Файл: Kurs_lektsiy_po_mikrobiologii_GGMU_2012.pdf

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 01.03.2019

Просмотров: 6534

Скачиваний: 2

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
background image

 

271

Лекция 26 
Гепатотропные вирусы 

 
Вирусные  гепатиты — группа  заболеваний  с  обязательным 

поражением гепатоцитов, определяющим всю или почти всю клиническую 
картину. Впервые инфекционный гепатит был выделен в самостоятельную 
нозологическую  единицу  в 1888 г.  выдающимся  русским  врачом  С.П. 
Боткиным. 

Вирусный гепатит А 
Вирусный  гепатит  А — инфекционная  болезнь  человека, 

характеризующаяся 

преимущественным 

поражением 

печени 

и 

проявляющаяся клинически интоксикацией и желтухой. Вирус гепатита А 
был обнаружен в 1973 г. С Фейнстоном и соавторами с помощью ИЭМ и 
путем  заражения  обезьян-шимпанзе  и  мармозет.  Открытие  Фейнстона 
было подтверждено в опытах на добровольцах. 

Вирус  гепатита  А  отнесен  к  роду Hepatavirus, семейству 

Picornaviridae.  Вирион  представляет  собой  «голый»  безоболочечный 
икосаэдральный  нуклеокапсид,  диаметр — 27

−30  нм.  Геном — 

однонитевая  позитивная  РНК.  Капсид  имеет 32 капсомера,  он  образован 
тремя  полипептидами (VP1

−VP3).  Капсидные  белки  объединяются  в 

понятие «антиген вируса гепатита A». В состав вируса входит и четвертый 
структурный  белок — VP4, который  тесно  связан  с  РНК.  В  антигенном 
отношении  вирус  гепатита A (HAV — hepatitis A virus) является 
однородным.  

HAV  хорошо  размножается  в  организме  шимпанзе,  павианов, 

гамадрилов  и  игрунковых  обезьян  мармозет. HAV не  вызывает 
деструкцию  зараженных  культур  клеток,  не  дает  выраженного  ЦПД,  что 
затрудняет  его  обнаружение.  Поэтому  культуры  клеток  используют  для 
накопления  вируса  как  диагностикума,  а  в  лабораторной  диагностике 
заболевания вирусологический метод не используют. 

Резистентность.  Вирус  относительно  устойчив  к  высокой 

температуре,  выдерживает  прогревание  при 60ºС  в  течение 12 часов, 
инактивируется  при 100ºС  за 5 минут.  Устойчив  к  кислотам, 
жирорастворителям (отсутствуют липиды), дезинфицирующим средствам, 
хорошо переносит низкую температуру. Все это способствует длительному 
сохранению  его  во  внешней  среде.  При  комнатной  температуре  он 
выживает  несколько  недель.  Высокорезистентен  к  хлору,  благодаря  чему 
способен проникать в водопроводную воду. Ультрафиолетовое облучение 
инактивирует вирус в течение 1 минуты. 

Эпидемиология. 

Вирус 

гепатита 

А 

имеет 

глобальное 

распространение:  с  ним  контактирует 70

−90%  населения  планеты. 


background image

 

272

Характерен  пик  заболеваемости  с  августа  по  ноябрь.  Источником 
инфекции является только инфицированный человек. Вирус выделяется в 
большом  количестве  с  испражнениями  за 12

−14  дней  до  появления 

клинических  симптомов  и  желтухи  и  продолжается  в  течение 3-х  недель 
желтушного  периода.  Механизм  заражения — фекально-оральный, 
главными  путями  являются  водный,  а  также  бытовой  и  пищевой.  Болеют 
преимущественно  дети  в  возрасте  до 14 лет.  В  этом  возрасте  инфекция 
чаще всего протекает бессимптомно или в легкой клинической форме. 
Патогенез,  клиника.  Инкубационный  период  варьирует  от 15 до 50 дней, 
но  в  среднем  составляет 28

−30  дней.  В  организме  вирус  гепатита  А 

размножается  в  регионарных  лимфатических  узлах,  проникает  в  кровь,  а 
затем  в  клетки  печени  и  вызывает  острый  диффузный  гепатит,  который 
сопровождается  поражением  гепатоцитов  и  ретикуло-эндотелиальных 
элементов  печени.  После  репликации  в  печени  вирус  поступает  вновь  в 
кишечный тракт и выделяется с фекалиями. 
Наиболее  типичной  картиной  гепатита  А  является  острая  желтушная 
циклическая 

форма: 

инкубационный 

период, 

продромальный 

(преджелтушный),  желтушный  период  и  реконвалесценция.  Однако  в 
очагах  инфекции  выявляется  большое  количество  больных  с 
безжелтушными  и  бессимптомными  формами  инфекции,  число  которых 
значительно преобладает над желтушными («феномен айсберга»). 
Постинфекционный  иммунитет  прочный  и  длительный,  обусловлен 
вируснейтрализующими антителами и клетками иммунной памяти, причем 
развивается он независимо от того, в какой форме перенесена инфекция. 
Методы вирусологической диагностики. 
Материал  для  исследования:  кровь,  фекалии.  Фекалии  для  определения 
антигена  вируса  получают  как  можно  раньше  от  начала  острого  периода, 
так  как  фаза  диагностически  значимого  выделения  возбудителя  с 
фекалиями  совпадает  с  окончанием  инкубационного  периода  и 
прекращается с нарастанием клинических симптомов. 
Лабораторная диагностика 

Для  диагностики  гепатита  А  надежным  и  специфическим  является 

метод иммунной электронной микроскопии, однако он очень трудоемкий, 
требует наличия электронного микроскопа, поэтому доступен в основном 
для исследовательских лабораторий.  

Для обнаружения геномов вируса гепатита А предложен метод ДНК-

зонда: используют в качестве зонда ДНК, комплементарную вРНК. 

Пока  наиболее  приемлемыми  являются  методы  ИФА  или  РИА  для 

определения 

антител, 

особенно 

в 

модификации 

«захвата 

иммуноглобулинов  класса  М».  Антитела  класса IgM появляются  уже  в 
инкубационном  периоде 

при  первичном 

иммунном 

ответе 

и 

свидетельствуют  об  активной  стадии  инфекции,  выявляются  у 100% 


background image

 

273

больных,  сохраняются  в  течение  6

−12  месяцев  после  перенесенного 

заболевания.  Антитела  к  ВГА  класса G (а-ВГА(G))  сохраняются 
пожизненно,  обеспечивая  приобретенный  иммунитет.  Их  выявление 
указывает на перенесенную в прошлом инфекцию. 

Лечение. 

Специфическое 

лечение 

отсутствует. 

Применяют 

препараты, 

обладающие 

дезинтоксикационными 

свойствами 

и 

способствующие улучшению функции печени, а также диетотерапию. 

Вирусный гепатит Е 
Возбудитель — вирус  гепатита  Е (HEV) — безоболочечный,  с 

кубическим  типом  симметрии,  имеет  сферическую  форму  с  шипами  и 
вдавлениями  на  поверхности.  На  сегодняшний  день — это 
неклассифицированный  вирус.  Диаметр  вириона 32

−34  нм,  геном 

представлен  однонитевой  нефрагментироваиной  позитивной  РНК.  Из 
экспериментальных  животных  к HEV восприимчивы  приматы,  удается 
воспроизвести гепатит Е у домашних свиней и у крыс. 

Эпидемиология. 

Источником 

инфекции 

является 

только 

инфицированный  человек.  Возбудитель  выделяется  с  испражнениями. 
Механизм  заражения — фекально-оральный.  Основной  путь  передачи — 
водный,  чаще  болеют  взрослые  от 15 до 40 лет.  Гепатит  Е  эндемичен  для 
территорий с очень плохим водоснабжением населения. 

Патогенез и клиника 
У 95% больных  гепатит  Е  протекает  в  легкой  или  средней  тяжести 

форме.  Возможность  хронического  течения  вирусного  гепатита  Е  не 
показана. Инкубационный период составляет в среднем около 30 дней, хотя 
может варьировать от 14 до 50 дней. Клинические проявления заболевания, 
в  первую  очередь — желтуха,  отмечаются  у 80% инфицированных,  но  и 
безжелтушные  формы  не  редкость.  Болезнь  начинается  постепенно, 
преджелтушный  период  продолжается  около 4-х  дней,  желтушность  кожи 
держится  в  течение  1

−3  недель.  Обычно  гепатит  Е  протекает 

доброкачественно и заканчивается самоизлечением. Персистенции вируса и 
хронизации процесса как и при гепатите А не бывает. 

Тяжелая  форма  болезни  наблюдается  чаще  всего  у  беременных, 

именно  у  них  могут  развиваться  фульминантные  формы.  Частота 
летальных  исходов  гепатита  Е  на  поздних  сроках  беременности  может 
достигать 25%. Особенно  опасен  он  в  последние  сроки  беременности, 
вызывая тяжелые кровотечения в родах. 

Лабораторная диагностика. 
Материал  для  исследования:  кровь.  Первый  забор  крови  для 

серологических исследований проводят с появлением у больного желтухи, 
повторный — не ранее, чем через 14 дней после первого. 


background image

 

274

В  настоящее  время  предложена  тест-система  для  обнаружения 

антител класса IgM к антигенам HEV.  

В  парных  сыворотках  крови  методом  ИФА  выявляются 

специфические иммуноглобулины класса G. 

Как и при гепатите А, в раннюю фазу болезни в крови примерно 75% 

больных можно выявить РНК HEV при помощи ПЦР. 

Вирусный гепатит В  
Гепатит  В — это  форма  гепатита  наиболее  опасная  по  своим 

последствиям среди всех известных форм вирусных гепатитов. 

Его возбудителем является вирус гепатита В (HBV). Впервые антиген 

вируса гепатита В был обнаружен Б. Блюмбергом в 1964 г. в сыворотке крови 
австралийского  аборигена,  а  сам  возбудитель  был  обнаружен  в 1970г  Д. 
Дейном с соавторами и получил название частиц Дейна. 

Вирус  гепатита  В  принадлежит  к  семейству Hepadnoviridae — 

гепатотропных  ДНК-содержащих  вирусов,

 

  имеет  сферическую  форму  и 

диаметр 40

−45 нм.  

Под  электронным  микроскопом  в  вирионах  отчетливо  видны  сердцевина 
(кор) — нуклеокапсид  вируса  и  наружная  липопротеиновая  оболочка — 
суперкапсид, в составе которого различают 3 белка: главный (основной) S-
белок (92%), большой (длинный) L-белок (1%) и средний М-белок (4%). 

В  составе  вириона  есть  три  основных  антигена.  Для  них  в 1974 г. 

были введены следующие обозначения: 

•  HBsAg — поверхностный (superficial) антиген. 

•  HBcAg — сердцевинный антиген (соr-антиген). 

•  HBeAg — антиген присутствует в составе вириона и циркулирует в 

крови в свободном виде или в виде комплекса с антителом анти-HBe. 
Он выделяется в кровь из гепатоцитов при активной репликации HBV. 

Поверхностный  антиген — HBsAg — существует  в  виде  трех 

морфологически различных вариантов: представляет суперкапсид цельного 
вириона;  в  большом  количестве  в  плазме  крови  встречается  в  виде  частиц 
диаметром 20 нм,  имеющих  сферическую  форму;  там  же  в  виде  нитей 
длиной 230 нм. Химически они идентичны. 

Геном  представлен  двунитевой  кольцевидной  ДНК,  однако  ее 

«плюс-нить»  на 20

−50% короче «минус» - нити. В ходе проникновения в 

клетку  происходит  удлинение  (достраивание)  короткой («плюс»)  цепи 
ДНК.  В  сердцевине  вириона  находится  кроме  геномной  ДНК  вирусная 
ДНК-зависимая ДНК-полимераза. 

«Минус»-нить ДНК HBV содержит всего четыре гена (S, С, Р и X), 

но они организованы очень компактно.  


background image

 

275

Белки, 

кодируемые S-геном (HBsAg), обладают 

высокой 

иммуногенностью,  поэтому  антитела  против  этих  антигенов  играют 
важную роль в формировании иммунитета против гепатита В. 

Ген С кодирует синтез капсидных белков (HBcAg и HBeAg). HBeAg 

—  важный  для  репликации  вируса  и  для  диагностики  антиген.  Он  не 
входит  в  состав  вириона,  а  сразу  после  трансляции  выводится  из  клетки, 
выделяется  в  кровь,  где  его  содержание  коррелирует  с  активностью 
вирусной  репликации.  Ген  Р — самый  большой,  кодирует  ферменты, 
необходимые  для  репликации  вируса.  Ген  Х  кодирует  белки, 
регулирующие экспрессию (выражение) всех вирусных генов, в частности 
белок  с  молекулярной  массой 17 кД,  который  является  трансактиватором 
транскрипции  генов.  С  этим  белком  связывают  трансформирующее 
действие вируса на гепатоциты. 

В составе вируса гепатита В нет онкогена, однако установлено, что, 

внедряясь  в  клеточную  хромосому,  вирусная  ДНК  может  индуцировать  в 
них  различные  генетические  перестройки — деления,  транслокации, 
амплификации, которые и могут стать причиной развития рака печени — 
одного из самых тяжких последствий вирусного гепатита В. 

Репродукция  гепаднавирусов  происходит  несколько  необычным 

образом.  В  частности,  репликация  геномной  ДНК  происходит  через 
промежуточное звено — РНК, т. е. с механизмом обратной транскрипции. 

Вирус  обнаруживается  в  различных  секретах  и  экскретах 

инфицированного: 

•  в слюне, носоглоточных выделениях, 
•  испражнениях, 

•  слезной жидкости,  

•  в сперме, 

•  менструальной крови и прочих. 

Заражение вирусом гепатита В практически возможно разными способами. 
Этому способствуют следующие факторы: 

•  присутствие  вируса  в  значимых  концентрациях  практически  во 

всех биологических жидкостях; 

•  высокая устойчивость вируса во внешней среде; 

•  высокая  чувствительность  человека  к  вирусу.  Для  возникновения 

инфекции достаточно попадания 0,0001 мл позитивной плазмы; 

•  высокая  концентрация  инфекционного  вируса  в  крови 

инфицированного. 

Патогенез и клиника 
Вирус  гематогенным  путем  заносится  непосредственно  в  печень.  В 

патогенезе  гепатита  важную  роль  играют  аутоиммунные  гуморальные  и