Файл: Kurs_lektsiy_po_mikrobiologii_GGMU_2012.pdf

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 01.03.2019

Просмотров: 6529

Скачиваний: 2

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
background image

 

286

В 

крови 

ВИЧ-инфицированных 

обнаруживаются 

антитела 

практически  ко  всем  структурным  белкам  ВИЧ  (р15,  р17,  р24.  р31,  р41, 
р51,  р55,  р66, gp120, gp160). В  качестве  ВИЧ-антигенов    при  постановке 
иммуноферментного  анализа  (ИФА)  обычно  применяют  производные 
GAG-  и ENV-комплекса.  Сегодня  уже  не  пользуются  материалом  из 
вирусных  культур,  а  предпочитают  рекомбинантные  или  синтетические 
пептиды, аналогичные природным  ВИЧ-антигенам.  Обнаружение антител 
говорит о зараженности вирусом и эпидемической опасности его носителя. 
Необходимо  помнить  о  том,  что  существует  возможность  появления 
ложноположительных результатов ИФА.  

Подтверждающим  или  снимающим  положительный  результат  ИФА 

является иммуноблотинг (ИБ).  

У  пациентов  в  терминальном  периоде  заболевания  концентрация 

антител  к  ВИЧ  может  значительно  снижаться,  что  приводит  к 
ложноотрицательным  результатам  ИФА  и  ИБ.  Дополнительно  к 
иммуноблотингу  (или  вместо  него)  для  решения  спорных  вопросов 
пользуются  прямыми  ВИЧ-маркерами — присутствием  в  крови  главного 
нуклеокапсидного белка (р24) и ВИЧ-генома. Антигенные и генетические 
различия между ВИЧ-1 и ВИЧ-2 требуют специальных (специфичных для 
каждого  из  них)  диагностических  тест-систем.  Они  могут  быть 
объединены в общие диагностикумы, но суть от этого не меняется. 

В  настоящее  время  одним  из  наиболее  эффективных  методов 

прямого выявления ВИЧ считают полимеразную цепную реакцию (ПЦР).  

Вирусологический  метод  мало  применяется  из-за  сложности 

культивирования  вируса.  Культура  ВИЧ-1 (культура  мононуклеарных 
клеток)  применяется  для  выявления  инфекции  у  новорожденных  от 
инфицированных ВИЧ-1 матерей. Этот тест может также играть роль при 
окончательном  диагнозе  у  лиц  с  повторно  неопределенным  Вестерн-
блоттингом. 

Лечение и профилактка ВИЧ-инфекции 
На  сегодняшний  день  основой  терапии  ВИЧ-инфекции  являются 

антиретровирусные препараты.  

Выделяют три группы данных препаратов:  
1.  Нуклеозидные  ингибиторы  обратной  транскриптазы  ВИЧ: 

зидовудин, ставудин, диданозин, зальцитабин, абакавир, ламивудин. Сюда 
же  относят  и  нуклеотидные  ингибиторы  обратной  транскриптазы  ВИЧ: 
фосфазид, тенофовир. 

2.  Ненуклеозидные  ингибиторы  обратной  транскриптазы  ВИЧ: 

невирапин, ифавиренц, делавердин. 

3.  Ингибиторы  протеазы  ВИЧ:  саквинавир,  индинавир,  ритонавир, 

нелфинавир, ампренавир, лопинавир. 


background image

 

287

Больным  с  бессимптомной  ВИЧ-инфекцией  лечение  предлагают, 

если  число CD4-клеток  составляет  менее 500 в 1 мм3  или  концентрация 
РНК  ВИЧ  превышает 20000 (ПЦР)  копий/мл.  Наиболее  эффективной 
считают  комбинацию  одного  ингибитора  протеазы  и  двух  нуклеозидных 
ингибиторов обратной транскриптазы [. 

Проблема  специфической  профилактики  заключается  в  получении 

высокоэффективной 

вакцины. 

Получение 

эффективных 

вакцин 

значительно  ограничено  высокой  изменчивостью  вируса  и,  в  частности, 
изменчивостью антигена gp 120. 

 

МЕДЛЕННЫЕ ИНФЕКЦИИ 
Медленные инфекции — основные признаки. 
1.  Необычно продолжительный (месяцы и годы) инкубационный период. 
2.  Медленно прогрессирующий характер течения. 
3.  Необычность поражения органов и тканей. 
4.  Необратимые поражения ЦНС. 
5.  Неизбежность смертельного исхода. 
Медленные  инфекции  имеют  вирусную  или  прионовую  этиологию. 
Вирусы, вызывающие медленные инфекции делят на две группы: 
1. Вирусы ― факультативные возбудители медленных инфекций: 

•  вирус  кори  (подострый  склерозирующий  коревой  панэнцефалит — 

ПСКП); 

•  вирус  краснухи  (прогрессирующая  врожденная  краснуха — ПВК, 

прогрессирующий краснушный панэнцефалит — ПКП); 

•  вирус  герпеса  (подострый  герпетический  энцефалит — ПГЭ, 

хронический инфекционный мононуклеоз – ХИМ); 

•  вирус клещевого энцефалита; 

•  вирус бешенства (хроническая рабическая инфекция). 

2. Вирусы ― облигатные возбудители медленных инфекций: 

•  вирус JC — прогрессирующая многочаговая лейкоэнцефалопатия — 

ПМЛ; 

•  ВИЧ. 

Прионы 

Этиологическим  фактором  выступает  безнуклеиновый  белок, 

названный  Прузинером  прионовым  белком  или  прионом.  Прионы — 
группа низкомолекулярных белков с молекулярной массой 27

−30 кД. 

Особенности прионов: 

•  не имеют в составе нуклеиновых кислот; 

•  не индуцируют иммунный ответ; 

•  не способны размножаться на искусственных питательных средах; 

•  имеют специфический круг поражаемых хозяев; 


background image

 

288

•  длительно  персистируют  в  организме  больного  человека  и 

животного, а также в культуре клеток из пораженного организма. 

Патогенез  поражений,  обусловлен  способностью  прионового  белка 

вызывать мутацию гена, кодирующего синтез нормального нейронального 
прионового  белка  клетки,  в  результате  чего  начинается  синтез  белка 
скрейпи — PrPc  ----PrPSc ----PrPc+PrPSc =2 PrPSc  ---- 4 =8 =16 PrPSc 
таким  образом,  мутировавший  ген  становится  источником  наработки 
приона скрейпи.  

Отличия PrSc от PrPC 

1. инфекционность; 
2. уникальные физико-химические свойства: 

•  резистентность к кипячению; 
•  резистентность к действию паров 70% этанола и формальдегида; 

3. сохранение в фиксированных 10% раствором формальдегида тканях; 
4. инертность к действию реагентов, разрушающих нуклеиновые кислоты; 
5. 

нечувствительность 

к 

действию 

веществ, 

разрушающих, 

денатурирующих и модифицирующих белки.  

Инфекционный  прионовый  белок  накапливается  в  цитоплазменных 

везикулах,  откладывается  в  амилоидных  бляшках,  что  приводит  к 
нарушению  функции  синапсов  и  развитию  неврологических  дефектов.  
Прионовые  болезни  характеризуются  практически  полным  отсутствием 
значимых 

иммунных 

реакций, 

генерализованной 

гипертрофией 

астроцитов, выраженной губчатой дегенерацией мозгового вещества. 
Типичные неврологические симптомы прионовых заболеваний человека: 

•  расстройство 

сенсорной 

сферы: 

потеря 

и 

извращение 

чувствительности,  выпадение  функций  органов  чувств,  амнезия 
различной степени; 

•  нарушения  в  двигательной  сфере:  атаксия,  обездвижение,  атрофия 

мышц (в т.ч. дыхательных); 

•  нарушения  психики  ―  депрессия,  сонливость,  агрессивность, 

снижение интеллекта вплоть до полного слабоумия. 

У человека прионы вызывают следующие заболевания: болезнь куру, 

болезнь  Кройтцфельдта-Якоба  (БКЯ),  синдром  Герстмана-Штраусслера-
Шайнкера, Фатальную семейную бессонницу. 

Ятрогенные  факторы  передачи  БКЯ:  иглы,  имплантируемые 

электроды,  пересадка  роговицы,  др.  виды  трансплантаций,  донорская 
кровь  и  препараты  крови,  в  стоматологии  ―  блокада  нерва,  операция  на 
нервном канале. 


background image

 

289

Лекция 28 

ДНК-геномные вирусы. Онкогенные вирусы. 

 

ДНК-геномные    вирусы    репликацию  проходят  преимущественно  в 

ядре  клетки.  Они    менее  изменчивы,  чем  РНК-геномные,  длительно 
персистируют в организме инфицированного. 

В  патологии  человека  имеют  значение  вирусы  из 7 семейств  ДНК-

содержащих вирусов. Самыми крупными (230

−400 нм), и самыми сложно 

устроенными из них являются вирусы оспы — семейство Poxviridae. 

Состав семейства: 
Entopoxvirinae 

•  вирусы насекомых 

Chordopoxvirinae 

•  вирус натуральной оспы 

•  вирус оспы обезьян 

•  вирус оспы коров 

•  вирус осповакцины 
•  вирус контагиозного моллюска 

Вирусы  имеют  сердцевину  гантелеобразной  формы  и  боковые 

белковые тела. Геном — двухнитевая линейная ДНК. Наружная оболочка 
содержит  трубчатые  белковые  структуры.  Химический  состав  вирусов 
напоминает состав бактериальной клетки: он содержит кроме белка и ДНК 
и нейтральные жиры, фосфолипиды и углеводы. В составе вирусов около 
80  белков, 30 из  них  являются  структурными.  Из-за  своих  значительных 
размеров  вирионы  могут  обнаруживаться  в  клетках  при  световой 
микроскопии — тельца Пашена. 

Вирусы  оспы  обладают  гемагглютинирующими  свойствами.  Общий 

антиген для всего семейства — NP-белок, нуклеопротеидный.  

Поксвирусы выдерживают высушивание в течение многих месяцев, в 

отличие  от  других  сложных  вирусов,  они  устойчивы  к  эфиру,  этанолу, 
большинству дезинфицирующих средств. 

Вирус размножается в куриных эмбрионах при заражении на ХАО — 

мелкие  бляшки;  размножается  также  и  в  аллантоисной  и  амниотической 
полостях,  в  желточном  мешке.  Вирус  натуральной  оспы  хорошо 
размножается как в первичных так и в перевиваемых культурах клеток. В 
культурах  клеток  ЦПД  (очаговая  дегенерация),  цитоплазматические 
включения — тельца Гварньери. 

Иммунитет после перенесенной инфекции пожизненный. 
Герпесвирусы 
Состав семейства Herpesviridae 
Alphaherpesvirinae 


background image

 

290

•  ВПГ-1 (HSV-1) 

•  ВПГ-2 (HSV-2) 

•  ВПГ-3 (VZV-3) 
•  Betaherpesvirinae 

•  ЦМВ 5 (CMV) 

•  ВГЧ 6 

•  ВГЧ 7 

Gammaherpesvirinae 

•  вирус Эпштейна-Барр 4 (EPV) 

•  ВГЧ-8 

Герпесвирусы — сложные,  суперкапсидные,  Размер  вириона  ― 

150

−250  нм,  размер  нуклеокапсида — 100 нм.  Капсид  состоит  из 162 

капсомеров  Геном — двухнитевая  линейная  ДНК,  состоит  из  двух 
фрагментов:  длинного L и  короткого S. В  составе  вирионов  герпеса 
находится  примерно 30

−33  белка,  в  том  числе 5 гликопротеидов, 

обозначаемых gA, gB, gC, gD, gE. В  зараженной  клетке,  кроме  того, 
синтезируется около 20 неструктурных белков. 

После раздевания в инфицированной клетке ДНК транспортируется в 

ядро,  где  проходит  окончательная  депротеинизация,  синтез  в  ядре  новых 
нуклеокапсидов, их отпочковывание от ядерной мембраны и поступление 
в цитоплазму полностью сформированных вирионов. 

Особенности герпесвирусных инфекций: 

•  практически поголовная инфицированность (с 3-5 лет) 

•  полиорганный тропизм 

•  длительная персистенция 

•  выраженная иммуносупрессия на фоне ГВИ 

•  образование ИК — аллергия 

•  трансплацентарное  заражение  (внутриутробная  и  неонатальная 

патология)  

•  возможна интегративная инфекция 

•  онкогенность 

Диагностика инфекций, вызываемых вирусами герпеса. 
1.Быстрая  диагностика  (материал — мазки-отпечатки  из  соскоба 

герпетических везикул): 

1)  окраска 

по 

Романовскому-Гимзе — наличие 

гигантских 

многоядерных  клеток  с  внутриядерными  включениями  (тельца 
Каудри); 

2)  выявление антигена в прямой или непрямой РИФ; 
3)  ДНК-ДНК гибридизация (геном); 
4)  ПЦР (геном). 

2.Вирусологическая диагностика