ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 01.03.2019
Просмотров: 6351
Скачиваний: 2
246
1. В качестве ускоренной диагностики используют:
• иммунофлуоресцентный метод (прямой РИФ), позволяющий быстро
обнаружить вирусный антиген в мазках-отпечатках со слизистой оболочки
носа или в смывах из носоглотки больных;
• ИФА для выявления вирусных антигенов непосредственно в
материале от больных;
• метод гибридизации НК с использованием РНК-зонда.
2. Вирусологический — заражение 10
−11-дневных куриных эмбрионов
лучше в амниотическую полость. Вирус после 48 часов инкубации
эмбрионов при температуре 33
−35°С обнаруживают в содержимом
амниотической полости с помощью РГА, а идентифицируют его с
помощью РТГА. Используют эритроциты кур, пригодны также
эритроциты морских свинок и 0-группы крови человека.
3. Серологический — выявление специфических антител и нарастания
их титра (в парных сыворотках) с помощью РТГА, РСК,
иммуноферментного метода. Наивысшие титры антител определяются на
9
−12 день от начала заболевания.
Предложена также иммуноферментная методика «бескровного»
обнаружения специфических секреторных IgA в слюне в качестве
самостоятельного способа диагностики гриппа.
Специфическая профилактика. Для профилактики гриппа предложены
и используются следующие типы вакцин:
1) живая из аттенуированного вируса;
2) убитая цельновирионная;
3) субвирионная вакцина (из расщепленных вирионов);
4) субъединичная — вакцина, содержащая только гемагглютинин и
нейраминидазу. Детей от 6 мес. до 12 лет, по рекомендации ВОЗ,
следует прививать только субъединичной вакциной как наименее
реактогенной и токсичной.
Вирус гриппа типа В
Структура вириона сходна со структурой вируса А. Геном состоит из 8
фрагментов, кодирующих 3 неструктурных и 7 структурных белков. По
антигенным свойствам гемагглютинина и нейраминидазы различают
несколько серовариантов. Процесс антигенного дрейфа выражен слабее,
чем у вируса А. Вирусы гриппа типа В являются виновниками локальных
вспышек и эпидемий; пандемий не вызывают. Клиника заболевания такая
же, как и при гриппе типа А.
Лабораторная диагностика такая же, вирус дифференцируется
серологически. Специфическая профилактика осуществляется так же, как
против гриппа А.
247
Вирус гриппа типа С
Вирион имеет такую же форму, как вирусы типов А и В. Геном
представлен однонитевой негативной РНК из 7 фрагментов, нуклеотидная
последовательность которых существенно отличается от таковых вирусов
типов А и В. У вируса типа С отсутствует нейраминидаза, имеется только
один тип шипов, имеющий две функции: гемагглютинина и
нейраминидазы. Вирус гриппа С не вызывает пандемий и больших
эпидемий, он часто является причиной спорадических заболеваний
гриппом. Клиника заболевания такая же, как при относительно умеренных
формах гриппа А.
Диагностика основана на выделении вируса в куриных эмбрионах;
применяются
также
иммунофлуоресцентный
метод
и
другие
серологические реакции.
Парамиксовирусы — крупные вирусы сферической формы
диаметром 150
−300 нм, сложные суперкапсидные. В состав семейства
входит 4 рода:
• Род Paramyxovirus, в него входят вирусы парагриппа 1 и 3 серотипов;
• Род Rubulavirus, в него входят вирус эпидемического паротита,
вирусы парагриппа 2 и 4 серотипов;
• Род Morbillivirus — вирус кори;
• Род Pneumovirus — вирус респираторно-синцитиальный.
Геном вирусов представлен однонитевой нефрагментированной
негативной РНК, состоит из 6 генов. С вирионной РНК связаны белок NP и
полимеразные белки Р и L, образующие нуклеокапсид со спиральным
типом симметрии. Нуклеокапсид окружен оболочкой из матриксного белка
М. Вирион покрыт суперкапсидом, состоящим из липидного бислоя с
вмонтированными в него гликозилированными белками HN и F (от англ.
fusion — слияние), которые выступают в виде шипов. Белок HN,
обладающий гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью,
ответствен за связывание вируса клеточными рецепторами. Белок F
опосредует три вида активности:
• слияние вирусной мембраны с мембраной клетки и ее лизосом;
• слияние клеток, которое обеспечивает возможность вирусу
распространяться от клетки к клетке при помощи образующегося
синцития, минуя околоклеточную среду,
• гемолиз эритроцитов.
Парамиксовирусы не имеют общего антигена, единого для всего
семейства.
Их жизненный цикл протекает в цитоплазме клетки.
248
Вирусы парагриппа человека (ВПГЧ) впервые выделены в 1956
−1958
гг., по поверхностным антигенам разделены на четыре сероварианта, но их
внутренние белки имеют общие детерминанты.
Вирусы культивируются в курином эмбрионе хуже, чем вирус гриппа, а
1 и 3 типы в куриных эмбрионах вообще не культивируются. Культуры
клеток подходящие для них — первично-трипсинизированные культуры
эмбриональных почек резусов, почек эмбриона человека, почек эмбриона
морской свинки. В этих культурах вирусы 1-го и 4-го типов вызывают
разрежение монослоя, а 2-го и 3-го типов — симпластообразование с
последующим отслоением от стекла и образованием дырок по типу
«швейцарского сыра». Кроме того, в цитоплазме пораженных клеток
можно наблюдать образование ацидофильных включений. В монослойных
культурах вирусы можно обнаруживать по феномену гемадсорбции,
используя эритроциты морских свинок.
Вирусы парагриппа — очень распространенные возбудители ОРЗ. Они
вызывают в основном локальные вспышки, наблюдаются повсеместно,
особенно в странах с умеренным климатом. ВПГЧ чаще поражают клетки
гортани, поэтому заболевание протекает с явлениями ларингита. У детей
заболевания, вызываемые ВПГЧ, протекают более тяжело, у них чаще
развивается интоксикация.
Для заболеваний, вызываемых вирусами парагриппа 1-го типа,
характерен симптом ложного крупа, а также бронхиолиты, пневмонии у
детей, у взрослых — насморк, легкие респираторные заболевания. 2 тип —
круп-ассоциированный вирус, имеет общий антиген с вирусом свинки.
ВПГЧ-3 являются виновником 60
−70% заболеваний нижних отделов
дыхательных путей у детей первых полутора лет жизни. Это бронхиолиты,
бронхиты со стенозом гортани, пневмонии. 4 тип — ОРЗ с интоксикацией,
напоминающей грипп.
Путь передачи — воздушно-капельный, вирусы выделяются от
больного в окружающую среду с 3 до 10 дня болезни. Срок инкубации —
3
−6
дней.
После
перенесенного
заболевания
иммунитет
типоспецифический, непродолжительный.
Для
лабораторной
диагностики
парагриппозных
заболеваний
применяются следующие методы:
а)
обнаружение
вирусных
антигенов с
помощью
методов
иммунофлуоресценции и ИФА в эпителиальных клетках слизистой
оболочки носовых ходов и носоглотки;
б) выделение вируса в культурах клеток, обнаружения их по феноменам
симпластообразования, ЦПД, Гадс с последующей идентификацией его с
помощью реакций торможения гемадсорбции или гемагглютинации,
неитрализации симпластообразования и бляшкообразования.
249
в) определение противовирусных антител с помощью реакций
торможения гемадсорбции (гемагглютинации) или нейтрализации в культуре
клеток с использованием парных сывороток (нарастание титра антител).
Методы специфической профилактики не разработаны.
RS-вирус является одним из наиболее частых возбудителей ОРЗ у
детей первых 2
−3 лет жизни. Впервые был выделен в 1956 г. от шимпанзе,
страдавшей ОРЗ, а в 1957 г. Р. Hilleman назвал этот вирус «вирусом
детства».
Вирион сферической формы, диаметр его варьирует у отдельных частиц
от 120 до 200 нм. RS-вирус отличается от других парамиксовирусов тем,
что у него не обнаружены гемагглютинин и нейраминидаза, и он не
обладает гемолитической активностью. Белок F вируса обеспечивает
слияние двух типов:
а) слияние мембраны вируса с мембраной клетки и ее лизосом;
б)
слияние
инфицированной
клетки
с
прилегающими
неинфицированными клетками, вследствие чего и образуется синцитий —
симпласт из клеток, связанных между собой цитоплазматическими
отростками («сетчатая ткань»).
По антигенным свойствам различают три сероварианта вируса. Вирус
хорошо размножается в диплоидных культурах клеток человеческого
происхождения, первичных культурах почек эмбриона человека, а также
культурах КВ, FL, HeLa, Hep-2 с проявлением характерного
цитопатического действия, а также с образованием бляшек; не
культивируется на куриных эмбрионах. RS-вирус очень лабилен и легко
разрушается при замораживании и оттаивании, при обработке
жирорастворителями, детергентами, различными дезинфицирующими
веществами; при нагревании до 55°С погибает за 5
−10 мин.
Источником инфекции является больной человек. Заражение
происходит воздушно-капельным путем. Инкубационный период 3
−5
дней. Вирус размножается в эпителиальных клетках дыхательных путей,
процесс быстро распространяется и на их нижние отделы. Особенно
тяжело заболевание протекает у детей первых шести месяцев жизни в виде
бронхита, бронхиолита, пневмонии. Возможно развитие хронических РС-
инфекций у детей особенно в ассоциации с аденовирусами. У 75% детей
трехлетнего возраста обнаруживаются антитела к вирусу.
Постинфекционный иммунитет стойкий и длительный, он обусловлен
появлением вируснейтрализующих антител, клеток иммунной памяти и
секреторных антител класса IgA.
Лабораторная диагностика: быстрое обнаружение вирусных антигенов
в отделяемом носоглотки с помощью РИФ; вирусологический метод и
определение специфических антител недостаточно надежны. Для
250
диагностики заболевания у детей первых шести месяцев жизни, которые
имеют материнские антитела в титре до 1:320, лучше использовать методы
обнаружения специфических антигенов с помощью РИФ или ИФА.
Специфическая профилактика не разработана.
Респираторные коронавирусы
Семейство коронавирусов (Coronaviridae) включает один род
Coronavirus, к которому относятся сложные вирусы с различной степенью
полиморфизма. Они имеют чаще всего округлую или овальную форму.
Диаметр их варьирует от 50 до 220 нм. Шипы длиной 12
−24 нм,
напоминают фигуру солнечной короны, в связи с чем семейство и
получило название коронавирусов. Нуклеокапсид имеет спиральный тип
симметрии. Геном представлен однонитевой нефрагментированной
позитивной РНК.
Некоторые штаммы обладают гемагглютинирующей активностью в
отношении эритроцитов кур, крыс, мышей, но не агглютинируют
эритроциты человека. Однако рецепторы для коронавирусов отличаются
от рецепторов для вирусов гриппа. Нейраминидазной активностью
коронавирусы не обладают.
Размножение происходит в цитоплазме, а морфогенез — на мембранах
эндоплазматического ретикулума с последующим почкованием в
цитоплазматические вакуоли. Вновь синтезированные вирионы выносятся
на
наружную
поверхность
мембраны
клетки
по
каналам
эндоплазматической сети.
В составе семейства коронавирусов насчитывается 13 сходных видов
вирусов, в том числе респираторные коронавирусы и энтеральные
коронавирусы человека. Коронавирусы человека имеют антигенное
родство со многими коронавирусами животных за исключением вируса
инфекционного бронхита кур.
Коронавирусы умеренно резистентны к действию внешних факторов, но
чувствительны к жирорастворителям, детергентам, УФ-лучам; неустойчивы в
среде с рН менее 3,0; быстро разрушаются при 56°С, лучше сохраняются при
низкой температуре (-70 °С). Коронавирусы плохо адаптируются к культурам
клеток. Некоторые из них размножаются только в органных культурах из
трахеи эмбриона человека, некоторые — в культурах ткани кишечника и
почек эмбриона человека. Оптимальная температура для размножения
вирусов 33
−35 °С.
Эпидемиология. Источником инфекции является только человек.
Заболевания носят спорадический характер, в основном отмечаются в
холодное время года. Наблюдаются локальные вспышки в детских
коллективах,
а
также
внутрисемейные
и
внутрибольничные.
Респираторные коронавирусы обладают высокой контагиозностью. Путь