинация проводится под контролем определения антитоксического иммунитета. Ставят РПГА с дифтерийным эритроцитарным анатоксическим диагностикумом.
Сorynebacterium non diphtheriaе вызывают ОРВИ в 11%; бронхиты, пиелонефриты, уретриты, эндокардиты, кольпиты, дерматиты, пневмонии, артриты и др. Чаще выделяли С. pseudobliphthericum и C. xerasis, C. ulcrans. Часто Сorynebacterium non diphtheriaе выделяли из клинического материала в ассоциации со стафилококками и стрептококками. В этих случаях факторы патогенности и резистентности к антибиотикам более выражены.
Этиотропная терапия
Лечение антитоксической сывороткой, которую вводят в дозе 10000-50000 АЕ, в зависимости от тяжести заболевания и возраста.

Ревакцинация проводится под контролем определения антитоксического иммунитета. Ставят РПГА с дифтерийным эритроцитарным анатоксическим диагностикумом.
Сorynebacterium non diphtheriaе вызывают ОРВИ в 11%; бронхиты, пиелонефриты, уретриты, эндокардиты, кольпиты, дерматиты, пневмонии, артриты и др. Чаще выделяли С. pseudobliphthericum и C. xerasis, C. ulcrans. Часто Сorynebacterium non diphtheriaе выделяли из клинического материала в ассоциации со стафилококками и стрептококками. В этих случаях факторы патогенности и резистентности к антибиотикам более выражены.
Вопрос 74. Туберкулез и микобактериозы. Характеристика
возбудителя. Микробиологичекая диагностика. Специфическая
профилактика.
Возбудитель туберкулеза
Ежегодно в мире от туберкулеза погибают 3 млн. человек и регистрируется 8-9 млн. новых случаев заболеваний. За последние 10 лет заболеваемость в России повысилась в 2 раза, летальность – в 1,5 раза. Широко распространены штаммы, обладающие множественной лекарственной устойчивостью.
По данным ВОЗ лечение больных, у которых туберкулез вызван множественноустойчивыми штаммами, обходится в 100 раз дороже, а эффективность лечения не превышает 65%.У больных с
ВИЧ, туберкулез встречается в 500 раз чаще.
Возбудитель: семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium. Микобактерии туберкулезного комплекса:
M. tuberculosis;
M. bovis;
M. africanum;
M. microti.
Основная роль M. Tuberculosis – 95%; M. Bovis – 5%. Остальные представители рода обозначаются как нетуберкулезные микобактерии (НТМБ). НТМБ - это условно патогенные бактерии, широко распространены в природе, могут заселять верхние и нижние отделы респираторного тракта и

мочевыводящую систему. В настоящие время около 20 видов НТМБ могут вызывать различные заболевания (поражения кожи, подкожной клетчатки, костей, мягких тканей, воспалительные процессы в легких, менингиты и 6 дессиминированные процессы). По последним данным у ВИЧ - инфицированных 50- 56% вторичные инфекции вызывают НТМБ.
Март 1882 г. Р. Кох – выделил возбудителя туберкулеза.
Это палочки средней величины, тонкие, изящные, полиморфные. Встречаются ветвящиеся формы, внутри - включения - зерна Муха. Спор и капсул нет.
Неподвижные. Снаружи от клеточной стенки – слой гликопептидов (в виде паутинки) –
МИКОЗИДЫ – это микрокапсула, один из факторов вирулентности. Очень плохо воспринимают анилиновые красители. Для окраска по методу Грама нужно 24 часа → Грам +. Применяется метод
Циля – Нильсена. Микобактерия характеризуется особенностями строения клеточной стенки: многослойная; клеточная стенка устроена значительно сложнее, чем у всех прокариот; в состав кл. стенки входит большое количество липидов (более 60% сухого вещества).
Липиды КС разнообразны, но есть характерные для МБ - миколовые кислоты; они либо находятся фиксированно в каркасе клеточной стенке, либо в свободном состоянии - сульфатиды. Все слои клеточной стенки пронизываются липоарабиномананном. Манозные концы отвечают за способность туберкулезной бактерии взаимодействовать с рецепторами макрофага. Перечисленные особенности играют ключевую роль в физиологии микобактерий. Эти особенности объясняют кислото-, щелоче- и спиртоустойчивость микобактерий, они объясняют неспособность окрашиваться анилиновыми красителями; возбудители, попавшие в микрофаги, устойчивы к биоцидным свойствам макрофагов.
По типу получения энергии они аэробы.
Культуральные свойства
1. Требовательны к питательным средам, фактором роста является глицерин; используют яично- глицериновые, картофельно-глицериновые синтетические среды.
2. Поскольку они растут медленно, для подавления сопутствующей флоры добавляют бриллиантовый зеленый или генциан-виолетт.
3. Бактерии туберкулеза растут очень медленно; время генерации 14-16 часов. Видимый рост появляется через 21-28 дней. Медленный рост - один из признаков для дифференциации M. tuberculosis от других быстро растущих микобактерий. Способность к медленному росту объясняется строениемклеточной стенки. Благодаря гидрофобности, питательные вещества очень медленно проникают в цитоплазму, что приводит к снижению метаболизма. Этим же объясняется плохое проникновение анилиновых красителей.
На плотных средах дают колонии желтоватого цвета, не сливаются, поверхность не ровная. В жидких средах растут в виде пленки.
Биохимические свойства
Изучение биохимических свойств используется для определения видовой принадлежности.

Антигенное строение
: сложное. Антигены: белки и фосфолипиды клеточной стенки, корд- фактор и эндотоксин.
Факторы вирулентности
Основные факторы вирулентности M. tuberculosis начинают продуцировать, только когда они попадают в организм (макроорганизм). Когда они находятся во внешней среде, эти факторы репрессированы. К факторам вирулентности относят: сульфатиды,
микозиды,липоарабиномананн. Туберкулезные бактерии являются факультативными внутриклеточными паразитами, которые размножаются внутри макрофагов.
Этиология
Источником является человек. Путь заражения воздушно-капельный, контактно- бытовой и алиментарный. При аэрогенном пути заражения туберкулезная палочка попадает в альвеолы, где происходит контакт с альвеолярными макрофагами; размножение в них сопровождается развитием неспецифической доиммунной гранулемы. Они легко проникают через барьеры в регионарные лимфатические узлы, затем кровь и другие органы. Развитие специфической гранулемы или туберкулемы происходит только через 2-3 недели и связано с подключением Т - сенсибилизированных лимфоцитов. Эта специфическая гранулема еще называется первичным аффектом. В процессе вовлекаются регионарные лимфатические сосуды и узлы. Все вместе составляет первичный туберкулезный комплекс. У большинства людей он самоизлечивается, первичный аффект подвергается фибролизу и кальцификации. В других случаях (у детей) самоизлечение не наступает и развивается острый первичный туберкулез. Это всегда острый процесс у лиц, которые ранее не имели контакт с туберкулезными бактериями. Вторичный туберкулез – это хронический процесс, он возникает не ранее чем через 5 лет после первичного туберкулеза.
Хронический туберкулез не излечивается без этиотропной терапии; хронический процесс - это всегда иммунопатология, относится к внутримакрофаговым инфекциям. Вторичный туберкулез в 80% случаев возникает в результате реактивации эндогенной инфекции и лишь 20% случаев является результатом экзогенного заражения. Чаще заболевание развивается при стрессе, плохих жилищных условиях. Причины, по которым происходит активация эндогенного туберкулеза, расплывчаты, вероятность его развития нельзя предсказать.
Клиника
Туберкулезный процесс может развиваться в любых органах: легкие, кости, мочеполовая система и др. Наиболее частая локализация – легкие
Иммунитет
Иммунитет при туберкулезе нестерильный, не стойкий. Антитела не играют защитной роли, решающую роль в механизме играет инфекционная аллергия.

2. Бактериологическое исследование: посев на специальные среды (28 дней). Определяется чувствительность к противотуберкулезным препаратам.
3. Серодиагностика. ИФА. Антитела не играют защитной роли, но они образуются.
4. ПЦР.
5. Аллергические диагностические пробы.
Этиотропная терапия
Возбудители природно-устойчивы к большинству антибиотиков. Выделяют особую группу противотуберкулезных препаратов. Основная комбинация в настоящее время
– рифампицин + изониазид. Однако процент штаммов, обладающих лекарственной устойчивостью, быстро растет. Для лечения применяется комбинированная терапия, как минимум 2 препарата, лечение длительное (6 месяцев и более).
Специфическая профилактика
Существует вакцина БЦЖ – живая вакцина (бактерии Кальметта и Герена). Вводится в роддоме, на
3-5 день после рождения. Ревакцинация проводится в школе, под контролем пробы Манту.
Ревакцинируют лиц с отрицательной пробой Манту. и лабораторной диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения дифтерии и туберкулеза.

Вопрос 75. Микоплазмозы. Характеристика возбудителей
респираторных и урогенитальных микоплазмозов.
Микробиологическая диагностика.
Микоплазмы
- это прокариоты, отличительной биологической особенностью которых является отсутствие регидной клеточной стенки; это самостоятельная группа живых организмов, они не произошли ни от каких бактерий и не могут реверсировать в какие-либо виды бактерий. Они принадлежат семейству Mycoplasmatacea. Это семейство включает два рода, играющих определенную роль в патологии человека. ( Mycoplasma –включает 07 видов, Ureoplasma – 7 видов).
Основные биологические особенности микоплазм:
- отсутствует клеточная стенка, ее функции выполняет цитоплазматическая мембрана (ЦПМ).
- микоплазмы полиморфны, пластичны и характеризуются осмотической хрупкостью. Они имеют малые размеры и проходят через фильтры -0,2 мкм.
- устойчивы ко всем антибиотикам - ингибиторам клеточной стенки (β –лактамным антибиотикам и гликопептидам).
- не окрашиваются по Граму, для их изучения используют окраску по Романовскому
–Гимзе.
- имеют самые малые размеры генома для прокариот - 450-500 МД, что ограничивает их биосинтетические возможности
- требовательны к питательным средам, в силу ограниченных биосинтетических способностей;
- низкое соотношение пар Г-Ц в ДНК; у большинства видов около 30%
- имеют минимальный набор органелл: нуклеоид, рибосомы и ЦПМ.
- важной биологической особенностью микоплазм является их способность паразитировать на мембране клетки, т.е. они являются мембранными паразитами, с чем во многом связан патогенез микоплазма - инфекции.
-микоплазмы могут изменять антигенную специфичность клеток макроорганизма, что ведет к развитию аутоиммунных процессов.
- микоплазмы имеют антигены, перекрестно реагирующие с тканями организма человека.
Морфология
-обладают выраженным полиморфизмом. Имеют различные формы. При выращивании на плотных питательных средах в основном имеют круглые формы.

-В мазке из одной колонии одновременно можно увидеть любые формы.
-По морфологии микоплазмы разных видов не отличаются.
Культуральные свойства
-они очень требовательны к питательным средам; растут на средах с добавлением 30% сыворотки или на основе сердечно-мозгового перевара.
-видимые колонии микоплазм на поверхности агара появляются только на 3-5 сутки; уреоплазм - через 24-48 часов; 6
-колонии очень мелкие (диаметр 0,1-0,3 мм. у уреоплазм 0,01-0,03 ) и видны только под большим увеличением микроскопа;
- колонии более плотные в центре с ажурной периферией – «яичница- глазунья», врастают в среду;
-колонии микоплазм разных видов не отличаются друг от друга. В жидкой среде они растут, давая легкую аполисценцию.
Определение ферментативных свойств используются для определения видовой принадлежности.
Способы репродукции множественны: почкование, сегментация ветвистых форм, бинарное деление.
Факторы вирулентности
Микоплазмы широко распространены во внешней среде, из 107 видов микоплазм 16 входят в состав нормальной микрофлоры; основные биотопы – полость рта, нижние дыхательные пути, слизистая мочеполового тракта; в настоящее время только один вид M. pneumonia считается патогенным все остальные относятся к условно патогенным. Наиболее часто вызывают заболевания у человека M. hominis, M. genitalium, M. urealytikum. Патогенным потенциалом обладают M. fermentans и M. penetrans.
В качестве основного фактора вирулентности микоплазм рассматриваются их способность
адсорбироваться на рецепторах клетки хозяина и взаимодействовать с ними. Некоторые виды микоплазм имеют специальные органеллы для связывания с клеткой. Предполагается наличие нейротоксинов у некоторых штаммов M. pneumonia. Экзотоксин имеют M. pneumonia и M. fermentans. Эндотоксин микоплазмы пневмонии повреждает реснички респираторного эпителия и нейтрофилы человека. Гемолизины – микоплазмы пневмонии вызывает β-гемолиз эритроцитов человека. Микоплазмы могут продуцировать ферменты агрессии и защиты: нейроминидазу, протеазы, нуклеазы. М. urealytikum разрушает ДНК сперматозоидов. Микоплазмы, расположенные внутри клеток и паразитирующие на мембране клеток, резистентны к механизмам защиты хозяина.
Микоплазмы обладают иммуномодулирующим действием.
Особенности микоплазмозов:
- не имеют собственных клинических проявлений;
- заболевание может протекать остро, но чаще всего микоплазмозы имеют хроническое рецидивирующее течение; характерно длительное носительство микоплазм в составе ЦИК
- обладают способностью “ускользать” от иммунного надзора хозяина. 7
- чаще они развиваются на фоне имунносупресии и сопровождаются различными иммунопатологическими реакциями