ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 01.03.2019
Просмотров: 6332
Скачиваний: 2
291
Вирусы выделяют во всех трех системах.
а. Куриные эмбрионы 12-дневные заражают на ХАО — через 48 ч на
ХАО бляшки-оспины, в которых при микроскопии отпечатков видны
гигантские клетки с внутриядерными включениями.
б. Вирус размножают в культурах клеток эмбриона человека, клетки
почек обезьян, кроликов, коровы.
Инфекционный материал вносят одновременно с посевом клеток. В
культурах ЦПД — округление клеток (преимущественно в культуре
эпителия), появление гигантских многоядерных клеток (преимущественно
в культурах фибробластов). В зараженных клетках появляются
внутриядерные включения (ранние тельца Каудри).
Идентификацию вируса проводят в РН и РНИФ с сыворотками
реконвалесцентов.
в. Мыши-сосунки — заражение в мозг или внутрибрюшинно.
Симптомы энцефалита на 2
−3 день. Гибель через 3−4 дня. Кроликов и
морских свинок заражают на скарифицированную роговицу —
кератоконьюнктивит через 1
−2 суток.
Серодиагностика. Нарастание титра антител определяют в РСК,
РНИФ, ИФА. В качестве антигена в РСК используют экстракт зараженных
клеточных культур после их трехкратного замораживания и оттаивания. В
условиях массового носительства вируса серологический метод
малоинформативен.
Вирус ветряной оспы — зостер (VZV)
VZV идентичен вирусу простого герпеса по морфологическим,
биологическим и антигенным свойствам. Отличие — он не размножается в
организме лабораторных животных. Вирус VZV может вызывать у детей
ветряную оспу, проявляющуюся в развитии везикулезной сыпи на коже и
слизистых. У взрослых (и крайне редко у детей) этот же вирус вызывает
опоясывающий лишай (зостер).
Этот вирус относится к семейству Herpesviridae, подсемейству
Alphaherpesvirinae, роду Herpesvirus. Он идентичен вирусу простого
герпеса по морфологическим, биологическим и даже антигенным
свойствам, но он не размножается в организме лабораторных животных.
Патогенез и клиника. Вирус VZV передается воздушно-капельным
путем, источник инфекции — больной человек. Первичное размножение
вируса происходит в эпителии слизистой оболочки верхних дыхательных
путей. Далее лимфогенным путем вирус проникает в кровь, с ней - в кожу.
Инкубационный период при ветряной оспе — 14
−21 день. Высыпания
новых пузырьков продолжаются 3
−4 дня, содержимое их включает
огромное
количество
вируса.
Ветряная
оспа
новорожденных
характеризуется высокой смертностью (до 20%). Осложнением является
292
энцефалит, пневмония. В первые три месяца беременности перенесенная
ветряная оспа у женщин может привести к врожденным уродствам плода.
При опоясывающем лишае вслед за недомоганием и подъемом
температуры появляются сильнейшие боли в области слизистой оболочки
или кожи, иннервируемой одной или несколькими группами
чувствительных ганглиев. Через несколько дней в этой зоне появляются
пузырьки. Чаще всего это наблюдается на туловище (по ходу
межреберного нерва), на коже головы или шеи.
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования является
содержимое кожных высыпаний, отделяемое носоглотки, кровь.
Быстрая диагностика. В мазках-отпечатках, полученных из жидкости
свежих везикул при окраске по Романовскому-Гимзе выявляют гигантские
многоядерные клетки и внутриядерные включения. Для выявления
специфического антигена используют РИФ, ИФА. Вирус может быть
выявлен при ИЭМ.
Выделение вируса. Наибольшей чувствительностью к вирусу
обладают клетки эмбриона человека, но можно использовать клетки почек
обезьян, кроликов, коровы. В зараженных клетках появляются
внутриядерные включения. Идентификацию вируса проводят в РН и РИФ,
используя сыворотки реконвалесцентов с высоким титром антител.
Серологическая диагностика. Проводится в РН в культуре клеток,
ИФА, РСК. В качестве антигена в РСК используют экстракт зараженных
клеточных культур после их трехкратного замораживания и оттаивания.
Профилактика. Эффективным методом профилактики является
введение γ-иммуноглобyлинa. Заболевшие ветряной оспой подлежат
изоляции от детского коллектива.
Цитомегалия (ЦМВ-инфекция) — антропонозная вирусная
инфекция с длительным латентным течением и персистенцией
возбудителя, которая может протекать с периодическими обострениями,
иногда с генерализацией инфекционного процесса. Клинически
выраженная — манифестная инфекция характеризуется поражением
различных внутренних органов и систем с полиморфными клиническими
симптомами и формированием в пораженных тканях гигантских
(цитомегалических) клеток с крупными внутриклеточными включениями.
У новорожденных детей и людей с иммунодефицитами ЦМВ-
инфекция может приобретать тяжелое, опасное для жизни течение,
поэтому это заболевание относят к оппортунистическим инфекциям.
Доказательством инфицированности людей ЦМВ является наличие
вирусспецифических антител, которые присутствуют у 70
−80%
обследованных взрослых людей старше 30 лет.
293
Цитомегаловирус (ЦМВ) — входит в семейство Herpesviridae,
подсемейство β-Herpesvirinae, род Cytomegalovirus, он представлен
несколькими серотипами.
Биологические свойства.
По своему строению и биологическим свойствам ЦМВ сходен с
вирусом простого герпеса, но имеет ряд отличий. У ЦМВ самый большой
геном
среди
герпесвирусов.
Наиболее
продолжительный
цикл
репродукции (от 48 до 96 часов).
При культивировании в культуре клеток фибробластов или
диплоидных клеток легких человека (ДКЧЛ) вирус оказывает характерное
ЦПД, проявляющееся в образовании цитомегалических клеток с
внутриядерными включениями, представляющими собой компактные
скопления незрелых вирионов и ядерного хроматина. Эти крупные
включения часто бывают единичными, окружены светлым ободком и вся
структура напоминает «совиный глаз». Подобные цитомегалические
клетки обнаруживают и при ЦМВ-инфекции в пораженных тканях, чаще
всего в слюнных железах и почках. Выделяется вирус в окружающую
среду со слюной, мокротой, слезной жидкостью, мочой, испражнениями,
спермой, секретом шейки матки, грудным молоком. При латентной форме
инфекции также происходит периодическое выделение ЦМВ, чаще с
мочой, а также со слюной
Основные механизмы и пути передачи — контактный, воздушно-
капельный, фекально-оральный, половой, вертикальный, парэнтеральный,
в том числе ятрогенный, осуществляемый от серопозитивных доноров
серонегативным реципиентам, главным образом, при переливании крови
или ее препаратов и при трансплантации органов, чаще всего почек.
Особую опасность представляет внутриутробное заражение плода от
инфицированной ЦМВ беременной женщины, а также заражение
новорожденного при прохождении через родовые пути или постнатально
— через грудное молоко и при тесном контакте с матерью (обычно через
слюну). Если женщина заразилась цитомегалией но время беременности
и/или у нее развилась генерализованная инфекция, то частота заражения
плода до 50% и более.
Вирусы пожизненно персистируют в инфицированных клетках, при
этом возможна ограниченная репликация. Как правило, возникает
латентная инфекция. ЦМВ обладает тропизмом практически ко всем
внутренним органам и системам. В зависимости от пораженного органа,
манифестная форма инфекции может проявляться в виде гепатита,
пневмонии, энтероколита, нефрита, энцефалита и др., но чаще всего
заболевание протекает подобно мононуклеозу.
Цитомегалический синдром часто встречается при ВИЧ-инфекции,
поэтому цитомегалия считается ВИЧ-ассоции-рованной инфекцией и при
294
ее манифестации является обязательным обследование больного на ВИЧ-
инфицированность.
Лабораторная диагностика ЦМВ-инфекции
Применяют цитологический, вирусологический, серологический и
молекулярно-генетические методы диагностики.
Исследуемые материалы: моча, слюна, кровь, ликвор, грудное молоко
и другие биологические жидкости и выделения больного.
Цитологическому исследованию подвергают осадки мочи, слюны,
мокроты и других материалов, в которых могут быть обнаружены
цитомегалические клетки. Приготовленные микропрепараты окрашивают
гемотоксилин-эозином или по Романовскому-Гимзе. Присутствие
характерных гигантских клеток («совиный глаз») служит надежным
доказательством ЦМВ-инфекции.
Вирусологический метод заключается в выделении вируса из
исследуемого материала путем заражения чувствительных культур клеток.
Метод дает надежные результаты, но трудоемок, продолжителен и
доступен не всем лабораториям.
Серологический метод применяют для выявления специфических
антител в сыворотке больного и повышения их титра. Используют РСК,
РИГА, РН, ИФА и другие серологические реакции. Особенно ценен ИФА,
позволяющий определить наличие по отдельности IgM и IgG. По
результатам реакции судят о типе инфекции: на первичную острую ЦМВ-
инфекцию указывает присутствие только IgM, при рецидивах
(обострениях) выявляют IgM и IgG, наличие только IgG указывает на
латентную, хроническую инфекцию.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является чувствительным
методом, позволяет выявлять присутствие вирусспецифической ДНК в
выше перечисленных исследуемых материалах.
Аденовирусы
Первые представители семейства аденовирусов были выделены в 1953
г. У. Роу с соавторами из миндалин и аденоидов детей, в связи с чем и
получили такое название. Семейство Adenoviridae разделяется на два рода:
Mastadenovirus ― аденовирусы млекопитающих, он включает аденовирусы
человека (41 серовариант), обезьян (24 сероварианта), а также крупного
рогатого скота, лошадей, овец, свиней, собак, мышей, земноводных; и
Aviadenovirus — аденовирусы птиц (9 серовариантов).
Аденовирусы простые, безоболочечные вирусы. Вирион имеет форму
икосаэдра диаметром 70
−90 нм, капсид состоит из 252 капсомеров. Группы
из 9 капсомеров образуют 20 равносторонних граней (180 капсомеров), а
по их углам расположены 12 вершин, состоящих из 6 капсомеров (72
капсомера). На двенадцати вершинах икосаэдра имеются нитчатые
295
выступы (фибры) длиной 8
−30 нм, заканчивающиеся головкой диаметром
4 нм. Внутри капсида находится сердцевина, представляющая собой
структуру из 12 петель, вершины которых направлены к основаниям
вершинных капсидов, поэтому сердцевина вириона на срезе имеет форму
цветка. Геном аденовирусов представлен двунитевой линейной ДНК.
Количество генов в молекуле ДНК точно не установлено. У
аденовирусов человека на долю белков приходится 86
−88% от массы
вириона. Общее число их, вероятно, более 30.
В составе вириона выявлено не менее 7 антигенов.
Антиген А (гексон) является группоспецифическим и общим для всех
аденовирусов человека.
По антигену В (подгрупповой) и связанной с ним способностью
агглютинировать разные виды эритроцитов все аденовирусы человека
подразделяются на три подгруппы.
Антиген С (нити, фибры) является типоспецифическим. По этому
антигену все аденовирусы человека делятся на 41 серовариант. Все
аденовирусы человека, кроме серовариантов 12, 18 и 31, обладают
гемагглютинирующей активностью.
Жизненный цикл аденовирусов при продуктивной инфекции
начинается с адсорбции на специфических рецепторах клеточной
мембраны с помощью головки фибров. Проникновение в клетку с
помощью
механизма
рецепторопосредованного
эндоцитоза,
сопровождающегося
частичным
раздеванием
в
цитоплазме,
а
окончательная депротеинизация генома происходит у ядерной мембраны.
Затем геном проникает в ядро.
Процессы транскрипции и репликации происходят в ядре, процесс
трансляции — в цитоплазме, откуда белки транспортируются в ядро. В
ядрах
инфицированных
клеток
вирионы
нередко
образуют
кристаллические скопления. Выход вновь синтезированных вирионов
сопровождается разрушением клеток. Аденовирусы за исключением
серотипов 38
−41 хорошо размножаются в первично-трипсинизированных
и перевиваемых культурах клеток различного происхождения, вызывая два
типа цитопатических изменений: округление клеток и образование из них
гроздевидных скоплений, которые вскоре отслаиваются от стекла, и
мелкоточечную дегенерацию, с образованием мелких круглых клеток.
Особенности эпидемиологии. По сравнению с другими вирусами
человека аденовирусы несколько более устойчивы во внешней среде, не
разрушаются жирорастворителями (нет липидов), не погибают при 50°С и
при рН 5,0
−9,0; хорошо сохраняются в замороженном состоянии.
Источник инфекции — только больной человек, в том числе со
скрытой ее формой. Заражение происходит воздушно-капельным,
контактно-бытовым путем, через воду в плавательных бассейнах.