Файл: Kurs_lektsiy_po_mikrobiologii_GGMU_2012.pdf

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 01.03.2019

Просмотров: 6533

Скачиваний: 2

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
background image

 

276

клеточные реакции. Развивающийся хронический гепатит и цирроз печени 
можно рассматривать как аутоиммунное заболевание. 

Инкубационный  период  длится  от 45 до 180 дней,  в  среднем 

составляет 60

−90 дней. 

Приблизительно 10

−15%  инфицированных  с  типичной  желтушной  

инфекцией    дают  острый  гепатит.  Летальность  при  острых  формах 
гепатита составляет 0,1

−1%.  

HBV-перситенция  у 70

−90%  людей  протекает  как  бессимптомное 

носительство, в редких случаях завершающееся развитием гепатомы.  

У  детей  гепатит  В  протекает  в  более  легкой  форме  и  часто  без 

развития  желтухи,  у  детей  младшего  возраста — преимущественно 
бессимптомно. 

Постинфекционный 

иммунитет 

длительный,  обусловлен 

вируснейтрализующими антителами (анти-HBsAg) при отсутствии в крови 
поверхностного антигена.  

Нередко  наблюдается  скрытая  иммунизация  вследствие  повторного 

контакта  с HBV, которая  является  причиной  широкого  распространения 
иммунитета к вирусу среди населения.  

Лабораторная диагностика 
Материал для исследования: кровь, биоптаты печени.  

1. Выявление антигенов вируса гепатита В 
Выявление HBsAg указывает  на  инфицированность  ВГВ.  В  большинстве 
случаев HBsAg исчезает  в  течении 3-5недель  от  начала  заболевания.  В 
5

−10%  случаев HBsAg определяется  в  течение  более 6 месяцев 

(хроническая инфекция, носительство). 
Наличие HBeAg указывает: 

•  на репликацию вируса,  

•  образование дочерних вирионов, 

•  присутствие  в  крови  зрелого  инфекционного  вируса  (частиц 

Дэйна), 

•  на высокую инфекциозность крови и эпидопасность пациентов на 

этой стадии инфекции. 

HBeAg  появляется  позднее HBsAg, исчезает  раньше HBsAg. HBeAg 
выявляют  при  ОГВ  в  течение  6

−8  недель.  Более  длительная  его 

персистенция указывает на хронизацию инфекции. 
HBcAg  определяется  в  гепатоцитах  методом  РИФ  с  антисывороткой  к 
нему. HBcAg не выявляется в сыворотке крови.  
2. Определение антител к антигенам вируса гепатита В: а-НВс, а-НВе, a-HBs. 
В начале появляются а-НВс, затем а-НВе и, наконец, a-HBs. А-НВс класса М 
могут быть единственным маркером. Детекция а-НВс (М) в период желтухи, 
повышения  уровня  ферментов  (АлАТ,  АсАТ),  билирубина  и  других 


background image

 

277

нарушений  функции  печени  позволяет  ставить  лабораторный  диагноз  ОГВ. 
A-HBc  класса G обнаруживаются  у  больных  ОГВ  на  поздних  стадиях,  у 
хронических больных, у носителей HBsAg, у реконвалесцентов. Этот маркер 
сохраняется  пожизненно  и  используется  для  отбора  доноров  крови  в 
некоторых странах с низким уровнем носительства HBsAg среди населения. 
Анти-НВе антитела. 
Антитела к HBe обнаруживаются после появления анти-НВс и исчезают в 
течение года у 50% пациентов.  

Aнти-HBs антитела. 
Aнти-HBs  антитела  появляются  через  3

−4  месяца  после  начала 

заболевания,  сохраняются  в  течение 10 лет  и  более.  Поскольку  эти 
антитела являются вируснейтрализующими, их исчезновение через 10 лет 
у 

части 

пациентов, 

перенесших 

инфекцию, 

означает, 

что 

постинфекционный  иммунитет  при  гепатитах  типа  В  не  всегда  является 
пожизненным. Не исключена возможность развития повторных случаев В-
инфекции у одного и того же человека.  

Определение  ДНК  вируса  в  ПЦР.  ДНК  вируса  выявляется  в 

последние  недели  инкубационного  периода  и  в  течение  от 3 недель  до 3 
месяцев  острой  стадии  инфекции.  Наличие  вирусной  ДНК  в  крови 
указывает на репликацию вируса. 

Детекция вирионов (частиц Дэйна), трубчатых и сферических форм 

HBsAg в крови с помощью метода электронной микроскопии (негативного 
контрастирования) используется в научных исследованиях. 

Специфическая профилактика 
По  рекомендации  ВОЗ  прививки  против  гепатита  В  являются 

обязательными  и  должны  проводиться  на  первом  году  жизни.  Для 
вакцинации  используются  генно-инженерные  вакцины    «Энжерикс  В», 
«Рекомбивакс  В».  Продолжительность  поствакцинального  иммунитета  не 
менее  5

−6  лет.  Полный  курс  прививки  состоит  из 3 инъекций: 1 доза — 

сразу после рождения; II доза — в 1 мес.; III доза — в 5 мес. 

Гамма-глобулин, содержащий антитела против HBV, применяют для 

экстренной  пассивной  иммунопрофилактики  лицам,  имевшим  контакт  с 
больным гепатитом В. 

Дельта-гепатит (гепатит D) 
В 1977 г.  М.Ризетто  с  сотрудниками  обнаружили  еще  один 

инфекционный  агент,  названный  ими  дельта-антигеном,  способный 
вызывать  развитие  тяжелой  формы  гепатита.  Дельта-вирус (HDV) был 
обнаружен с помощью метода иммунофлуоресценции в ядрах гепатоцитов 
людей, страдающих хроническим гепатитом.  
Это  единственный  известный  вирус,  у  которого  геном  представлен 
кольцевидной  РНК.  По  структуре  генома  (кольцевидная  молекула  РНК) 


background image

 

278

вирус  дельта-гепатита  напоминает  вироиды.  В  настоящее  время 
классификации не поддается. 

Вирус дефектный (дельта-агент), мелкий сферический (36

−42 нм). В 

составе HDV имеется два белка. 
Дельта-вирус 

является 

дефектным 

вирусом, 

неспособным 

к 

самостоятельному  размножению,  вирус-помощник  для  него — HBV, 
суперкапсид HDV образован HBsAg HBV.  
HDV  оказывает  цитопатическое  прямое  действие  на  гепатоцит.  Его 
передача  происходит  парентерально  (с  кровью  или  ее  препаратами)  и  от 
матери  к  плоду.  Заболеваемость  гепатитом D коррелирует  с 
заболеваемостью гепатитом В. 

Лабораторная диагностика 
Антиген  вируса  определяется  в  сыворотке  крови  при  его 

демаскировке  после  обработки  детергентами,  солюбилизирующей HBsAg 
на поверхности HDV. 

Определение антител к HDV — а-HDV (М) и а-HDV (G). 
Определение  РНК HDV в  ПЦР:  положительный  результат 

исследования крови указывает на наличие инфекции. 

Специфическая профилактика 
Вакцинация  против  гепатита  В  является  средством  профилактики 

дельта-гепатита. 

Вирусный гепатит С 

Возбудитель — вирус  гепатита  С (HCV) — отнесен  к  семейству 
Flaviviridae,  род Hepacаvirus.  Вирион (55

−60нм  в  диаметре),  имеет 

суперкапсид.  Геном  представлен  одноцепочечной  плюс-РНК. HCV-белки 
— три структурных С, E1 и E2 и четыре неструктурных NS (участвуют во 
внутриклеточной репликации вируса). 

Дифференцируют от 6 до 11 генотипов и более 80 подтипов. Кроме 

того, вирус гепатита С отличается  высокой склонностью к мутациям,  что 
определяет  возможность  одновременного  инфицирования  несколькими 
близкородственными вирусами — псевдовидами. 

Эпидемиология и клиника 
Восприимчивость  населения  к HCV очень  высокая.  Поддержанию 

эпидемического  процесса  способствует  склонность  гепатита  С  к 
хроническому  течению.  Источником  инфекции  является  только  человек. 
Распространение вируса происходит: 

1.   трансфузионно при переливании крови и ее препаратов, 
2.   инструментальным  путем  в  результате  занесения  зараженной 

вирусом крови в организм здоровых людей, 

3.   от матери плоду. 


background image

 

279

Вирус  выделяется  от  больных  в  течение  одной  или  нескольких 

недель до появления признаков болезни и до 10 нед. после начала болезни. 
Инкубационный период составляет в среднем 6

−8 нед. 

Клиническая  картина  сходна  с  таковой  при  гепатите  В,  однако 

острые  формы  заболевания  протекают  легче  и  характеризуется 
относительно  быстрым  выздоровлением,  нередко  оно  протекает  без 
желтухи; последняя наблюдается примерно у 25% больных.  

Несмотря  на  относительно  благоприятное  течение,  около 50% всех 

форм инфекции приводят к формированию хронического гепатита, а около 
20% хронических поражений печени заканчивается циррозом и раком.  

Диагностика 
Материал  для  исследования:  кровь,  биоптаты  печени.  Уровень 

свободных  вирионных  частиц  и  вирусных  антигенов  ниже  порога 
чувствительности  современных  иммунохимических  реакций. «Золотым 
стандартом»  служит  обнаружение  вирусспецифических  РНК — 
последовательностей, при помощи ПЦР.  
Определение антител 
Скрининговые тесты. 
Анти-HCV  в ИФА с использованием тест-систем третьего поколения. 
Системы  ИФА-3,  сконструированные  на  основе  сердцевинного  (С22)  и 
неструктурных (NS3

−NS5) пептидов 

Скринирование  донорской  крови    в  ИФА-3  практически  исключает 
передачу вируса гепатита С реципиентам 
Подтверждающие тесты.  
Для  подтверждения  АТ  в  образцах  с  положительным  результатом  ИФА 
проводят: 

1.  ИФА  с  раздельным  определением  антител  к  различным  белкам 

вируса. 

2.  Иммуноблотинг  с  использованием  рекомбинантных  антигенов  или 

синтетических  пептидов,  кодируемых HCV–генами  С, NS3, NS4 и 
NS5. 

Результат  считается  положительным  при  выявлении  антител  к  двум  и 
более АГ. Антитела к вирусу гепатита С впервые могут быть обнаружены 
через 10

−14  дней  после  начала  заболевания.  В  первую  очередь 

определяются  антитела  класса  М  к  структурному  белку  С (core). В 
дальнейшем  дифференцированное  выявление  антител  к  различным 
вирусным белкам позволяет определить фазу заболевания.  

Определение HCV-PHK в крови 

Вирусная РНК определяется в сыворотке крови больных гепатитом С через 
1

−2  недели  после  заражения.  Наличие  в  крови  вирусной  РНК  служит 

маркером  репликации  вируса.  Стабильно  отрицательные  результаты 
определения РНК вируса свидетельствуют о выздоровлении пациента. 


background image

 

280

Вирус гепатита G 

Вирус  гепатита G был  включен  в  состав  семейства Flaviviridae, род 

Hepacаvirus,  но  в  последней  классификации  он  переведен  в 
неклассифицированные 

вирусы. 

Геном 

вируса 

представлен 

одноцепочечной РНК с позитивной полярностью. 

Клиническая значимость вируса гепатита G практически не изучена. 

Не  доказана  роль HGV при  гепатоцеллюлярной  карциноме,  в  развитии 
апластической  анемии.  Установлено,  что  этот  вирус  не  является  главной 
причиной  аутоиммунного  гепатита.  Отсутствие  репликативной  формы 
HGV  в  биоптатах  печени  говорит  о  том,  что  печень  не  является  главным 
местом репликации HGV. HGV реплицируется в мононуклеарных клетках 
крови.  Предполагают,  что  вследствие  своей  лимфотропности HGV может 
инфицировать  гепатоциты  при  попадании  лимфоцитов  в  печень,  при 
участии других факторов поражения печени. 

Лабораторная диагностика 

Материал  для  исследования:  кровь.  Определение  генома  (РНК)  вируса 
гепатита G методом ОТ-ПЦР. HGV-РНК обнаруживается у 1

−2% доноров 

крови.  Наличие  в  сыворотке  крови  РНК  вируса  гепатита G однозначно 
свидетельствует об инфицированости данного лица вирусом гепатита G. 

ТТ-вирусбыл  открыт  в 1997 г.  японскими  исследователями  с 

помощью  варианта  полимеразной  цепной  реакции  в  сыворотке  крови 
больного  посттрансфузионным  гепатитом.  По  последней  классификации 
вирусов  он  отнесен  к    семейству  Circinoviridae  (от  лат. circinatio-
описывающий круг) — группе ДНК-однонитевых вирусов. 

Дальнейшее  изучение  структуры  и  свойств  ТТV  показало,  что  это 

мелкий  (с  диаметром  вирусных  частиц  до 30

−50  нм)  ДНК-содержащий 

вирус, не обладающий липидной оболочкой. 

Печень  служит  основным  местом  репликации  вируса,  что 

доказывается  обнаружением  ДНК  ТТV  в  гепатоцитах  в  концентрациях  в 
10

−100 раз более высоких, чем в сыворотке и в плазме крови. 

TTV  передается  как  парентеральным,  так  и  фекально-оральным 

путем.  ДНК  обнаруживается  также  в  слюне,  слезной  жидкости,  семенной 
жидкости и вагинальном секрете. 

В  подавляющем  большинстве  исследований  показано,  что TTV не 

вызывает острый и хронический гепатит, гепатоцеллюлярную карциному, 
какие-либо  другие  заболевания  у  человека  и  не  оказывает  влияние  на 
течение инфекции других гепатотропных вирусов. TTV и его клиническое 
значение оказались сходными с HGV. Полагают, что если HGV и TTV не 
имеют прямой патогенетической роли при болезнях печени, то они могут 
быть вирусами или агентами с другими свойствами, которые также строго 
не ассоциируются с болезнями печени.